预防水三氮指标测定课件

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1、预防水三氮指标测定1三氮指标测定三氮指标测定代兴碧代兴碧20201111-0505-16-16预防水三氮指标测定2三氮指标测定三氮指标测定 主要内容主要内容 一、概一、概 述述(一一)三氮指标的概念三氮指标的概念(二二)卫生学意义卫生学意义(三）三氮指标的一般情况三）三氮指标的一般情况（四）三氮物质对人体健康的影响及卫生标准（四）三氮物质对人体健康的影响及卫生标准（五）样品的采集和保存（五）样品的采集和保存（六）测定方法（六）测定方法 二、水中亚硝酸盐氮的测定二、水中亚硝酸盐氮的测定预防水三氮指标测定3重点内容：重点内容：水中亚硝酸盐氮的测定水中亚硝酸盐氮的测定预防水三氮指标测定4三氮指标测定

2、三氮指标测定一、概一、概 述述 (一一)三氮指标的概念三氮指标的概念1.1.氨氮氨氮(NH(NH3 3NN，ammonia nitrogen)ammonia nitrogen)氨氮（氨氮（NHNH3 3-N-N）即以氨（）即以氨（NHNH3 3 ）形式存在）形式存在的氮（的氮（N N）。测定的是氨（）。测定的是氨（NHNH3 3），但），但测定结果以氮的量表示出来测定结果以氮的量表示出来(N,mg/L)(N,mg/L)。预防水三氮指标测定5三氮指标测定三氮指标测定2.2.亚硝酸盐氮亚硝酸盐氮(NO(NO2 2NN，nitrite nitrite nitrogen)nitrogen)亚硝酸盐氮（

3、亚硝酸盐氮（NONO2 2-N-N）即以亚硝酸盐（）即以亚硝酸盐（NONO2 2）形式存在的氮（）形式存在的氮（N N）。测定的是亚硝）。测定的是亚硝酸盐（酸盐（NONO2 2），但测定结果以氮的量表），但测定结果以氮的量表示出来示出来(N,mg/L)(N,mg/L)。3.3.硝酸盐氮硝酸盐氮(NO(NO3 3NN，nitrate nitrogen)nitrate nitrogen)硝酸盐氮（硝酸盐氮（NONO3 3-N-N）即以硝酸盐（）即以硝酸盐（N NO O3 3）形式存在的氮（形式存在的氮（N N）。测定的是硝酸盐）。测定的是硝酸盐（NONO3 3），但测定结果以氮的量表示出），但测定

4、结果以氮的量表示出来来(N,mg/L)(N,mg/L)。预防水三氮指标测定6三氮指标测定三氮指标测定（二）卫生学意义（二）卫生学意义 有机物中含氮有机物最不稳定，最初进入水中时，多有机物中含氮有机物最不稳定，最初进入水中时，多是复杂的有机氮形式，例如，各种蛋白质等。受微生是复杂的有机氮形式，例如，各种蛋白质等。受微生物作用后，逐渐分解成多肽、氨基酸、氨（物作用后，逐渐分解成多肽、氨基酸、氨（NHNH4 4+）、亚）、亚硝酸盐（硝酸盐（NONO2 2）、硝酸盐（）、硝酸盐（NONO3 3 ）。）。蛋白质蛋白质多肽多肽氨基酸氨基酸氨氨亚硝酸盐亚硝酸盐硝酸盐硝酸盐尿素尿素氨氨亚硝酸盐亚硝酸盐硝酸盐硝

5、酸盐 这样一个过程是有机物无机化的过程，也是河流自净这样一个过程是有机物无机化的过程，也是河流自净的过程。在这个过程中，如果由于人畜粪便污染而存的过程。在这个过程中，如果由于人畜粪便污染而存在致病微生物，也能逐渐消除。所以，测定各类含氮在致病微生物，也能逐渐消除。所以，测定各类含氮化合物可以了解水源被含氮有机物污染的情况，并协化合物可以了解水源被含氮有机物污染的情况，并协作了解水源自净的情况和致病微生物是否消除的情况。作了解水源自净的情况和致病微生物是否消除的情况。预防水三氮指标测定7三氮指标测定三氮指标测定 用三氮指标进行水质卫生学评价可参考用三氮指标进行水质卫生学评价可参考下表下表：预防水

6、三氮指标测定8三氮指标测定三氮指标测定表表 三种含氮化合物在水中出现的意义三种含氮化合物在水中出现的意义 NH3-N NO2-N NO3-N 意意 义义+0.050.5-0.01少少 -1.0少少 表示水新近被污染表示水新近被污染+0.050.5 +0.010.3-1.0少少 表示新近被污染，分解正在进行表示新近被污染，分解正在进行+0.050.5 +0.010.3 +1.0多多 以前被污染，已开始分解并仍有新污染以前被污染，已开始分解并仍有新污染 -0.05少少 +0.010.3 -1.0少少 水中污染物已分解，趋向自净水中污染物已分解，趋向自净 +0.050.5 -0.01少少 +1.0多

7、多 污染物分解已完成，现又有污染污染物分解已完成，现又有污染 -0.05少少 +0.010.3 +1.0多多 污染物已分解，但未完全自净污染物已分解，但未完全自净,或是硝酸盐还原成还原成亚硝酸盐或是硝酸盐还原成还原成亚硝酸盐 -0.05少少 -0.01少少 +1.0多多 水中污染物都已分解达到了净化水中污染物都已分解达到了净化 -0.05少少 -0.01少少 -1.0少少清洁水清洁水注：注：“+”表示出现。表示出现。“-”表示没有出现。表示没有出现。（二）卫生学意义（二）卫生学意义预防水三氮指标测定9三氮指标测定三氮指标测定(三）三氮指标的一般情况三）三氮指标的一般情况 1.氨氮氨氮(NH(N

8、H3 3NN，ammonia nitrogen)ammonia nitrogen)氨氮氨氮(NH(NH3 3NN，ammonia nitrogen)ammonia nitrogen)以以游离氨游离氨(NH(NH3 3，也称非离，也称非离子氨子氨)或或铵盐铵盐(NH(NH4 4+)的形式普遍存在于地下水及地面水中，的形式普遍存在于地下水及地面水中，其存在形式取决于水体的酸碱度。未受污染的地下水中氨其存在形式取决于水体的酸碱度。未受污染的地下水中氨氮含量一般低于氮含量一般低于0.2mg0.2mgL L，地表水中氨氮含量比地下水高。地表水中氨氮含量比地下水高。用氯胺消毒的饮水可产生微量氨氮用氯胺消毒

9、的饮水可产生微量氨氮。由于生活污水中含氮。由于生活污水中含氮有机物受微生物作用可产生大量氨氮，人畜粪便和某些工有机物受微生物作用可产生大量氨氮，人畜粪便和某些工业废水中尿素和氨的含量很高，所以水体受生活污水、人业废水中尿素和氨的含量很高，所以水体受生活污水、人畜粪便、以及某些工业废水污染后，氨氮浓度将明显增加。畜粪便、以及某些工业废水污染后，氨氮浓度将明显增加。除此之外水中的亚硝酸盐在氧气不足的条件下亦可受微生除此之外水中的亚硝酸盐在氧气不足的条件下亦可受微生物作用还原成氨，水中尿素也可转变成氨氮。物作用还原成氨，水中尿素也可转变成氨氮。预防水三氮指标测定10三氮指标测定三氮指标测定2.2.亚

10、硝酸盐氮亚硝酸盐氮(NO(NO2 2NN，nitrite nitrogen)nitrite nitrogen)亚硝酸盐氮是含氮有机物受细菌作用分解的中间亚硝酸盐氮是含氮有机物受细菌作用分解的中间产物，在水中不稳定，在氧和微生物的作用下产物，在水中不稳定，在氧和微生物的作用下易被氧化成硝酸盐，在缺氧条件下也可被还原易被氧化成硝酸盐，在缺氧条件下也可被还原为氨。水中为氨。水中N0N02 2NN的来源主要为生活污水中含的来源主要为生活污水中含氮有机物的分解和化肥、酸洗等工业废水，此氮有机物的分解和化肥、酸洗等工业废水，此外农田排水也可引入较高浓度的外农田排水也可引入较高浓度的NONO2 2。未受污未

11、受污染地面水中亚硝酸盐氮一般低于染地面水中亚硝酸盐氮一般低于0.1mg0.1mgL L，某，某些地下水可能会由于地层结构的还原作用出现些地下水可能会由于地层结构的还原作用出现较高浓度的亚硝酸盐较高浓度的亚硝酸盐。预防水三氮指标测定11三氮指标测定三氮指标测定3.3.硝酸盐氮硝酸盐氮(NO(NO3 3NN，nitrate nitrogen)nitrate nitrogen)硝酸盐氮是含氮有机化合物的在水体中硝酸盐氮是含氮有机化合物的在水体中的最终氧化产物。环境水体中硝酸盐的的最终氧化产物。环境水体中硝酸盐的污染来源除硝酸盐类化肥使用和生活污污染来源除硝酸盐类化肥使用和生活污水、生活垃圾、生产含氮

12、废弃物与人畜水、生活垃圾、生产含氮废弃物与人畜粪便等的自然降解过程外，空气中氧化粪便等的自然降解过程外，空气中氧化氮污染物经降水淋溶后形成的硝酸盐也氮污染物经降水淋溶后形成的硝酸盐也是重要的污染来源。是重要的污染来源。地表水中硝酸盐氮地表水中硝酸盐氮含量一般较低，但某些地下水中含量很含量一般较低，但某些地下水中含量很高。高。预防水三氮指标测定12三氮指标测定三氮指标测定（四）三氮物质对人体健康的影响及卫生标准（四）三氮物质对人体健康的影响及卫生标准 1.1.氨氮氨氮 对鱼类等水生生物有毒害作用。我国对鱼类等水生生物有毒害作用。我国渔业水质标准渔业水质标准、地表水环境质量地表水环境质量标准标准规

13、定规定I I 类水中游离氨的浓度不类水中游离氨的浓度不得超过得超过0.02mg0.02mgL,L,类水不得超过类水不得超过0.2mg/L0.2mg/L。对人体健康的影响较小，我国对人体健康的影响较小，我国生活饮生活饮用水卫生规范用水卫生规范(2001)(2001)未规定限量指标，未规定限量指标，世界卫生组织和一些发达国家规定饮用世界卫生组织和一些发达国家规定饮用水中氨氮含量不得超过水中氨氮含量不得超过0.5mg0.5mgL L。预防水三氮指标测定13三氮指标测定三氮指标测定2.2.亚硝酸盐亚硝酸盐可将低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，使之失可将低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，使之失去输送氧的能力

14、。去输送氧的能力。在酸性介质中亚硝酸盐可与二级胺类形成致癌物在酸性介质中亚硝酸盐可与二级胺类形成致癌物亚硝胺。亚硝胺。反应式如下：反应式如下：R1R2NH+HONOR1R2N-NO+H2O（仲胺）（仲胺）（亚硝酸）（亚硝酸）亚硝胺亚硝胺预防水三氮指标测定14三氮指标测定三氮指标测定一般饮水中亚硝酸盐氮含量很低，不会对人体健一般饮水中亚硝酸盐氮含量很低，不会对人体健康产生影响。某些地下水可能会由于地层结构康产生影响。某些地下水可能会由于地层结构的 还 原 作 用 出 现 较 高 浓 度 的 亚 硝 酸 盐。的 还 原 作 用 出 现 较 高 浓 度 的 亚 硝 酸 盐。我国我国生活饮用水卫生规范

15、生活饮用水卫生规范(2001)(2001)未对未对NONO2 2NN作出限量要求。作出限量要求。我国我国地面水环境质量标准地面水环境质量标准规定规定I I类水中亚硝类水中亚硝酸盐氮含量酸盐氮含量0.06mg0.06mgL L，类水类水0.1mg0.1mgL L；类水类水0.15mg0.15mgL L；V V类水类水1.0mg1.0mgL L。预防水三氮指标测定15三氮指标测定三氮指标测定3.3.硝酸盐氮硝酸盐氮对人健康的影响与亚硝酸盐一样，因为进对人健康的影响与亚硝酸盐一样，因为进入体内的硝酸盐也可被还原为亚硝酸盐。入体内的硝酸盐也可被还原为亚硝酸盐。亚硝酸盐与人体血液作用，形成高铁血亚硝酸盐

16、与人体血液作用，形成高铁血红蛋白，从而使血液失去携氧功能，另红蛋白，从而使血液失去携氧功能，另外可与二级胺类形成致癌物亚硝胺。外可与二级胺类形成致癌物亚硝胺。一一般饮水中硝酸盐氮均可检出，般饮水中硝酸盐氮均可检出，我国我国生生活饮用水卫生规范活饮用水卫生规范(2001)(2001)规定其含量规定其含量不得超过不得超过20mg20mgL L。预防水三氮指标测定16三氮指标测定三氮指标测定（五）样品的采集和保存（五）样品的采集和保存1.1.用于氨氮检测的水样需用聚乙烯瓶或玻用于氨氮检测的水样需用聚乙烯瓶或玻璃瓶采集。璃瓶采集。水中氨氮的稳定性差，一般要求采样后立水中氨氮的稳定性差，一般要求采样后立

17、即测定。如不能立即测定，须在每升水即测定。如不能立即测定，须在每升水样加入样加入0.8ml0.8ml浓硫酸浓硫酸(调调pH2)pH2)，于，于44冰冰箱保存，酸化样品应注意防止空气中氨箱保存，酸化样品应注意防止空气中氨的污染。的污染。预防水三氮指标测定17三氮指标测定三氮指标测定2.2.亚硝酸盐氮的亚硝酸盐氮的水样采集水样采集可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，采样后应可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，采样后应尽快测定，以避免细菌将亚硝酸盐还原尽快测定，以避免细菌将亚硝酸盐还原成氨。若不能立即测定，可于每升水样成氨。若不能立即测定，可于每升水样中加入中加入40mg40mg氯化汞抑菌，并置氯化汞抑菌，并置44冰箱

18、冰箱闭光保存，可稳定闭光保存，可稳定1 1 2d2d。预防水三氮指标测定18三氮指标测定三氮指标测定3.3.用于硝酸盐氮测定的水样用于硝酸盐氮测定的水样需用玻璃瓶或聚乙烯瓶采集，采样后应需用玻璃瓶或聚乙烯瓶采集，采样后应尽快测定。如不能及时测定，为了抑止尽快测定。如不能及时测定，为了抑止微生物活动对氮平衡的影响，需于每升微生物活动对氮平衡的影响，需于每升水样中加入水样中加入0.8m10.8m1浓硫酸，并于浓硫酸，并于0 0 44保存，保存，24h24h内完成测定。内完成测定。预防水三氮指标测定19三氮指标测定三氮指标测定（六）测定方法（六）测定方法 1.1.水中氨氮测定方法较多水中氨氮测定方法

19、较多。纳氏试剂光度法纳氏试剂光度法是最经典是最经典的测定方法，该法操作简便、灵敏度较高，适应范围的测定方法，该法操作简便、灵敏度较高，适应范围广，但该法需使用有毒试剂四碘汞钾和强碱，对操作广，但该法需使用有毒试剂四碘汞钾和强碱，对操作人员和环境影响大，现在使用得较多的是人员和环境影响大，现在使用得较多的是酚盐光度法酚盐光度法和水杨酸光度法。和水杨酸光度法。酚盐法也是氨氮测定的经典方法，酚盐法也是氨氮测定的经典方法，国际标准化组织国际标准化组织(InternationaI Stand(InternationaI Standard ard OrganizationOrganization，ISO)

20、ISO)和我国已分别将水杨酸光度法列和我国已分别将水杨酸光度法列为推荐方法和标准方法。为推荐方法和标准方法。此外，水中氨氮测定方法还有此外，水中氨氮测定方法还有氨电极法、离子色谱法、氨电极法、离子色谱法、蒸馏一滴定法和氨氮在线自动检测法等蒸馏一滴定法和氨氮在线自动检测法等。预防水三氮指标测定20三氮指标测定三氮指标测定2.2.水中亚硝酸盐氮的测定方法水中亚硝酸盐氮的测定方法主要有光度法、离子色谱法和示波极谱法等。主要有光度法、离子色谱法和示波极谱法等。而而应用最广泛的是重氮化偶合光度法，该法简便应用最广泛的是重氮化偶合光度法，该法简便快速，灵敏度高，但色度和浊度对测定有干扰快速，灵敏度高，但色

21、度和浊度对测定有干扰。该法是我国水质检验标准方法。该法是我国水质检验标准方法。离子色谱法简便快速，离子色谱法简便快速，可同时测定包括亚硝可同时测定包括亚硝酸根、硝酸根、硫酸根、氯离子和氟离子等多酸根、硝酸根、硫酸根、氯离子和氟离子等多种阴离子，但需要离子色谱仪，分析成本较高。种阴离子，但需要离子色谱仪，分析成本较高。示波极谱法简便快速，灵敏度高，水样色度和示波极谱法简便快速，灵敏度高，水样色度和浊度对测定基本无干扰。浊度对测定基本无干扰。预防水三氮指标测定21三氮指标测定三氮指标测定3.3.水中硝酸盐氮的测定水中硝酸盐氮的测定方法有紫外光度方法有紫外光度法、离子选择性电极法、光度法、离法、离子

22、选择性电极法、光度法、离子色谱法和示波极谱法等。我国卫生子色谱法和示波极谱法等。我国卫生部部生活饮用水卫生规范生活饮用水卫生规范(2001)(2001)规规定的标准检验方法是麝香草酚光度法、定的标准检验方法是麝香草酚光度法、镉柱还原法、紫外光度法和离子色谱镉柱还原法、紫外光度法和离子色谱法。法。预防水三氮指标测定22二、亚硝酸盐氮的测定二、亚硝酸盐氮的测定 见见P P9595 1.1.原理原理 2.2.消除干扰消除干扰 3.3.试剂的配制试剂的配制 4.4.测定亚硝酸盐氮测定亚硝酸盐氮 5.5.测定亚硝酸盐氮的有关计算测定亚硝酸盐氮的有关计算预防水三氮指标测定23N-N-（1-1-萘基）萘基）

23、乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法 (又叫重氮化偶合分光光度法又叫重氮化偶合分光光度法 )分光光度法的方法名称一般用显色剂的名称命名分光光度法的方法名称一般用显色剂的名称命名1.1.原理原理在在pHpH值值1.71.7以下，水中亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺发生重以下，水中亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺发生重氮化反应，再与盐酸氮化反应，再与盐酸N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺乙烯二胺（又叫盐又叫盐酸萘乙二胺）酸萘乙二胺）产生偶合反应，生成紫红色的偶氮染料，产生偶合反应，生成紫红色的偶氮染料，比色定量。比色定量。预防水三氮指标测定24N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法

24、 2.2.消除干扰消除干扰有些金属离子如铁、铅、汞、银等含量较高时，有些金属离子如铁、铅、汞、银等含量较高时，在测定中会产生沉淀，二价铜离子能催化分解重在测定中会产生沉淀，二价铜离子能催化分解重氮盐而产生干扰，必要时可加入适量氮盐而产生干扰，必要时可加入适量EDTAEDTA，使其，使其与上述金属离子形成配合物来消除干扰；若水样与上述金属离子形成配合物来消除干扰；若水样浑浊或色度较大，可加入氢氧化铝悬浮液，利用浑浊或色度较大，可加入氢氧化铝悬浮液，利用混凝沉淀的原理消除干扰。混凝沉淀的原理消除干扰。预防水三氮指标测定25N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法 3.3.

25、试剂试剂（1 1）实验用水均为无亚硝酸盐水。无亚硝酸盐水）实验用水均为无亚硝酸盐水。无亚硝酸盐水 于于纯水中加入少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧纯水中加入少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钠，使呈碱性，置于全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去化钠，使呈碱性，置于全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去50ml50ml初馏液，收集中间初馏液，收集中间70%70%部分。部分。（2 2）0.05mol/L(1/5KMnO0.05mol/L(1/5KMnO4 4)高锰酸钾溶液高锰酸钾溶液 称取高锰酸称取高锰酸钾钾1.6g1.6g，溶于，溶于1.2L1.2L无亚硝酸盐水中，煮沸无亚硝酸盐水中，煮沸30min30min，

26、使体，使体积减少至积减少至1L1L左右，放置过夜，用左右，放置过夜，用G3G3型玻砂漏斗过滤，型玻砂漏斗过滤，滤液贮于棕色瓶中保存。滤液贮于棕色瓶中保存。（3 3）0.0500mol/L0.0500mol/L（1/2Na1/2Na2 2C C2 2O O4 4）草酸钠标准溶液）草酸钠标准溶液 称称取经取经105105干燥干燥2h2h的草酸钠的草酸钠3.3500g3.3500g，溶于无亚硝酸盐，溶于无亚硝酸盐水中，并定容于水中，并定容于1L1L容量瓶中。容量瓶中。预防水三氮指标测定26N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法（4 4）亚硝酸盐氮标准储备液亚硝酸盐氮标准储

27、备液 准确称取亚准确称取亚硝酸钠硝酸钠(N(Na aNONO2 2)1.2321g)1.2321g，溶于无亚硝酸盐水，溶于无亚硝酸盐水中，并稀释至中，并稀释至1L1L，加入氯仿，加入氯仿1ml1ml，其亚硝酸，其亚硝酸盐氮的浓度为（盐氮的浓度为（NONO2 2-N-N，），）0.25 mg/ml 0.25 mg/ml。（5 5）亚硝酸盐氮标准应用溶液）亚硝酸盐氮标准应用溶液 临用前，将临用前，将上述贮备溶液用无亚硝酸盐水稀释成上述贮备溶液用无亚硝酸盐水稀释成1ml1ml含含0.1gNO0.1gNO2 2-N-N的标准溶液（先稀释成的标准溶液（先稀释成1ml1ml含含50.0gNO50.0gNO

28、2 2-N-N的中间溶液）。的中间溶液）。（6 6）对氨基苯磺酰胺溶液）对氨基苯磺酰胺溶液 称取对氨基苯磺称取对氨基苯磺酰胺酰胺5g5g，溶于，溶于350ml 1+6350ml 1+6盐酸溶液中，用无盐酸溶液中，用无亚硝酸盐水稀释至亚硝酸盐水稀释至500ml500ml，此溶液可稳定数，此溶液可稳定数月。月。预防水三氮指标测定27N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法（7 7）盐酸）盐酸N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺溶液乙烯二胺溶液 称取称取0.5g0.5g盐盐酸酸N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺，溶于乙烯二胺，溶于500 ml500 ml无亚硝酸无亚硝

29、酸盐水中，贮于棕色瓶内，于冰箱内保存，可稳定数盐水中，贮于棕色瓶内，于冰箱内保存，可稳定数周。如变为深棕色，则应重配，本试剂有毒，避免周。如变为深棕色，则应重配，本试剂有毒，避免与皮肤接触或吸入体内。与皮肤接触或吸入体内。（8 8）氢氧化铝悬浮液）氢氧化铝悬浮液 称取化学纯硫酸铝钾称取化学纯硫酸铝钾KAl(SOKAl(SO4 4)2 212H12H2 2O125g,O125g,或硫酸铝铵或硫酸铝铵NHNH4 4Al(SOAl(SO4 4)2 212H12H2 2O O 125g,125g,溶于溶于1L1L无亚硝酸盐水中。加热至无亚硝酸盐水中。加热至6060，缓缓，缓缓加入浓氨水加入浓氨水55m

30、l55ml，使成氢氧化铝沉淀。充分搅拌后，使成氢氧化铝沉淀。充分搅拌后静置，弃去上清液，反复用无亚硝酸盐水洗涤沉淀静置，弃去上清液，反复用无亚硝酸盐水洗涤沉淀至倾出液无至倾出液无ClCl（用硝酸银检查）为止，最后加入无（用硝酸银检查）为止，最后加入无亚硝酸盐水亚硝酸盐水30ml,30ml,使成悬浮液。使用前振荡均匀。使成悬浮液。使用前振荡均匀。（9 9）磷酸）磷酸预防水三氮指标测定28N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法 4.4.测定亚硝酸盐氮测定亚硝酸盐氮（1 1）取水样（或经处理后的水样）取水样（或经处理后的水样）50.0ml50.0ml，置于，置于50ml5

31、0ml比色管中。比色管中。（2 2）另取）另取50ml50ml比色管比色管5-75-7支，分别加入亚硝酸盐氮标支，分别加入亚硝酸盐氮标准应用溶液准应用溶液0ml0ml、0.50ml0.50ml、1.00ml1.00ml、2.50ml2.50ml、5.00ml5.00ml、7.50ml7.50ml和和12.50ml12.50ml，加无亚硝酸盐水至，加无亚硝酸盐水至50ml50ml标线。标线。（3 3）向水样及标准管中分别加入对氨基苯磺酰胺溶液）向水样及标准管中分别加入对氨基苯磺酰胺溶液1.0ml1.0ml，摇匀后，放置，摇匀后，放置2min8min2min8min。加入盐酸。加入盐酸N-N-（1

32、-1-萘基）萘基）乙烯二胺溶液乙烯二胺溶液1.0ml1.0ml，立即混匀，静置，立即混匀，静置10min10min。预防水三氮指标测定29N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法 （4 4）显色后，在）显色后，在2h2h内于波长内于波长540nm540nm处，用处，用1cm1cm比色皿，比色皿，以无亚硝酸盐水为参比，测量吸光度。若亚硝酸盐以无亚硝酸盐水为参比，测量吸光度。若亚硝酸盐氮浓度低于氮浓度低于4g/L4g/L时，用时，用3 cm3 cm比色皿。比色皿。预防水三氮指标测定（5）若水样经处理，则以无亚硝酸盐水代替水样，）若水样经处理，则以无亚硝酸盐水代替水样，作全

33、程序空白测定。作全程序空白测定。（6）绘制亚硝酸盐氮含量（）绘制亚硝酸盐氮含量（g）对吸光度）对吸光度(A)的校准的校准曲线。曲线。将水样的吸光度减去空白的吸光度，再从校准曲线上将水样的吸光度减去空白的吸光度，再从校准曲线上查出亚硝酸盐氮含量查出亚硝酸盐氮含量(g)。预防水三氮指标测定31N-N-（1-1-萘基）萘基）乙烯二胺分光光度法乙烯二胺分光光度法 用表格概括如下表：见后用表格概括如下表：见后预防水三氮指标测定32标准系列空白标准系列空白钟钟10分分静置静置混匀，混匀，8min 2min静置静置混匀混匀1.001.001.001.001.001.00 1.001.001.00盐酸萘乙二胺

34、盐酸萘乙二胺(ml)1.001.001.001.001.001.001.001.001.00对氨基苯磺酰对氨基苯磺酰胺溶液胺溶液(ml)？1.000.750.500.250.100.050N氮量氮量(g)50 ml容容 至至水水 定定氮氮酸盐酸盐亚硝亚硝用无用无(ml)空白液空白液50 ml样品液样品液50 ml10.007.505.002.501.000.500标准应用液标准应用液1ml=0.1g空白液空白液样品液样品液6543210编号编号预防水三氮指标测定33比色定量比色定量 在波长在波长540nm540nm处，用处，用1cm1cm比色皿，以溶剂比色皿，以溶剂调零，测量吸光度，记录吸光度

35、值。调零，测量吸光度，记录吸光度值。预防水三氮指标测定34 注意：注意：1.样品的测定和标准系列的测定应同时样品的测定和标准系列的测定应同时进行，以尽量保证实验条件的一致性。进行，以尽量保证实验条件的一致性。2.盐酸萘乙二胺有毒，勿将比色液弄在盐酸萘乙二胺有毒，勿将比色液弄在手上。手上。预防水三氮指标测定35方法方法灵敏度和检测上限灵敏度和检测上限：本法最低检出量为本法最低检出量为0.05gNO2-N，若取，若取50ml水样测定，则最低检出浓度为水样测定，则最低检出浓度为0.001mg/L，测定上限为，测定上限为0.20mg/L。预防水三氮指标测定365.5.测定亚硝酸盐氮的有关计算测定亚硝酸

36、盐氮的有关计算（1 1）配制标准溶液的计算）配制标准溶液的计算（2 2）水样中被测物质含量的计算）水样中被测物质含量的计算 1 1）绘制标准曲线的方法绘制标准曲线的方法 2 2）用最小二乘法公式求回归方程的方法用最小二乘法公式求回归方程的方法 用公式计算的方法用公式计算的方法 用计算器计算的方法用计算器计算的方法（3 3）是水样亚硝酸盐氮）是水样亚硝酸盐氮(N,mg/L)(N,mg/L)的计算的计算 预防水三氮指标测定375.5.测定亚硝酸盐氮的有关计算测定亚硝酸盐氮的有关计算（1 1）配制标准溶液的计算）配制标准溶液的计算已知重量和已知重量和配制的配制的体积体积，求浓度是多少？求浓度是多少？

37、这里有一个考点，这里有一个考点，即对亚硝酸盐氮的概念的理解。即对亚硝酸盐氮的概念的理解。亚硝酸钠亚硝酸钠(N(Na aNONO2 2)的分子量为的分子量为6969，其中，其中N N的量为的量为1414。不是。不是NONO2 2的量，也不是的量，也不是N Na aNONO2 2的量。的量。例如：亚硝酸盐氮标准贮备溶液的配制。例如：亚硝酸盐氮标准贮备溶液的配制。称取亚硝酸钠称取亚硝酸钠(N(Na aNONO2 2)1.2321g)1.2321g，溶于无亚硝酸盐水中，并，溶于无亚硝酸盐水中，并稀释至稀释至1L1L，加入氯仿，加入氯仿1ml1ml，其亚硝酸盐氮的浓度，其亚硝酸盐氮的浓度（N N，mg/

38、ml mg/ml）为多少？）为多少？预防水三氮指标测定38亚硝酸钠中的亚硝酸钠中的“N”的量的量设设1.2321g亚硝酸钠中的亚硝酸钠中的N的量为的量为X，则则 求亚硝酸盐氮的浓度（求亚硝酸盐氮的浓度（mg/ml）为多少？）为多少？0.25g 1000ml=0.25mg/mlgx25.02321.16914预防水三氮指标测定395.5.测定亚硝酸盐氮的有关计算测定亚硝酸盐氮的有关计算已知浓度和体积，求亚硝酸钠的准确称量的计算已知浓度和体积，求亚硝酸钠的准确称量的计算 这里有两个考点：这里有两个考点：亚硝酸盐氮的概念。亚硝酸盐氮的概念。准确称量的概念。准确称量的概念。例如：欲配例如：欲配 0.5

39、0mg/ml0.50mg/ml的亚硝酸盐氮的标准溶液的亚硝酸盐氮的标准溶液500ml500ml，应准确称取多少克亚硝酸钠，应准确称取多少克亚硝酸钠(N(Na aNONO2 2)？计算方法如下：计算方法如下：0.50.5500=250mg =0.25g500=250mg =0.25g（NONO 2 2-N-N）。）。ggx.2321.125.01469预防水三氮指标测定40学而时习之学而时习之 1、欲配、欲配 1.0mg/ml1.0mg/ml的亚硝酸盐氮的标准溶液的亚硝酸盐氮的标准溶液500.00ml，应准确称取多少克亚硝酸钠，应准确称取多少克亚硝酸钠(NaNO2)？Na=23，N=14 4，O

40、=16 即应准确称取即应准确称取0.2464克亚硝酸钠。计算数据一定要克亚硝酸钠。计算数据一定要书写至小数点后第四位。书写至小数点后第四位。ggmlmgx2464.05.0146950011469预防水三氮指标测定41学而时习之学而时习之2、称取亚硝酸钠称取亚硝酸钠(NaNO2)1.5821，溶于无亚硝酸盐，溶于无亚硝酸盐水中，并稀释至水中，并稀释至1L，加入氯仿，加入氯仿1ml，此溶液，此溶液1ml含含亚硝酸盐氮为多少亚硝酸盐氮为多少mg？计算方法如下：计算方法如下：设设1.5821g亚硝酸钠中的亚硝酸钠中的N的量为的量为X，则，则 0.32g 1000ml=0.32mg/mlgx32.05

41、821.16914预防水三氮指标测定42（2）水样中被测物质含量的计算）水样中被测物质含量的计算 1）标准曲线）标准曲线法法用查图图算的方法计算水样中被测物质含量用查图图算的方法计算水样中被测物质含量及其注意事项及其注意事项 预防水三氮指标测定43亚硝酸盐氮含量（亚硝酸盐氮含量（g）吸吸光光度度(A)正确的绘制方法正确的绘制方法预防水三氮指标测定44亚硝酸盐氮含量（亚硝酸盐氮含量（g）吸吸光光度度(A)预防水三氮指标测定45亚硝酸盐氮含量（亚硝酸盐氮含量（g）吸吸光光度度(A)预防水三氮指标测定462 2）最小二乘法最小二乘法 计算计算回归方程的方法回归方程的方法 用公式计算的方法用公式计算的

42、方法 即用最小二乘法公式计算出直线回归方程即用最小二乘法公式计算出直线回归方程 （=a+bx=a+bx）中的中的a a值（直线在值（直线在Y Y轴的截距）和轴的截距）和b b值（直线的斜率或值（直线的斜率或称回归系数）。称回归系数）。a a值、值、b b值计算出来了，这条直线也就确定了。但要注值计算出来了，这条直线也就确定了。但要注意公式意公式=a+bx=a+bx中中的概念，的概念，为响应值的估计值，表为响应值的估计值，表示从回归方程式计算出来的值，以区别于实测值示从回归方程式计算出来的值，以区别于实测值Y Y。预防水三氮指标测定47例如：用新铜试剂法测定水中铜的含量，配一标准系列测得吸光例如

43、：用新铜试剂法测定水中铜的含量，配一标准系列测得吸光度如下：试用计算法拟合标准曲线。度如下：试用计算法拟合标准曲线。表表1 1：新铜试剂法测定水中铜含量和吸光度原始数据：新铜试剂法测定水中铜含量和吸光度原始数据 0.4370.4370.2920.2920.2340.2340.1620.1620.0860.0860.0420.0420 0吸光度吸光度（A A）0.600.600.400.400.300.300.200.200.100.100.040.040.000.00铜含量铜含量x x（gg）7654321编号编号预防水三氮指标测定48 表表2 2：新铜试剂法测定水中铜的含量相关系数及回归方程

44、计算表：新铜试剂法测定水中铜的含量相关系数及回归方程计算表0.491880.26220.360.190970.4370.670.66160.3676561.2531.640.11680.160.0865260.2920.4600.001680.00860.03240.070200.00160.010.040.0900.001760.00740.026240.054760.000.0420.0860.1620.2340.000.040.100.200.3012345xyxy x x2 2 y y2 2 y y x x 编号编号 解解:列表计算列表计算xx、yy、xx2 2、yy2 2、xyxy预

45、防水三氮指标测定49 计算计算a a值、值、b b值值nxxnyxb222)()(-x 175.07)64.1(6616.07)253.1)(64.1(-1.64 2nxbnyxbya011.0764.1175.07253.1预防水三氮指标测定50即：新铜试剂法测定水中铜的含量，铜含量的即：新铜试剂法测定水中铜的含量，铜含量的标准系列及对应吸光度的直线回归方程为：标准系列及对应吸光度的直线回归方程为：=0.011+0.715 X=0.011+0.715 X预防水三氮指标测定51计算标准曲线的相关系数计算标准曲线的相关系数计算相关系数计算相关系数(r)公式为：公式为：将表将表2 2中的中的x=1

46、.64x=1.64，y=1.253 y=1.253，yy2 2=0.367656=0.367656，xx2 2=0.6616=0.6616，xy=0.49188 xy=0.49188等数据带入公式中即可算出等数据带入公式中即可算出r值。值。9990932.0)7)253.1(36639.0()7)64.1(6616.0(7253.164.149188.022)y)(y()()(2222nnxxnyxxyr预防水三氮指标测定52用回归方程计算检验结果用回归方程计算检验结果测定样品吸光度（测定样品吸光度（）后，可将）后，可将值看作值看作代入代入公式中公式中计算出含量计算出含量值值 X X，=0.0

47、11+0.715X=0.011+0.715X这叫公式计算法。这叫公式计算法。也可在测定范围内任意设也可在测定范围内任意设2 2点，点，如如当当X=0.100 X=0.100 则则=0.083=0.083当当X=0.600 X=0.600 则则=0.044=0.044选择直角坐标纸，以含量选择直角坐标纸，以含量x x为横坐标，以响应值为横坐标，以响应值为纵为纵坐标，将这两点描在直角坐标纸上，并连成一条直线，坐标，将这两点描在直角坐标纸上，并连成一条直线，即为该测定的标准曲线。在该标准曲线上，样品测定即为该测定的标准曲线。在该标准曲线上，样品测定的吸光度值（的吸光度值（）对应的）对应的X X值，即

48、为样品的含量值。值，即为样品的含量值。这叫图算法这叫图算法预防水三氮指标测定53 用计算器计算的方法用计算器计算的方法预防水三氮指标测定54（3）水样亚硝酸盐氮）水样亚硝酸盐氮(N,mg/L)的计算的计算亚硝酸盐氮亚硝酸盐氮(N,mg/L)=m/V式中：式中：m为从校准曲线上查出的（或回归方程计算出的）为从校准曲线上查出的（或回归方程计算出的）亚硝酸盐氮含量亚硝酸盐氮含量(g)，V为水样体积（为水样体积（ml）预防水三氮指标测定55【说明】【说明】1、精密度和准确度：五个实验室分析含精密度和准确度：五个实验室分析含0.083mg/L0.18mg/L亚硝酸盐氮的加标水样，单亚硝酸盐氮的加标水样，

49、单个实验室的相对标准偏差不超过个实验室的相对标准偏差不超过2.8%；加标回收；加标回收率为率为96%102%.2、由于重氮化反应的灵敏度很高，测定中应注意、由于重氮化反应的灵敏度很高，测定中应注意避免外来避免外来NO2的污染，如煤气的火焰中可放出相的污染，如煤气的火焰中可放出相当多的氮氧化物，其中的当多的氮氧化物，其中的NO2溶于水成为亚硝酸。溶于水成为亚硝酸。因此，避免在有煤气燃烧的室内测定。因此，避免在有煤气燃烧的室内测定。3、实验要求：相关系数、实验要求：相关系数 r 0.999，b值在值在0.153左左右，右，a值在值在 0.004左右左右预防水三氮指标测定56重点内容：重点内容：1、卫生学意义、卫生学意义2、方法原理、方法原理3、试剂的作用、试剂的作用4、配制标准溶液的计算、配制标准溶液的计算5、用计算器拟合标准曲线计算检验结果的方法、用计算器拟合标准曲线计算检验结果的方法预防水三氮指标测定