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1、课题1 微生物的实验室培养(建议用时：30分钟)考点基本目标发展目标1.微生物培养基的种类及功能1,2,311,12,13，14,152.无菌技术4,5,6,73.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基84.纯化大肠杆菌的两种接种方法的比较9,10基本目标1不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物的营养物质的描述中，不正确的是()A氮源物质为该微生物提供必要的氮元素B碳源物质也是该微生物的能源物质C水是该微生物的营养要素之一D无机盐是该微生物不可缺少的营养物质B解析对于无机碳源CO2来说，只能作为碳源物质而不能作为能源物质。2自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要
2、差别是()A碳源B氮源C无机盐D生长因子A解析自养微生物能够利用二氧化碳和水合成有机物，不利用现成的含碳有机物，而异养微生物只能利用现成的含碳有机物，所以它们的培养基的主要差别是碳源不同。3微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是()A细菌的大小、形状、颜色B菌落的大小、形状、颜色C有无鞭毛D培养基的不同B解析微生物的鉴别与分离一般要用固体培养基，由于不同微生物在固体培养基上长出菌落的形状、颜色等各不相同，所以可以作为鉴别的标准。而一个细菌细胞很小，肉眼无法看到其颜色、形状等。4在微生物的实验室培养中，下列各项操作中不需要在无菌条件下进行的是()A配制培养基B倒平板C接种
3、D培养A解析配制培养基时不需要无菌操作，因为配制后的培养基需要进行高压蒸汽灭菌。5以下部位不含有微生物的是()A洗干净的脸上B洗完澡后的皮肤C刷完牙后的口腔D灼烧之后的接种环D解析用清水洗脸、洗澡、刷牙只是起清洁作用，达不到灭菌效果，只有灼烧过的接种环才是真正无菌的。6消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理()皮肤饮用水牛奶注射器培养皿接种环培养基果汁酱油手术刀ABCD以上全部A解析消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体，如牛奶、果汁、酱
4、油，这样可以使其中的营养成分不被破坏；另外对要求不是很严格的，如皮肤、饮用水，也用消毒的方法处理。而对于注射器、培养皿、接种环、培养基、手术刀等，必须进行灭菌处理。7金黄色葡萄球菌有很强的致病性，还可能引起食物中毒。下述实验结束后的做法错误的是()A对接种环进行灼烧处理B带菌培养基须经加热后才能倒掉C带菌培养基须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉D接种后双手须经肥皂洗净，再用70%的酒精棉球擦拭B解析加热不一定能完全杀灭金黄色葡萄球菌的孢子和芽孢，所以带菌培养基需要灭菌，不能加热后倒掉。8牛肉膏蛋白胨培养基中需加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法，不正确的是()A不被所培养的微生物分解利用
5、，对所培养的微生物无毒害作用B在微生物生长温度范围内保持固体状态C琼脂凝固点低，利于微生物的生长D琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强C解析在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，可制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。固体培养基中可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。琼脂作为一种理想的凝固剂，是由其性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用；只起固化作用，对微生物的生长不会产生作用；在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强；琼脂在98 以上可溶解于水，在45 以下凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。9
6、在微生物的实验室培养过程中，下列关于平板划线操作的叙述，正确的是()A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D最后应将平板倒置，放入培养箱中培养D解析使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中仍要灭菌；打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后含菌种的试管需要再次通过火焰灭菌后再塞好棉塞；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线后灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线，重复上述过程，完成三、四、五区域内的划线，注意不要将第五区的划线与第一区的相连；
7、为防止皿盖上的水珠落入培养皿造成污染，应将平板倒置，放入恒温培养箱中培养。10平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述中错误的是()A平板划线法要求连续多划几次，且除了第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的终点B除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线不用灭菌即可划线C如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数D充分稀释和连续划线的目的都是为了使形成的菌落是由单个细菌繁殖而成B解析平板划线法连续划线的目的是降低细菌的浓度，所以除了第一次划线外，以后每次划线的起点都是上一次划线的终点，A项正确；每一次划线后灼烧的目的是杀死接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种
8、都来自上次划线末端，B项错误；稀释倍数要根据菌液的浓度而定，如果菌液的浓度太大，则需要更高的稀释倍数，否则就可以适当降低稀释的倍数，C项正确；稀释涂布平板法中的充分稀释及平板划线法中的连续划线，目的都是为了保证菌落是由单个细菌繁殖而成，D项正确。发展目标11下列有关微生物实验室培养的叙述，不正确的是()A在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊B灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术C样品中活菌数量统计时，接种方法应采用划线法D用平板培养基培养微生物时，应将平板倒过来放置C解析琼脂熔化时容易糊底，需要用玻璃棒不断搅拌，以免发生焦糊；灼烧、高压蒸汽灭菌属于灭菌，紫外线照射是常用
9、的消毒方法，都属于无菌技术；统计样品中活菌数量时，接种方法应采用稀释涂布平板法；用平板培养基培养微生物时，应将平板倒过来放置，防止冷凝水污染培养基。12为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()A对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4 保藏的方法D解析对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后灭菌，将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20 的冷冻箱中保存。13为探究大叶木姜子多糖的抑菌效
10、果，研究人员将下列4种菌分别用无菌水稀释成菌悬液，于固体培养基上制成含菌平皿，在平皿上放置经不同浓度大叶木姜子多糖溶液浸泡23小时的滤纸片，培养一段时间后，测定各供试菌的抑菌圈直径，结果如下表。下列相关叙述错误的是()A金黄色葡萄球菌与另外三种菌的主要区别是没有核膜B制备含菌平皿可用稀释涂布平板法或平板划线法C每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值D大叶木姜子多糖对黑曲霉抑制效果最差B解析金黄色葡萄球菌属于细菌，没有核膜包被的细胞核，其余三种微生物都是真菌，A项正确；根据题干，接种使用的是菌悬液，探究的是大叶木姜子多糖的抑菌效果，应该使用稀释涂布平板法接种，B项错误；为避免实验误差，每个
11、浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值，C项正确；黑曲霉在含有不同浓度的大叶木姜子多糖的滤纸上产生的抑菌圈的直径最小，抑制效果最差，D项正确。14为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制的培养基的配方如下：蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水10 g5 g5 g2 g0.4 g0.065 g1 000 ml将培养基pH调至7.2(1)该培养基所含碳源有_，其功能是_。(2)该培养基所含氮源有_，其功能是_。(3)该培养基除含碳源、氮源外，还含有微生物需要的营养物质是_。(4)该细菌在同化作用上的代谢类型是_型。(5)该培养基可用来鉴别哪种细菌()A霉菌B酵母菌C大肠杆菌D乳酸菌解析根据培养
12、基的配方，该培养基用于培养异养微生物，含C、H、O、N的蛋白胨既是碳源，又是氮源。培养微生物需碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等营养物质。各种微生物繁殖的最适pH是不同的，大多数细菌适宜在中性至微碱性(pH为7.07.5)环境中生长，而酵母菌和霉菌则适宜在偏酸性(pH为4.56.0)环境中生长，伊红美蓝培养基可用来鉴定是否含有大肠杆菌。答案 (1)乳糖、蔗糖、蛋白胨主要用于构成微生物的细胞物质和提供能源物质(2)蛋白胨主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物(3)水、无机盐(或K2HPO4)(4)异养(5)C15据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关
13、注。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。某兴趣小组欲检测某果汁类食品中是否含有葡萄球菌，进行了如下实验。回答下列问题：(1)配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节pH，分装到锥形瓶后进行_，在无菌状态下加入卵黄液摇匀后立即倒平板。培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供_。葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于_培养基。(2)接种：取待检测果汁2.5 mL加入22.5 mL灭菌生理盐水，制成接种样液。实验组
14、：将接种样液用平板划线法接种在含卵黄的固体培养基上。对照组：将_用平板划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为_对照。(3)培养：将上述接种后的培养皿同时放在36 的恒温箱中培养48 h。(4)观察：培养基表面_。(5)结论：若培养基上_，则该果汁类食品中含有葡萄球菌。若培养基上_，则该果汁类食品中不含有葡萄球菌。解析(1)培养基的制备流程：计算称量溶化灭菌倒平板。培养基中的牛肉膏可以为葡萄球菌的生长和繁殖提供氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨可以为葡萄球菌的生长和繁殖提供碳源、氮源和维生素。加入高浓度NaCl溶液的培养基可以抑制大多数微生物的生长繁殖，因此该培养基属于选择培养基。(2)比较实验组和对照组可知，实验的自变量为是否接种样液。对照组接种无菌生理盐水，或不接种，为空白对照。(4)根据题干信息“葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环”可知，观察是否出现周围有乳浊环的菌落可以判断果汁中是否含有葡萄球菌。(5)果汁中存在葡萄球菌时，培养基上会出现周围有乳浊环的菌落；果汁中不存在葡萄球菌时，培养基上不会出现周围有乳浊环的菌落。答案 (1)灭菌(或高压蒸汽灭菌)碳源、氮源、磷酸盐和维生素选择(2)无菌生理盐水空白(4)是否出现周围有乳浊环的菌落(5)出现周围有乳浊环的菌落不出现周围有乳浊环的菌落
2019-2020学年高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养课后限时作业含解析新人教版选修1
