生理学课程实验课件

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1、生理学实验（概 述）v生理实验概况生理实验概况vMedlab生物信号采集处理系统生物信号采集处理系统 及常用手术器械及常用手术器械v生理学实验是在人工控制的条件下，对某些实验对象的生理活动及其影响因素进行观察、记录，然后从实验结果的分析、推理中解释生理现象发生、发展的原因和机制。生理学实验是获得现代生理学知识的重要手段。v生理学实验四个基本条件：实验动物、设备、信息和试剂，即实验的四要素。生理学实验的类型生理学实验的类型 v人体实验：人体实验：v动物实验：动物实验：1.急性实验：在短期内能完成的实验，在动物麻急性实验：在短期内能完成的实验，在动物麻醉情况下进行，实验后将动物处死。醉情况下进行，

2、实验后将动物处死。离体实验离体实验 在体实验在体实验 2.慢性实验：在无菌麻醉条件下对健康动物施行慢性实验：在无菌麻醉条件下对健康动物施行一定的外科手术，暴露要研究的器官，或破坏、一定的外科手术，暴露要研究的器官，或破坏、摘除某一部分，然后缝合，使动物从麻醉和手术摘除某一部分，然后缝合，使动物从麻醉和手术中恢复，在动物接近正常生活状态的情况下进行中恢复，在动物接近正常生活状态的情况下进行实验。实验。v生理学实验常用观察指标生理学实验常用观察指标:1电生理指标来源于对生物电信号的采集 与处理 2普通生理指标指伴随生命活动的一些机 械信号，用传统的方法即可观察 (1)压力信号 (2)张力信号 (3

3、)流量信号（附）机能学科实验概况v实验：实验：在特定的人为条件（教师设定自行创建）下，观察客观事物，从而（验证已知发现未知）的一种方法。v机能学科实验机能学科实验新兴的基础实验课程，内容包括：生理学、病理生理学、药理学三门学科的理论知识和实验技能。v机能学科实验学习安排为二个阶段：（一）与生理理论教学同步：学习动物实验基础理论，观察生物体 各种生命指标并探讨其产生原理，掌握 常规的实验操作技能。（二）与病理生理学、药理学同步：侧重学习病理模型的建立和药物处理前后 生命指标变化和观察。初步接触科研工作 思路、方法等。骨骼肌的单收缩与复合收缩、骨骼肌的单收缩与复合收缩、神经神经-肌接头兴奋的传递肌

4、接头兴奋的传递v实验目的：实验目的：1.初步掌握Medlab的用法 2.观察刺激频率对肌肉收缩形式和收缩力的影响N NM M接头处的兴奋传递接头处的兴奋传递 骨骼肌的收缩形式骨骼肌的收缩形式单收缩不完全强直收缩 完全强直收缩复合收缩v神经肌肉标本（自己制备）v在神经上施加电刺激v准确记录骨骼肌张力借助MedlabMedlab生物信号采集处理系统v硬件：外设置四通道前置放大器、USB接口、刺激器。v软件：主要完成对系统各个部分进行控制、对已经数字化了的信号进行显示、记录、存储、处理、数据共享及打印 输出。v生物信号（电信号、非电信号）多种多样，故需要设置“采样条件”v采样条件设置：1.显示模式

5、2.采样间隔 3.记录通道 记录仪示波器慢波扫描实验二神经干动作电位电生理实验v实验目的1.学习神经干复合动作电位的细胞外记录方法2.理解神经干动作电位的特性、传导速度测量方法v实验原理 神经纤维的兴奋表现为动作电位的产生和传导，神经干在收到有效刺激后可以产生动作电位。神经的兴奋部位对于未兴奋部位来说呈负电位，两者之间存在电位差，因此可以用电极加以引导。神经细胞的动作电位是“全或无”的，而坐骨神经干由许多不同类型的神经纤维组成，所以引导出的神经干动作电位是复合动作电位。v神经干受到有效刺激发生兴奋后，产生的动作电位将以一定的速度沿神经传导。对不同的神经纤维，其传导兴奋的速度也不同，一般来说直径

6、大、有髓的神经纤维比直径小、无髓的神经纤维传导速度快。蛙类的坐骨神经干属于混合型神经，其中直径最粗的有髓神经为A类纤维，正常室温下的传导速度约为3540m/s。测定神经纤维兴奋的传导速度v时，在远离刺激点的不同距离处分别用两组引导电极引导动作电位，测出两引导点之间的距离m和分别引导出的动作电位的时相差s，根据v=m/s即可计算出其传导速度。电刺激引导电极引导电极神经干动作电位传导速度测定采样条件设置采样通道采样通道 处理名称处理名称放大倍数放大倍数放大器设置放大器设置CH1神经干动作电位神经干动作电位1000-2000上限10000下限0.08CH3神经干动作电位神经干动作电位1000-200

7、0上限10000下限0.08CH4刺激标记刺激标记100-200直流显示模式:示波器 刺激方式:主周期刺激(具体见后)采样间隔:20us主周期刺激参数主周期波宽幅度间隔脉冲延时周期数1s0.1ms 0.1-2.0v10ms 120-50ms连续记录对象单个细胞神经干记录方法细胞内细胞外动作电位图象峰电位 双相动作电位性质“全或无”不完全“全或无”不完全“全或无”：神经干动作电位在一定刺激范围内是随着刺激强度的增大而增大的，但超过某个强度后则AP幅度不再随着刺激强度改变而改变。实 验 三v实验内容1.人体运动试验（心音听诊、动脉血压测定）2.期前收缩与代偿间歇v时间安排10：0011：45 人体

8、运动实验吃好饭 期前收缩与代偿间歇v要求：1.实验后统一总结2.第三组值日3.两人打印一分内容（2）的结果，不写实验报告。人体运动试验v实验目的：1.观察运动后即刻人体血压、心率的反应2.掌握间接法测量动脉血压的方法3.初步了解第一心音、第二心音的区别v实验步骤与观察项目：1.两人一组，安静状态下互测运动前血压、心率，并记录。2.将袖带与检压计连接的橡皮管断开，被试者做运动后，即刻测出其血压、心率，并记录。附：运动前运动即刻血压（收缩压/舒张压mmHg)心率（次/分）时 间数据项目动脉血压的测量间接法v间接的方法：以外加的压强间接反映在某种情况下：外压分别等于收缩压、舒张压 （？何种情况）我们

9、必须寻求我们必须寻求 建立某种关系建立某种关系 人们发现：在某些情况下会出现“血管音”v当外压大于收缩压时：血管被压闭，无血流，无血管音v当外压小于舒张压时：学流通畅，无血管音v当外压小于收缩压而大于舒张压时：血管时断时续，出现血管音方法和步骤 常规测量法血压计测量人体动脉血压方法示意图听诊器肱动脉袖带触诊汞柱打气球放气螺丝KPa010203040间接法测量血压注意事项v保持安静v测23次，以两次较为接近的值为准v上臂、血压及0刻度位置v重复测时，应有间隔时间v血压计的开关 正常成人的血压收缩压：90毫米140毫米汞柱。舒张压：60毫米90毫米汞柱。血压随年龄的增大而上升，老年人血压比正常人血

10、压 偏高。临界血压：收缩压140毫米160毫米汞柱或舒张压90 毫米95毫米汞柱。高血压：收缩压大于等于160毫米汞柱或舒张压大于 等于95毫米汞柱。人体心音听诊v目的 学习心音的听取方法，了解心音的特点，识别第一心音和第二心音。v原理 在一个心动周期中，由于瓣膜的关闭及血液的流动所产生的振动形成了心音。心音的音响可传至胸壁，故用听诊器在胸前壁上能听到心音。第一心音标志着心室收缩的开始。第二心音标志心室舒张的开始。v第一心音：音调较低（音频为2540次/s），而历时较长（0.142s），声音较弱，是由房室瓣关闭和心室肌收缩振动所产生的。由于房室瓣的关闭与心室收缩开始几乎同时发生，因此第一心音是

11、心室收缩的标志，其响度和性质变化，常可反映心室肌收缩强、弱和房室瓣膜的机能状态。v第二心音：声调教高（音频为50次/s）而历时较短（0.08s），较清脆，主要是由半月瓣关闭产生振动造成的。由于半月瓣关闭与心室舒张开始几乎同时发生，因此，第二心音是心室舒张的标志，其响度常可反映动脉压的高低。v心音听诊各部位v二尖瓣听诊区：左第五肋间锁骨中线稍内侧（心尖部）v三尖瓣听诊区：胸骨右缘第四肋间或胸骨剑突下v主动脉瓣听诊区：胸骨右缘第二肋间v肺动脉瓣听诊区：胸骨左缘第二肋间。蟾蜍心脏期前收缩和代偿间歇（Premature Systole and Compensatory Pause）v实验目的 通过在心

12、脏活动不同时期给与刺激，以验证心肌在兴奋过程中兴奋周期性变化的特征。观察心肌不应期,期前收缩和代偿间歇,并分析其机制 v实验原理心肌每兴奋一次,其兴奋性就发生一次周期性的变化。心肌兴奋性周期性变化的特点在于其有效不应期特别长,约相当于整个收缩期和舒张早期。因此,在心脏的收缩期和舒张早期内,任何刺激均不能引起心肌兴奋和收缩.但在舒张早期以后,一次较强的阈上刺激就可以在正常节律性兴奋到达心肌以前产生一次提前出现的兴奋和收缩,称之为期前兴奋和期前收缩。同理,期前兴奋也有不应期.因此,下一次正常的窦性节律性兴奋到达时正好落在期前兴奋的有效不应期内,便不能引起心肌兴奋和收缩,这样,期前收缩之后就会出现一

13、个较长的舒张期,称为代偿间歇.v实验步骤1.蛙心标本制备(1)取蟾蜍,破坏脑和脊髓,仰卧位固定于蛙板上.从剑突下将胸部皮肤向上剪开(或剪掉),再剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏.(2)将有连线的蛙心夹在心室舒张期夹住心尖、连线。2.设置采样条件v观察项目 1.描记正常蛙心的搏动曲线,观察曲线的收缩相和舒张相.2.用中等强度的单刺激分别在心室收缩期和舒张早期刺激心室,观察能否引起期前收缩.3.用同等强度的刺激在心室舒张早期之后刺激心室,观察有无期前收缩的出现.刺激如能引起期前收缩,观察其后是否出现代偿间歇.蟾蜍期前收缩、代偿间歇采样条件设置（参考）采样通道采样通道 处理名称处理名称放大倍数放大倍数放

14、大器设置放大器设置CH2张力张力200-500直流CH4刺激标记刺激标记100-200直流显示模式:记录仪 刺激方式:单刺激(幅度：3-6v;波宽2ms)采样间隔:1msv注意事项1.破坏蟾蜍脑和脊髓要完全.2.蛙心夹与张力换能器间的连线应有一定的紧张度.3.注意滴加任氏液,以保持蛙心适宜的环境.实 验 四动脉血压的神经体液调节v实验内容实验内容1.示教2.每组单独完成实验v时间安排时间安排10：00 看示教、完成家兔的麻醉、气管插管午饭 分离神经、血管完成实验v要求要求：1.实验后统一总结2.第四组值日3.每大组打印一份结果，写实验报告。v实验目的实验目的1.学习急性哺乳类动物实验的常规手术

15、。2.观察家兔颈迷走神经、减压神经及去甲肾上腺素、乙酰胆碱等对心血管活动的影响。v实验思路实验思路记录心血管活记录心血管活动的改变动的改变电脑、采样条件电脑、采样条件设置设置(已备好）已备好）夹闭颈总动脉、电刺激夹闭颈总动脉、电刺激神经、静脉注射药物神经、静脉注射药物施加影响因素施加影响因素观察心血管观察心血管 活动活动动脉血压、动脉血压、心率心率麻醉、气管插管麻醉、气管插管动脉插管等动脉插管等1.2.3.v实验方法与步骤实验方法与步骤（操作均需掌握）（操作均需掌握）1.称重、麻醉、固定家兔：用2戊巴比妥钠经耳缘静脉缓慢注射麻醉(2ml/kg体重),然后将家兔仰卧固定于兔手术台上。2.气管插管

16、：3.分离神经、血管：拉开气管两旁的肌肉，暴露并分离出左右两侧的血管神经束（颈动脉鞘），细心辨别出减压神经（最细）、颈交感神经、迷走神经（最粗）和颈总动脉，用玻璃分针分离出左右减压神经、右迷走神经、左右颈总动脉（左侧分离2cm左右以备动脉插管）分别穿上不同颜色的线备用。3动脉插管：在左颈总动脉下穿两条线。一条线结扎其远心端（尽可能靠近头端结扎），另一线在近心端，挽个松结备用，在松结下方用动脉夹将动脉夹闭。然后在动脉紧靠头端结扎处的近心侧用眼科剪作一斜形切口（注意：剪刀稍放平，切勿将动脉剪断）。将动脉插管（已充满肝素）由切口向心脏方向插入血管，将备用线的活结扎紧，余线可结扎固定于插管上的橡皮圈上

17、，以防滑脱。v麻醉方法麻醉方法v1局部麻醉法局部麻醉包括表面麻醉、浸润麻醉和阻断麻醉等。其中，浸润麻醉最为常用。浸润麻醉方法：根据实验操作要求的深度，将1 2的盐酸普鲁卡因按皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的顺序依次分别注入，阻断手术部位的神经冲动传导，使疼痛消失。适用于中型以上的动物。v2全身麻醉法v(1)吸入麻醉法：先将蘸有乙醚的棉球放入玻璃罩内，然后投入待麻醉动物，经过12分钟左右，动物逐渐失去运动能力。使用该法麻醉时间不可太长，麻醉时要密切观察，防止动物缺氧、窒息或麻醉过深而死亡。该法适用于大、小白鼠的短时间麻醉。较大的动物也可用，但需要使用麻醉口罩等。v(2)注射麻醉：经腹腔或静脉注射麻

18、醉，其操作简便，较常采用。腹腔给药麻醉法多用于小鼠、大鼠和豚鼠等动物。静脉给药麻醉法则多用于兔、狗等较大的动物。各种动物的静脉注射部位及方法见本章第四节内容。v动物麻醉的注意事项动物麻醉的注意事项v1准确计算麻醉剂量所有麻醉药使用过量均可引起中毒，故应特别注意麻醉药的使用剂量及用药途径。在严格按照体重计算麻醉剂量的同时，还要考虑动物对药物耐受性的个体差异。v2缓慢注射，并随时观察动物情况注射过程中，注意观察肌肉紧张性、角膜反射、呼吸频率和夹痛反应等指标。当这些反应明显减弱或消失时，应立即停止注射。v3注意保温动物在麻醉期体温下降，要采取保温措施。为随时观察体温的变化，可在动物的肛门插入体温计。

19、在寒冷的冬季做慢性实验时，在注射前应将麻醉剂加热至动物体温水平。v4万一麻醉过量，应积极抢救可根据不同情况，施行人工呼吸、注射呼吸兴奋剂或强心剂等抢救措施。v耳缘静脉注射法耳缘静脉注射主要用于家兔、豚鼠等。注射方法：固定兔耳，找到耳的外侧缘皮下静脉，拔去注射部位的毛，并用手指轻轻弹动该处（或先用一动脉夹在静脉近心端夹闭静脉），使静脉充盈。然后左手持平耳缘部，右手持注射器从血管远端刺入（针头与血管呈近30夹角），沿血管平行方向进针约1cm，回一下血，放松对静脉近心端的压迫，缓慢推入药液。v观察项目观察项目(1)观察正常血压和心搏曲线，识别一级波和二级波，观察有无三级波(2)夹闭颈总动脉提起右颈总

20、动脉的备用线，用动脉夹夹闭颈总动脉510秒，观察血压与心搏的变化。(3)用备用线结扎迷走神经，于结扎处的头端剪断之。然后用刺激电极刺激迷走神经的外周端，观察血压、心搏的变化。(4)持备用线轻轻提起右侧减压神经，将其搭在保护电极（刺激电极）上，刺激减压神经，观察血压、心搏的变化。(5)耳缘静脉注射1/10 000去甲肾上腺素0.30.4ml，观察血压心搏的变化。(6)耳缘静脉注射1/10 0000乙酰胆碱0.30.4ml，观察血压、心搏的变化。v注意事项注意事项1.麻醉时，进针应由耳缘静脉远端开始，推注麻醉药物时要缓慢，并随时观察动物的反应，防止动物死亡。2.手术操作要小心准确，避免损伤神经、血

21、管。分离神经血管时，应尽量保持其解剖关系的正常，最先分离减压神经。3.实验前应检查动脉插管口斜面是否光滑，检查压力换能器、三通开关是否畅通，有无漏水等。4.每进行一个项目后，须待心搏与血压恢复正常后方可进行下一项目。5.实验过程中应随时注意动物的状态（如麻醉深度），动脉插管的位置是否扭转、有无漏血等。心迷走心迷走中中 枢枢心交感心交感中中 枢枢缩血管缩血管中中 枢枢心心 脏脏血血 管管窦弓压力感受器窦弓压力感受器+血血 压压交交感感缩缩血血管管N N心心交交感感N N心心迷迷走走N N心心跳跳V舒舒张张A舒舒张张回回心心血血量量外外周周阻阻力力每每搏搏输输出出量量每每分分输输出出量量血血 压压

22、+孤束核孤束核电刺激减压神经电刺激迷走神经反跳现象 rebound phenomenon v亦称反冲现象。作用终止后生物体所表现的相反反应。特别是在神经系统中，兴奋后继续引起抑制，抑制后继续引起兴奋是常见的。v对脊髓反射进行研究的谢林顿（C.S.Sherrington，1906）发现，在同一肢体发生强烈屈曲反射后，出现交叉伸展反射的强度有明显亢进等现象。许多反跳现象被认为是由复杂的兴奋，抑制两条回路的干涉所引起其他如血压和血糖水平的调节等，与生物体控制机制的活动有关的反跳现象也常可看到。实 验 五v实验内容1.呼吸运动的调节2.输尿管插管练习3.胸膜腔内压测定v时间安排：上午完成内容112：3

23、0开始完成内容2、3v实验要求：1.第一组值日2.一大组打印一份结果，每人写一份实验报告v实验目的：1.学习哺乳类动物的手术操作，掌握气管插管术和神经血管分离术。学习膈肌放电的记录方法。2.观察血液中化学因素(PCO2、PO2和H+）改变对家兔呼吸运动的影响，初步探讨其作用部位，并分析机制。3.观察迷走神经在家兔呼吸运动调节中的作用，初步探讨其机理。4.熟悉输尿管插管的方法。5.观察胸膜腔内负压，明确胸膜腔负压的成因和维持条件。v膈肌是重要的吸气肌，由膈神经支配，膈神经起自颈脊髓35节。正常情况下，脊髓的呼吸运动神经元本身不产生呼吸活动，而是在延髓呼吸中枢产生的节律性冲动控制下发放冲动，经膈神

24、经及肋间神经传递至呼吸肌，从而形成周期性呼吸活动。v电极插入膈肌，所记录到的肌肉电活动称为膈肌放电。膈肌放电与膈神经放电的信号形态基本一致，但信号远比后者强。v 膈神经放电是与吸气动作同步，而有规则的群集型放电。v实验原理 呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。呼吸中枢的活动受内、外环境各种刺激的影响，可直接作用于呼吸中枢或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。其中较重要的有呼吸中枢、牵张反射和各种化学感受器的反射性调节。v实验方法与步骤1、麻醉、固定动物、气管插管 2、呼吸运动的描记：切开胸骨下端剑突部位的皮 肤，沿腹白线剪开约2 cm小口，打开腹腔。暴 露出剑突内侧面附着的膈肌。3、仪器连接

25、：呼吸运动的调节采样条件设置（参考）采样通道采样通道 处理名称处理名称放大倍数放大倍数放大器设置放大器设置CH1通用通用1000-5000上限30000下限80CH4刺激标记刺激标记100-200直流显示模式:连续记录 刺激方式:单刺激采样间隔:100usv实验观察项目(1)描记正常呼吸曲线(2)增加吸入气中CO2的浓度(3)增大无效腔(4)切断一侧迷走神经，再切断另一侧迷走神经 v注意事项 1记录各观察项目的曲线时，改变实验条件之 前都必须有一段平稳的呼吸曲线作为对照。2游离剑突时，切口不宜过大过深，以防形成 气胸。v输尿管插管(1)动物麻醉后仰卧固定于手术台上，在耻骨联合以上腹部备皮。(2

26、)自耻骨联合上缘约0.5cm处沿正中线向上作34cm的皮肤切口，用止血钳提起腹白线两侧的腹壁肌肉，再用手术剪沿腹白线剪开腹壁及腹膜（注意勿伤及腹腔脏器）。(3)将膀胱翻出切口外（勿使小肠外露，以免血压下降），在其底部两侧找到两条透明、光滑的小管，此即输尿管。(4)分离两侧输尿管，在靠近膀胱处穿线将它结扎；再在此结扎前约2厘米的近肾端穿一根线，在管壁剪一斜向肾侧的小切口，插入充满生理盐水的细塑料导尿管并用线扎住固定，此时可看到有尿滴滴出。v胸膜腔穿刺术的操作方法及注意事项 v一、胸膜腔穿刺术：穿刺点应选叩诊实音最明显的部位，一般选肩胛线或腋后线第 7 8 肋间，包裹性积液穿刺前应 B 超定位。穿

27、刺时应在下一肋骨的上缘进针。穿刺过程中应密切观察患者的反应；首次抽液不超过 600ml，以后每次不超过 1000ml；整个操作过程应严格无菌操作。v二、胸膜活体组织检查术：包括经胸壁穿刺活检、经胸腔镜胸膜活检、剖胸胸膜 活检三种。v适应症：不明原因的胸腔积液尤其疑为恶性疾病者，胸膜肿瘤，胸膜肥厚需明确病因者。v禁忌症：严重心肺功能不全，有出血倾向或血小板 50 10 9/L，极度衰弱者，慢性脓胸。实验六离体小肠平滑肌的生理特性v实验目的：观察哺乳动物胃肠平滑肌的一般生理特性。学习哺乳类动物离体器官灌流的一种方法。v实验原理：-哺乳动物消化管平滑肌具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等

28、。但是消化道平滑肌肉有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。-将离体组织器官至于模拟体内环境的溶液中，可以在一定时间内保持其功能。本实验以台氏液作灌流液，在体外观察及记录家兔离体肠段的一般生理特性。v在生理学实验中，常用的生理溶液有生理盐水、任氏液（Rinne）、乐氏液（Locke）及台氏液（Tyrode）。这些生理溶液是为了在进行离体器官或组织实验时，使标本尽可能处于近似在体内的环境中，以保证其正常的功能活动。而用于灌流组织的液体，其电解质成分、晶体渗透压、pH、缓冲能力、温度及营养物质应与组织液相近。不同的动物组织器官对氧和

29、营养物质等内环境成分的需求有一定差异，各种实验的目的也不尽相同，所以，各种生理溶液的成分也有所不同。v标本制备用木锤猛击动物头部，使其猝死。剖开腹腔，在胃幽门与十二指肠交界处及距此2030cm处的肠管上用棉线各做一结扎。先沿肠缘剪去相连的肠系膜。然后在两结扎点的内侧缘截取肠段置于台氏液中轻轻漂洗，除去肠内容物。再将肠段分成23cm长的小段，在小段两端各扎一细线，一线系于标本固定盘上（或“L”形通气管的弯钩上），另一线连于张力换能器。连线必须垂直，且不得与浴槽的管壁、通气管接触，以避免摩擦而增加阻力或影响平滑肌运动。小肠平滑肌一般生理特性采样条件设置（参考）采样通道采样通道 处理名称处理名称放大

30、倍数放大倍数放大器设置放大器设置CH1张力张力100-500直流CH4刺激标记刺激标记100-200直流显示模式:连续记录 刺激方式:单刺激采样间隔:2ms(1)记录对照肠段运动曲线后，加入2滴肾上腺素(1：10 000)，观察并记录曲线变化。（2）记录对照肠段运动曲线后加入12滴乙酰胆碱(1：100 000)，观察并记录曲线变化。（3）记录对照肠段运动曲线后加入3滴阿脱品后立即加入与前面同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察曲线变化。同(2)比较曲线有何不同。（4）加入HCL34滴，观察平滑肌收缩活动的改变。在其基础上再滴34滴NaOH观察肠平滑肌的反应。（5）将药液管中的台氏液全部换成25度的台氏

31、液，观察变化。再更换38度台氏液，观察有何反应。注意事项1.实验过程中，台氏液应保持38，浴槽内液面高度应保持恒定。2.通气管的气泡逸出速度不可太快，以单个气泡陆续出现为宜。否则会影响肠段运动的曲线记录。3.每项实验效果明显后，立即更换新鲜台氏液，一般应冲洗23次，待肠段恢复正常活动后再进行下一项目。实验七实验七 尿生成的影响因素尿生成的影响因素一、目的一、目的1.掌握输尿管插管技术，学习尿量的记掌握输尿管插管技术，学习尿量的记录和测量方法；录和测量方法；2.观察神经体液因素对尿生成的影响观察神经体液因素对尿生成的影响二、原理二、原理 尿生成的过程包括：肾小球的滤过、肾小管尿生成的过程包括：肾

32、小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌。凡是影响尿生成过和集合管的重吸收和分泌。凡是影响尿生成过程的因素均可引起尿量的改变。程的因素均可引起尿量的改变。尿生成的调节包括肾内自身调节、神经调节、尿生成的调节包括肾内自身调节、神经调节、体液调节。本实验分别对实验动物施加不同因体液调节。本实验分别对实验动物施加不同因素，观察尿量及其成分的变化。素，观察尿量及其成分的变化。三、步骤三、步骤（一）麻醉、固定（一）麻醉、固定（2戊巴比妥钠戊巴比妥钠2ml/kg）（二）颈部手术（二）颈部手术1做颈部切口，做颈部切口，逐层分离逐层分离皮肤、皮下组织、肌肉皮肤、皮下组织、肌肉（钝性分离钝性分离），暴露气管。）

33、，暴露气管。2气管插管。气管插管。3分离右侧迷走神经，穿线备用。分离右侧迷走神经，穿线备用。4分离左侧颈总动脉，尽量向远心端分离（分离左侧颈总动脉，尽量向远心端分离（56cm），），穿两条线备用。穿两条线备用。（三）输尿管插管（三）输尿管插管1.手术手术 在在耻骨联合上缘耻骨联合上缘作作46cm正中切口，用湿生理正中切口，用湿生理盐水的纱布衬垫后，将膀胱翻至体外（盐水的纱布衬垫后，将膀胱翻至体外（勿使肠断外勿使肠断外露，以免血压下降露，以免血压下降）。在膀胱底部找出两侧输尿管，）。在膀胱底部找出两侧输尿管，细心分离（细心分离（莫损伤伴行血管莫损伤伴行血管），各穿两条线备用，），各穿两条线备用，

34、分别将输尿管近膀胱端结扎，在结扎线的远离膀胱分别将输尿管近膀胱端结扎，在结扎线的远离膀胱端剪开一个斜口（可先用玻璃分针探一下），把端剪开一个斜口（可先用玻璃分针探一下），把预预先充满生理盐水先充满生理盐水的细塑料管向肾脏方向插入输尿管的细塑料管向肾脏方向插入输尿管（1cm左右），用线结扎固定。左右），用线结扎固定。手术完毕后用温生理盐水纱布将切口盖住。手术完毕后用温生理盐水纱布将切口盖住。2.连接换能器和连接换能器和Medlab系统系统 确定输尿管无扭曲并有尿液流出后，根据尿确定输尿管无扭曲并有尿液流出后，根据尿量多少将一侧或两侧塑料管连至受滴器，受滴器量多少将一侧或两侧塑料管连至受滴器，受滴

35、器连接至连接至Medlab系统，第二通道可见记录的尿滴系统，第二通道可见记录的尿滴数。数。运行运行Medlab系统，使用设置好的配置：文件系统，使用设置好的配置：文件 打开配置打开配置 生理尿生成。三个通道分别记录生理尿生成。三个通道分别记录血压、尿滴和刺激标记，检查记录通道与放大器血压、尿滴和刺激标记，检查记录通道与放大器是否匹配。不匹配时改放大器不改通道。是否匹配。不匹配时改放大器不改通道。（四）颈动脉插管（四）颈动脉插管1.准备三通管准备三通管 通过三通开关向动脉插管内灌注肝素溶液，关闭通过三通开关向动脉插管内灌注肝素溶液，关闭三通管。三通管。2.颈动脉插管颈动脉插管 一线结扎动脉的一线

36、结扎动脉的远心端远心端，另一线在，另一线在近心端近心端先打先打一个松结，一个松结，松结下方用动脉夹将动脉夹闭松结下方用动脉夹将动脉夹闭。动脉夹。动脉夹与结扎线之间的动脉长度在与结扎线之间的动脉长度在23cm左右。在结扎左右。在结扎线的下方尽可能靠近结扎处用眼科剪刀剪一个斜口，线的下方尽可能靠近结扎处用眼科剪刀剪一个斜口，将动脉插管向心脏方向插入血管，妥善固定。插管将动脉插管向心脏方向插入血管，妥善固定。插管应始终与动脉方向一致，防止血管壁被插管尖端刺应始终与动脉方向一致，防止血管壁被插管尖端刺破。破。3.连接换能器连接换能器 将换能器用木夹固定在双凹夹上，注意双将换能器用木夹固定在双凹夹上，注

37、意双凹夹高度应与心脏等高。三通管与换能器凹夹高度应与心脏等高。三通管与换能器紧紧密连接密连接，松开动脉夹，打开三通管。第一通，松开动脉夹，打开三通管。第一通道可见血压曲线。道可见血压曲线。四、观察项目四、观察项目 手术和实验装置安装完毕后，记录正常血手术和实验装置安装完毕后，记录正常血压和尿量曲线，然后依次进行下列实验，观压和尿量曲线，然后依次进行下列实验，观察血压和尿量的变化。察血压和尿量的变化。1.快速注射快速注射37生理盐水生理盐水20ml。2.取尿液进行尿糖定性试验，然后快速静脉注射取尿液进行尿糖定性试验，然后快速静脉注射20葡萄糖葡萄糖5ml，观察血压和尿量变化。待尿量变化明显观察血

38、压和尿量变化。待尿量变化明显后，再取尿液作尿糖定性试验。后，再取尿液作尿糖定性试验。3.静脉注射静脉注射1：10000去甲肾上腺素去甲肾上腺素0.3 0.4ml。4.刺激右侧迷走神经刺激右侧迷走神经。用保护电极以中等强度和频率。用保护电极以中等强度和频率的连续脉冲（复刺激，时程的连续脉冲（复刺激，时程10s，波宽，波宽2.0ms，强度，强度5.0V，频率频率60Hz）刺激迷走神经，使血压下降到刺激迷走神经，使血压下降到50mmHg左右，维持左右，维持510秒，观察尿量变化。秒，观察尿量变化。5.静脉注射静脉注射速尿速尿12mg，观察尿量变化。观察尿量变化。6.静脉注射静脉注射垂体后叶素垂体后叶

39、素12单位，观察血压和尿量变单位，观察血压和尿量变化。化。五、打印结果，分析讨论，实验报告五、打印结果，分析讨论，实验报告六、注意：六、注意：1、需多次静脉注射，注意、需多次静脉注射，注意保护耳缘静脉保护耳缘静脉。2、小量注射某种药物后，应紧接着注射、小量注射某种药物后，应紧接着注射12ml生生理盐水，使药物及时进入血液循环。每次注射完理盐水，使药物及时进入血液循环。每次注射完毕尽量不拔针头，换针管后注射下一种药物。毕尽量不拔针头，换针管后注射下一种药物。3、输尿管插管操作轻柔，避免损伤性闭尿。、输尿管插管操作轻柔，避免损伤性闭尿。4、警惕动物麻醉过度。、警惕动物麻醉过度。实验八小鼠脊髓半横断

40、v实验目的：观察小白鼠脊髓半横断后的表现，加深对脊髓功能的认识v实验原理：脊髓是高位中枢与外周的感觉、运动功能联系的传导道。在正常情况下痛觉、温度觉、部分触-压觉的传导路径先交叉再上行。肌肉本体感觉和部分触-压觉传导路径先上行再交叉。脊髓损伤时，外周血管平滑肌紧张性下降，血管扩张。v实验方法：1.乙醚麻醉小鼠2.损伤右半脊髓（T8-12）v实验项目：待小鼠清醒后观察1.小白鼠前肢、左后肢、右后肢的姿势（右后肢瘫痪）2.比较前肢、左后肢、右后肢的活动情况（右后肢瘫痪）3.比较后肢足底皮肤血管充血程度（右后肢足底充血）4.比较左后肢及右后肢对针刺的反应（右后肢痛觉存在，左后肢痛觉消失）v注意事项：

41、1.针刺点要选择准确，下针垂直，以免伤及对侧脊髓2.麻醉要适度3.实验结束后要处死动物小白鼠的生物学特性一般特性：1.对外界环境反应敏感，适应性差，强光或噪声刺激时，可能导致哺乳母鼠神经紊乱，发生食仔现象。温度过高或多低时，生殖能力下降，严重时会发生死亡；2.对多种毒素和病原体易感，百万分之一的破伤风毒素能使小鼠死亡；3.对致癌物敏感，自发性肿瘤多。解剖学特点：1小鼠下颌骨的喙状突较小，髁状突发达，运用下颌骨形态的分析技术，可进行近交系小鼠遗传监测；2小鼠无汗腺；3淋巴系统发达，外界刺激可使淋巴系统增生，因此易患淋巴系统疾病。生理学特点：1.小鼠成熟早，繁殖力强，适配鼠龄为出生后6090天；2

42、.交配后1012小时，雌鼠在阴道口形成一个白色的阴道栓，这是受孕的标志；3.小鼠生长发育快慢与品系、营养、环境、带仔数的多少、生产胎次有密切关系；4.生育期为一年，寿命达23年；5.染色体为20对。v在生物医学领域中，小鼠因其自身的特点，是用途最广泛、使用量最大的哺乳类实验动物。-药物学研究和毒性试验，小鼠广泛用于药品的毒性试验及三致(致畸、致 癌、致突变)试验；-肿瘤学研究：进行肿瘤模型的复制小鼠对致癌物质、射线及某些病毒敏感，可诱发各种肿瘤，-传染性疾病研究 小鼠对多种病原体特别是病毒极为敏感，常用于研究这些病原体的发病的机理、临床症状及治疗。例如狂犬病、脊髓灰质炎、流感、脑炎、血吸虫病、

43、疟疾、破伤风等的研究。-遗传学和遗传性疾病的研究 许多小鼠具有遗传疾病，如小鼠黑色素瘤、糖尿病肥胖、遗传性贫血、尿崩症、肌肉萎缩症、骨骼硬化症、自身免疫缺陷症等。这些疾病与人类发病相似，可用作人类遗传疾病的动物模型。-老年病学的研究 小鼠寿命短，传代时间短，随着鼠龄的增加，机体内的一些生理生化指标不断发生变化，特别是高龄鼠中老年病明显增多，是老年学研究的极好材料。多用于糖质、脂质、胶原和免疫等方面的研究。-计划生育研究 小鼠繁殖力强，性周期和妊娠期短，生长快，适合计划生育研究。如常用小鼠做抗生育、抗着床、抗早孕、抗排卵等实验应用上的首选动物。v不宜采用小鼠制作动物模型的实验研究：研究体温变化的试验,因为小鼠体温变化不稳定；慢性支气管炎的试验,因为小鼠气管及支气管腺不发达；催吐试验,因为小鼠无呕吐反应；动脉粥样硬化试验,因为小鼠不形成动脉粥样硬化。