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1、结晶紫实验检测细胞生长曲线具体步骤?如题:有以下几个问题:1. 结晶紫染料染上的是所有细胞, 或者是死细胞,或者是活细胞?2. 检测细胞生长曲线的方法很多,结晶紫这种方法有什么优势吗?我们实验室现行的方法就 只有这种.3. 我实验的目的是检测稳定转染了目的基因的细胞株的生长趋势,以转染了空载体的细胞作 为对照. 要求两种细胞株在启始点的细胞数一致. 我是通过血球计数板计数稀释过的细胞, 得出每毫升稀释液中的细胞数. 在 24 孔板中测生长曲线每孔需要接种多少细胞? 细胞的多 少会影响细胞的生长吗? 还是会影响细胞的生长趋势?有没有必要做两个浓度或更多浓度 的平行实验?4. 生长曲线最适的是测几
2、个时间点?我需要在同一块24 孔板上种下所有时间点的细胞,然后 分别与不同的时间点收吗?好象拿出细胞台就会污染.我必须种在几个 24 孔板吗?5. 在制作生长曲线的时候,由于我是在 不同的时间点收的细胞,分别测 OD 值,直到最后一个 时间点做完,那就要求我每次处理的细节一致或者是先收的细胞保存着等待最后一个时间点 再一起处理细胞,测 OD 值.能这样处理吗?在实验中如何注意这个问题?希望大家一起来讨论.谢谢了.1：只有活细胞线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性MTT还原为难溶于水的蓝紫色的Formazan 结晶并沉积在细胞中2：检测细胞生长曲线也可以利用细胞计数法进行的 3：细胞接种数不能过多也不能太少，太少细胞滞留期太长；数量太多，细胞将很快进入平 台期，要求在短期内进行传代，曲线不能确切反映细胞生长情况。一般接种数量以 710 天能长满而不发生生长抑制为度。同种细胞的生长曲线先后测定要采用同一接种密度，这样 才能做纵向比较；不同的细胞也要接种细胞数相同，才能进行比较。4：最好种在几个培养板上。通常计数7 d的。每隔24 h测量一个点，每个点为3个平行 样品的平均值。5： OD 值最好一个时间点测一次，最好不要最后以下测，这样对你的结果有偏差的。
结晶紫实验检测细胞生长曲线具体步骤
