标签蛋白酶切位点
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1、氨基酸的简写符号名 称 三字母符号 单字母符号 名 称 三字母符号 单字母符号 丙氨酸(alanine) Ala A 亮氨酸(leucine) Leu L 精氨酸(arginine) Arg R 赖氨酸(lysine) Lys K 天冬酰胺(asparagine) Asn N 甲硫氨酸(methionine) Met M 天冬氨酸(aspartic acid) Asp D 笨丙氨酸(phenylalanine) Phe F 半胱氨酸(cysteine) Cys C 脯氨酸(proline) Pro P 谷氨酰胺(glutanine) Gln Q 丝胺酸(serine) Ser S 谷氨酸(gl
2、utamic acid) Glu E 苏氨酸(threonine) Thr T 甘氨酸(Glicine) Gly G 色氨酸(tryptophan) Trp W 组氨酸(histidine) His H 酪氨酸(tyrosine) Tyr Y 异亮氨酸(isoleucine) Ile I 颉氨酸(valine) Val V 表 5 融合蛋白的剪切方法剪切的方法剪切位点序列注释化学法溴化氰Met需要70%甲酸,室温羟胺AsnGly在pH为9条件下,需要加热,45甲酸AspPro70%甲酸,需要加热酶法肠激酶Asp-Asp-Asp-Asp-Lys重组的蛋白酶,为内切酶,如果在赖氨酸后为脯氨酸则不能
3、剪切,在其它的碱性氨基酸残基后有非特异性剪切,具有活性的pH范围为4.5到9.5,温度范围为4到45凝血因子a蛋白酶Ile-Glu/Asp-Gly-Arg如果在精氨酸后为脯氨酸和精氨酸则不能剪切,为内切酶,在Gly-Arg后存在非特异性剪切凝血酶Leu-Val-Pro-ArgGly-Ser牛来源的含有其它蛋白质,为内切酶,存在非特异性的剪切,生物素化后可用链霉抗生物素蛋白亲和层析清除PreScission蛋白酶Leu-Glu-Val-Leu-Phe-GlnGly-ProGST融合的鼻病毒3C蛋白酶,为内切酶,4具有最优活性rTEV蛋白酶Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-GlnGly重组的烟草蚀纹病毒蛋白酶,具有8个氨基酸识别位点,高特异性,为内切酶,在宽的温度范围里具有活性,与His-tag融合后,酶切后使用金属螯合亲和层析清除二肽基氨基肽酶(Xaa)2nXaa-Pro, (Xaa)2nXaa- Xaa Pro, (Xaa)2nLys/Arg/Gln为外切酶,当终止氨基酸为Gln时,可在谷氨酰胺环转移酶和焦谷氨酰胺肽酶的作用下去掉Gln,可产生天然的目标蛋白质,特异性强
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