布鲁氏菌病净化技术规安徽动物疫病预防与控制中心

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1、ICS点击此处添加中国标准文献分类号DB*安徽省地方标准DB XX/ TXXXX2017牛羊布鲁氏菌病净化技术规范Technical Regulation for Eradication of Cattle and Sheep Brucellosis点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（本稿完成日期：2017年12月4日）2017 - XX - XX发布2017 - XX - XX实施安徽省质量技术监督局发布前言本标准按GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省动物疫病预防与控制中心提出。本标准由安徽省标准化委员会归口管理。本标准起草单位：安徽省动物疫病预防与控制中心，安徽省农

2、业大学动物科技学院本标准主要起草人：朱良强等牛羊布鲁氏菌病净化技术规范1 范围本标准规定了牛羊布鲁氏菌病净化的术语和定义、基线调查、监测方法、净化措施等方面的技术要求。本标准适用于安徽省境内规模牛羊场布鲁氏菌病的净化。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 16548 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程GB/T 18646 动物布鲁氏菌病诊断技术NY/T 541 动物疫病实验室检验采样方法布鲁氏菌病防治技术规范 农医发20077号国家布鲁氏菌病防治计

3、划（2016-2020年） 农医发201638号跨省调运乳用种用动物产地检疫规程 农医发201033号规模化养殖场主要动物疫病净化技术指南3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1 布鲁氏菌病Brucellosis布鲁氏菌病（也称布氏杆菌病，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的牛、羊、猪、鹿、犬等哺乳动物和人类共患的一种传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。3.2 控制是指连续2年以上，牛布病个体阳性率在1%以下，羊布病个体阳性率在0.5%以下，所有染疫牛羊均已扑杀。本地人间布病新发病例数不超过上一年。以县为单位，达到布病控制标准的区域

4、为控制区，未达到控制标准的区域为未控制区。3.3 稳定控制 是指连续3年以上，牛布病个体阳性率在0.2%以下，羊布病个体阳性率在0.1%以下，所有染疫牛羊均已扑杀，1年内无本地人间新发确诊病例。以县为单位，达到布病稳定控制标准的区域为稳定控制区。3.4 净化 是指达到稳定控制标准后，用试管凝集试验、补体结合试验、iELISA或者cELISA检测血清均为阴性，辖区内或牛羊场群连续2年无布病疫情。连续2年无本地人间新发确诊病例。以县为单位，达到布病净化标准的区域为净化区。达到布病净化标准的牛羊场群，即为净化场群。4 诊断方法4.1 临床症状与病理剖检4.1.1 临床症状 布病典型症状是怀孕母畜流产

5、。乳腺炎也是常见症状之一，可发生于妊娠母牛的任何时期。流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎，多见从阴道流出污秽不洁、恶臭的分泌物。新发病的畜群流产较多。公畜往往发生睾丸炎、附睾炎或关节炎。4.1.2 病理变化 主要病变为妊娠或流产母畜子宫内膜和胎衣的炎性浸润、渗出、出血及坏死，有的可见关节炎。胎儿主要呈败血症病变，桨膜和黏膜有出血点和出血斑，皮下结缔组织发生桨液性、出血性炎症。组织学检查可见脾、淋巴结、肝、肾等器官形成特征性肉芽肿。4.2 实验室诊断4.2.1 病原学诊断 显微镜检查必须在二级生物安全实验室进行，做好必要的人员防护，采集流产胎衣、绒毛膜水肿液、肝、脾、淋巴结、胎儿胃内容物等组织，

6、制成抹片，用柯兹罗夫斯基染色法染色，镜检，布鲁氏菌为红色球杆状，而其它菌为蓝色。4.2.2 血清学诊断4.2.2.1初筛采用虎红平板凝集试验（RBPT），也可采用荧光偏振试验（FPA）和全乳环状试验（MRT）。4.2.2.2确诊采用试管凝集试验（SAT），也可采用补体结合试验（CFT）、间接酶联免疫吸附试验（iELISA）和竞争酶联免疫吸附试验（cELISA），按照GB/T 18646规定执行。4.3 结果判定4.3.1 符合4.1的，判定为疑似患病动物。4.3.2 符合4.1且4.2.1阳性时，判定为患病动物。4.3.3 4.2.2.1阳性时，判定为疑似患病动物。4.3.4 4.2.2.2阳

7、性时，判定为患病动物。4.3.5 符合4.3.3但4.2.2.2阴性时，30天后应重新采样，4.2.2.1或4.2.2.2阳性的判定为患病动物。5 净化方法5.1 本底调查5.1.1 样品采集所有奶牛场及牛、羊种畜场全部采集。其它场群内所有个体按照随机抽样原则，进行布鲁氏菌抗体检测，采样数量可参照不同置信区间估测个体流行率所需近似样本数量表（见附录）。样品的采集、保存按NY/T 541执行。5.1.2 检测方法 按4.2.2 血清学诊断进行。5.1.3 区域划分按照血清学检测结果，依据当地布病流行率，以县（市、区）为单位，划分为未控制区、控制区、稳定控制区和净化区。5.2 日常监测5.2.1

8、非免疫牛羊当地动物疫病预防控制机构应对所有种畜和奶畜每年至少开展1次检测，对其他牛羊每年至少开展1次抽检，发现阳性畜的场群应进行逐头检测。5.2.2 免疫牛羊 当地动物疫病预防控制机构按照调查流行率的方式抽样检测免疫抗体，结合免疫档案，了解布病免疫实施情况。5.2.3 疑似病畜 当地动物疫病预防控制机构及时采样开展布病血清学和病原学检测，发现阳性畜的，应当追溯来源场群并进行逐头检测。5.3 免疫接种 所有奶畜禁止免疫。牛羊原则上禁止免疫。当牛的个体检测阳性率1%或羊的个体检测阳性率0.5%的场，可采取免疫措施，养殖场可向当地县级以上畜牧兽医主管部门提出免疫申请，经县级以上畜牧兽医主管部门报省级

9、畜牧兽医主管部门批准后，以场群为单位采取免疫措施。5.4 检测-扑杀净化在监测中发现布病阳性畜的场群，及时隔离淘汰阳性畜，场群每隔3个月全场群检测一次，直到连续2 次检不出布病阳性畜，则视为布病健康场群；健康场群每半年全群检测一次，连续2 次检测布病阴性，可视为布病净化场群。净化场群至少每1年检测一次，保证布病检测阴性。样本量按1%的个体流行率，95% 置信水平，用证明无疫的方法计算样本量。5.5 扑杀和无害化处理按照布鲁氏菌病防治技术规范规定对感染布病的牛羊进行扑杀。对病畜尸体及其流产胎儿、胎衣和排泄物、乳、乳制品等按照病害动物和病害动物产品生物安全处理规程（GB165482006）进行无害

10、化处理。流产胎儿、死胎、胎盘、羊水、流产物、排泄物所污染的褥草和场地，必须进行严格彻底的消毒和无害化处理，做好影像资料的收集和记录，同时要作好个人防护。6. 检疫监管6.1 调入监管当地动物疫控机制与动物卫生监督机构实行联防联控会商机制，在做好报批报检的同时，须及时向当地疫控机构报告有关情况。严格限制从高风险地区或从一类地区新调入牛羊，二类地区免疫场群的牛羊禁止转场饲养。对调入的牛羊进行全群检测，检测结果为阴性牛羊，按30天间隔连续2次检测均为阴性，方可混群饲养；检测结果确定为阳性的牛羊进行扑杀。对未经报批报检引进的牛羊，一经发现，全部进行血清学监测，检出的阳性畜无偿扑杀。调入的用于屠宰用途的

11、牛羊，直接进入屠宰场，禁止在其余场所继续饲养。引进的奶牛及其精液、胚胎应符合中华人民共和国动物防疫法和动物检疫管理办法、跨省调运乳用、种用动物产地检疫规程的有关规定。跨省调运奶牛时，应优先从获得农业部净化评估认证的奶牛场引种。6.2 调出监管调出牛羊时，要严格执行动物检疫管理办法，依法严把检疫关，特别是严格限制阳性动物流动，禁止转移和出售。牛羊凭检疫合格证明和布病血清学阴性报告调运。6.3 防疫监督布病监测合格应为奶牛场、种畜场动物防疫合格证发放或审验的必备条件。动物防疫监督机构要对辖区内奶牛场、种畜场的检疫净化情况监督检查。鲜奶收购点（站）必须凭奶牛健康证明收购鲜奶。7 净化标准7.1县级净

12、化标准 连续2年以上具备以下2项条件：（1） 达到稳定控制标准后，全县范围内连续两年无布病疫情；（2） 用试管凝集试验、补体结合试验、iELISA或者cELISA检测血清均为阴性。7.2市级净化标准 全市所有县均达到净化标准。7.3 省级净化标准全省所有市均达到净化标准。8 净化维持 达到布病净化状态的规模牛羊场要开展持续性监测，至少每1年检测一次，以保持场群健康状态，监测期间发现异常情况处置同5.4。8 其他措施养殖场要建立完善的饲养管理制度。严格执行卫生防疫制度，严格执行生物安全管理措施，规范饲养管理行为。加强动物耳标佩戴管理，在防疫档案中，添加布病检测、扑杀等有关信息。按布鲁氏菌病防治技

13、术规范要求，对产舍、牛羊圈舍环境开展严格的消毒、杀虫和灭鼠。对布病阳性动物隔离饲养，严格限制移动，及时扑杀，并对阳性动物圈舍、用具、物品等进行严格消毒。饲养人员每年要定期进行健康检查，发现患有布病的应调离岗位，及时治疗。附录不同置信区间估测个体流行率所需近似样本数量预测流行率置 信 区 间90%95%99%绝 对 误 差绝 对 误 差绝 对 误 差10%5%1%10%5%1%10%5%1%10%2497243535138345760239597120%4317343296124661471064251061630%5722756828132380671395571393340%6526064949236992201596371592350%6827167649638496041666631657860%6526064949236992201596371592370%5722756828132380671395571393380%4317343296124661471064251061690%24972435351383457602395971