细菌药物敏感试验实验报告

《细菌药物敏感试验实验报告》由会员分享，可在线阅读，更多相关《细菌药物敏感试验实验报告（19页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、细菌药物敏感试验实验报告药物敏感性试验的基本原则1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药：天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长 期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。天然耐药信息一 般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能 无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重 误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。实验室全体人员 应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。2药敏试验测试的前提条件：实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本 处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信； 具备对

2、结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分 离株（可能）有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量 培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。3测试结果应准确：实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理 体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室 间比对项目。建议保留菌株，以便复核。具体的专业要求1标本类型临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的 分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于 临床、实验室以及相关各方的密切合作。在规

3、范临床送检的前提下， 实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。 实际工作中需重点考虑的标本如下。1. 脑脊髓液：正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。报告审核 时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的 抗菌药物、一、二代头孢菌素（除外静脉用头孢呋辛）、头霉素类、克 林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。2. 尿液:有些药物如呋喃妥因，仅限于测试和报告尿分离株湛他标本的分离 株，不应报告此药；尿道标本常规不应报告氯霉素。3. 呼吸道：呼吸道标本分离株不应测试和报告达托霉素的敏感性。2药敏方法的选择和判定标准的规范化不同药物/菌种组合，应遵照

4、CLSI的要求选择适当的药敏方法和判定 标准。药敏判定标准至少采用近两年的折点。实验室应每年评审本室 药敏检测系统的折点范围；采用新折点前，应进行临床验证，并和临 床科室进行咨询和沟通；因药敏板条浓度范围受限，无法采用新折点 的，应补充相应的耐药表型检测试验，且告知临床。判定标准的适用性：与菌种、药敏方法、检测条件、纸片含量、感染 部位、药物（种类、剂量、频次、途径）有关。上述条件符合规范要求 时，折点方适用。对于CLSI M100没有给出折点的药物，建议采用 国内外专家共识、权威文献等进行操作和判断，如替加环素药敏试验 建议参照替加环素体外药敏试验操作规程专家共识进行。3常规测试和报告药物选

5、择CLSI药敏标准等同于我国部颁标准。因此CLSI文件推荐的药物是最 重要的选择依据。CLSI M100-S25文件列出了美国常见细菌的药物 测试和报告的建议；M45列出部分少见细菌的测试和报告药物建议。以规范和指南为基础，结合当地病原谱特征、药物代表性、所在医疗 机构临床需求和本实验室条件，满足临床治疗、流行病学监测等目的， 并充分听取临床科室如感染科、ICU以及临床药师和感染控制医师的 意见，综合确定本室不同菌种/药物测试和报告组合。自动化药敏板的选择应综合上述原则；当药敏板无法同时满足某些重 要药物时，建议采用手工法予以补充。药物选择应有一定连续性，保证不同时期药敏的可比性；同时兼顾适

6、当灵活性，以满足临床需求和检测要求。药物选择不应受商业因素和 实验室利益因素影响。可有选择性地报告测试药物，报告中可以标示出所测试药物的分组 （A/B/C/U类等）。当临床有特殊需求时，可同时报告多类敏感的药物。 应注意的是，A类药物是常规必测必报药物，而不等同于”临床首选 药物”。同理，B和C也不等同于临床替代药物。最少必测药物/菌种组合可参考CLSI M100-S25。如金黄色葡萄球 菌，必测药物应包括：苯唑西林和头孢西丁；磺胺；利奈唑胺；1种 四环素类；万古霉素；1种氟喹诺酮类；庆大霉素；尿标本还应加做 呋喃妥因。当遇到特殊耐药表型如碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌时， 建议加测黏菌素、米诺环

7、素、磷霉素、替加环素等。特殊耐药性和耐药表型的审核要点在药敏试验中，由某一药物的药敏结果可以预报”或”指示淇他药物 敏感或耐药的药物，该药物即预报药或指示药。1预报药/指示药举例1. 苯唑西林：预报葡萄球菌属对纳酰胺类药物（除头孢洛林外）的敏感性。2 .苯唑西林（纸片法）:预报肺炎链球菌对青霉素的敏感性。3. 四环素敏感：预测多西环素、米诺环素敏感。4. 肠球菌对青霉素敏感：预测肠球菌属对氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦等 敏感；但氨苄西林敏感，不能预测青霉素为敏感。5. 头孢唑林：其结果可以预报非复杂性的泌尿系统感染的大肠埃希菌、肺炎克雷伯 菌和奇异变形杆菌对口服头孢拉定、头孢

8、地尼、头孢克罗、头孢丙烯、 头孢泊肟、头孢呋辛的敏感性。6. 红霉素敏感:可以预测克拉霉素、阿奇霉素、地红霉素敏感。7. 万古霉素敏感：预报对替考拉宁敏感。2特殊耐药性或耐药表型检测1.需要关注：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus , MRSA)、红霉素诱导克林霉素耐药 (erythromycin inducible clindamycin resistance , D 试验)、万古 霉素中介金黄色葡萄球菌(vancomycin intermediate Staphylococcus aureus , VISA)、万

9、古霉素耐药金黄色葡萄球菌 (vancomycin resistant Staphylococcus aureus , VRSA)、万古霉 素耐药肠球菌(vancomycin - resistant Enterococcus, VRE)、青霉 素耐药肺炎链球菌(penicillin resistant Streptococcus pneumoniae, PRSP)、高水平氨基糖苷类耐药(high level aminoglycoside resistant, HLAR)肠球菌、产超广谱B内酰胺酶菌 (extended - spectrum p- lactamases , ESBL)、碳青霉烯类耐

10、药肠 杆菌科(carbapenem - resistant Enterobacteriaceae , CRE)等。2. D试验：适用于葡萄球菌属、肺炎链球菌、B溶血链球菌。当红 霉素耐药而克林霉素敏感时，需要做此试验。如阳性,则克林霉素 修改为耐药。3 . HLAR试验：能够预测氨苄西林、青霉素或万古霉素与一种氨基 糖苷类之间的协同效应。适用于肠球菌属。除了高浓度的庆大霉素和 链霉素外，不需测试其他的氨基糖苷类。4 .ESBL :多见于肠杆菌科，可以水解青霉素类、头孢菌素（包括三代、 四代）和氨曲南。5. 需要检测B内酰胺酶的菌种：葡萄球菌属、流感嗜血杆菌、卡他 莫拉菌、淋病奈瑟菌、厌氧菌等。

11、内酰胺酶阳性预测对青霉素酶不 稳定的青霉素类耐药。6 .当出现罕见或不常见耐药表型时，如VRSA时，要复核鉴定和药 敏，并提交上级实验室。3葡萄球菌属药敏报告审核要点1. 少见耐药表型：如出现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素中介或耐药的葡 萄球菌，需要用肉汤稀释法复核。2 .方法:万古霉素药敏不能用纸片扩散法，必须用MIC方法检测。3. 青霉素敏感：应重点审核内酰胺酶检测方法和结果。4 .甲氧西林耐药葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus , MRS):必须报告是否为MRS,头孢西丁仅为检测MRS的替代用药，不能直 接报告头孢西丁为日或S。5

12、邛内酰胺类：目前仅报告青霉素和苯唑西林的药敏结果。6. 红霉素耐药、克林霉素敏感:报告D试验结果，如阳性应修正克林霉素的S（敏感）为中”（耐药）。7. 氟喹诺酮类：多数品种间药敏结果基本是一致的。4肠球菌属药敏报告审核要点1. 少见耐药表型：如出现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素中介或耐药的肠 球菌，需要用MIC法（如肉汤稀释法）复核。2. 天然耐药:肠球菌属对氨基糖苷类（除高浓度外）、头孢菌素类、克林霉素、甲氧 苄啶和复方磺胺天然耐药，即使体外敏感，但是临床治疗无效，因此 不能报告为敏感。5肺炎链球菌药敏报告审核要点1 .青霉素：无纸片扩散法折点，可用苯唑西林纸片法结果（当直径20

13、mm）预测 青霉素的敏感性，或直接检测青霉素的MIC。不能报告苯唑西林的敏 感性。2. 青霉素折点：因感染类型（脑膜炎和非脑膜炎）、剂型不同（口服、静脉）而不同。3. 头孢菌素:目前二、三代头孢菌素无纸片扩散法折点，需要进行MIC法检测。4. 左氧氟沙星敏感：可预报其对莫西沙星也敏感，反之不可。5. 脑脊髓液中的肺炎链球菌：应报告青霉素、头孢噻肟/头孢曲松或美罗培南的MIC。6草绿色链球菌群药敏报告审核要点1. 链球菌草绿色群包括：变异群(mutans group)、唾液群(salivarius group)、牛群(bovis group)、咽峡anginosus group)(以前称为米勒链

14、球菌群)以及 缓症群(mitis group)，共5个群，每个群有几个种类。咽峡群包括含 A、C、F和G群抗原的B溶血小菌落。2. 正常无菌部位草绿色链球菌：对于分离自正常无菌部位(如脑脊髓液、血液、骨髓)的草绿色链球菌，应使用MIC法检测青霉素的敏感性。7P溶血链球菌药敏报告审核要点1.大菌落化脓性P溶血菌株：包括携带A(化脓链球菌)、C或G群抗原和B群抗原(无乳链球菌)。2.小菌落的溶血菌株: 携带有A、C、F或G群（咽峡炎链球菌过去称为”米勒链球菌”）抗原， 这些细菌作为草绿色菌群的一部分，应使用草绿色菌群的判读标准。3. 选择青霉素和氨苄西林用于治疗P溶血链球菌的感染：青霉素和其他随酰

15、胺类药物不必常规做药敏试验。因为在B溶血链 球菌中，非敏感菌株（也即，青霉素MIC0.12 mg/L及氨苄西林 MIC0.25 mg/L）极为罕见而且化脓性链球菌的非敏感株未曾报道 过。如果做了药敏试验而且P溶血链球菌为非敏感株，则要重新鉴 定、重新药敏试验，得到确认后送往公共卫生实验室。4. 青霉素敏感则预报敏感：对于B溶血链球菌，当以下药物要用于批准的适应证时，青霉素敏感 则视为对这些药物敏感，无需再做药敏试验。A、B、C、G群：氨苄 西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、 头孢吡肟、头孢洛林、头孢拉定、头孢噻吩、头孢噻肟、头孢曲松、头孢唑肟、亚胺培南、厄他培南和

16、美罗培南。仅仅用于A群：头孢克 罗、头孢地尼、头孢丙烯、头孢布烯、头孢呋辛、头孢泊肟和头孢匹 林。8肠杆菌科细菌药敏报告审核要点1邛内酰胺类：首先审核头孢菌素类、碳青霉烯类使用的药敏判定折点；当部分药物 仍使用旧折点时，或出于感控、流行病学目的时，仍应进行耐药表型 的检测，如ESBL或碳青霉烯酶确认试验，并根据表型试验，修改部 分药物敏感性判断结果。2. 碳青霉烯类耐药：仪器法或K - B法检出CRE时，应进行复核，并采用Hodge试验或 Carba NP试验检测碳青霉烯酶；如碳青霉烯酶阳性，应在报告上明 确标示CRE,并加特殊注释，包括感染控制建议和治疗建议等。3 .少见的”矛盾”耐药表型应

17、复核:如阿米卡星耐药而庆大霉素敏感；碳青霉烯类耐药而头孢菌素敏感； 酶抑制剂类复合药耐药而头孢菌素敏感。4. 变形杆菌属、普罗威登菌和摩根摩根菌：亚胺培南MIC高于美罗培南。5. 沙门菌属和志贺菌属：对一代、二代头孢菌素、头霉素和氨基糖苷类体外可能敏感，但是临 床无效，因此不能报告为敏感。6. 粪便中分离的沙门菌和志贺菌:常规报告氨苄西林、1种氟喹诺酮类、复方磺胺。7. 肠道外分离的沙门菌：应加做一种三代头孢菌素和氯霉素。9非发酵糖革兰阴性菌药敏报告审核要点1. 天然耐药：非发酵糖菌对多种药物天然耐药，应告知临床，但不应出现在结果栏 中。2. 方法学: 除铜绿假单胞菌、不动杆菌、博克霍尔德菌、

18、嗜麦芽窄食单胞菌夕卜， 其他非发酵糖菌，目前只能用MIC方法，不能用纸片法检测。3. 碳青霉烯类耐药：需报告是否为碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(carbapenem - resistant Acinetobacter baumannii , CRAB)和碳青霉烯类耐药铜 绿假单胞菌(carbapenem - resistant Pseudomonas aeruginosa , CRPA)。4. 氨基糖苷类：当仪器法检测CRAB出现”庆大霉素R、阿米卡星S时，需用其他方法复核阿米卡星的药敏结果。5 .”矛盾”耐药表型: 应当复核。阿米卡星耐药而庆大霉素敏感；左氧氟沙星耐药而环丙沙 星敏感（鲍曼不动杆菌）；左氧氟沙星敏感而环丙沙星耐药（铜绿假单胞 菌）等。10流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌药敏报告审核要点1. 脑脊髓液分离出的流感嗜血杆菌：只报告氨苄西林、一种三代头孢菌素、氯霉素和美罗培南。2. 氨苄西林敏感：可以预测阿莫西林的活性。3. 罕见表型：氨苄西林耐药而$内酰胺酶阴性(B - lactamases negative ampicillin - resistent, BLNAR)菌株，在我国罕见。BLNAR 阳性， 提示阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢克罗、头孢丙烯、 头孢呋辛、头孢他美等药物耐药。