酶工程复习资料

《酶工程复习资料》由会员分享，可在线阅读，更多相关《酶工程复习资料（6页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、酶工程复习资料一、名词解释1、酶促反应动力学：酶反应动力学是研究酶反应速度规律以及各种因素对酶反应速度影响 的科学。2、自杀性底物:底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆 抑制剂，这种底物叫自杀性底物3、酶试剂盒：配有进行分析或测定所必需的全部酶试剂的成套用品。4、凝胶过滤：凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分 子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离5、非水相酶学：酶反应在有机介质中进行，即是指在非水介质中进行酶催化6、密度梯度离心：是指将样品在密度梯度介质中进行离心，从而使沉降系数很接近的颗粒 分离开来的一种区带离心方法7、

2、等密度梯度离心：又称沉降平衡离心，基于密度梯度离心的原理，根据颗粒密度的不同 而进行分离的一种区带分离方法8、固定化酶：用物理或化学手段定位在限定的空间区域，并使其保持催化活性，可重复利 用的酶9、模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子10、反胶束：是表面活性剂分子在非极性溶剂中自发形成的聚集体（表面活性剂分子的极性 一端朝内，而非极性一端朝外与有机溶剂接触）11、生物酶工程:酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的一门新兴生物 工程12、化学酶工程：通过对酶的化学修饰或固定化处理，改善酶的性质以提高酶的效率和减低 成本，获得理想的生物催化剂

3、13、抗体酶：一类具有催化能力的免疫球蛋白二、填空题1、对牛产酶的菌种的必须要求：酶的产量高，产酶稳定性好，容易培养和管理，利 于酶的分离纯化，安全可靠无毒。2、酶的分离纯化的4个阶段：预处理、粗分级分离、细分级分离、成品加丁3、菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响， 发酵条件一般包括：pL、温度、溶解氧、泡沫、湿度等4、融合酶（杂合酶）的构建策略：二级结构融合、功能域融合、整个酶蛋白的融合5、判断纯化酶方法优劣的指标：总活力的回收率、比活力提高的倍数和重现性6、制备分子印迹聚合物的过程包括：选定印迹分子和功能单体，让它们之间充分作用、在 印迹分子周围发

4、生聚合作用、将印迹分子从聚合物中抽提出去7、酶的催化特性：极高的催化效率、高度专一性、活性的可调节性、活性的不稳定性8、打破酶合成调节机制限制的方法:条件控制、遗传控制、其他方法9、酶牛物合成的模式：同步合成型、延续合成型、中期合成型、滞后合成型10、提高酶产量的措施：添加诱导物、降低阻遏物浓度、添加表面活性剂、添加产酶促讲剂11、诵常酶的固定化方法有：吸附法、包埋法、共价结合法、交联法12、酶化学修饰的目的在干改变酶的性能，即改变活性部位的构象、提高牛物活性、增 强酶的稳定性、降低酶类药物的抗原性、改变酶学性质13、液体深层发酵的概念和优点概念：液体深层发酵，又称浸没式培养，菌体在液体培养基

5、中处于悬浮状态，导入培养基中 的空气通过气液界面传质进入液相，再扩散进入细胞内部的发酵方式。优点：1、产酶纯度高，质量稳定2、较易控制发酵条件，有利于自动化控制3、机械化程度咼，劳动强度小4、设备利用率咼，占地面积小5、易于提取与精制14、酶和抗体的区别1）抗体没有催化活力，酶具有催化活力2）本质差别：酶是能与反映过渡态选择结合的催化物质，而抗体是和基态紧密结合的物质15、米氏方程v km V- r3）酶的活性和合成受到代谢调节，种类有限；抗体只有在抗原存在时才会产生，种类无限u =Km +1SS为底物浓度,邛1K+Su为酶促反应初速度，V为反应的最大速度,K为米氏常数mm三、选择题1、酶工程

6、要解决的主要问题是如何降低酶催化过程的（D ）A.最佳作用时间B.最大产物生成量C.最佳酶反应器 D.成本2、酶促反应的初速度不受那个因素的影响（D ）A.SB.E C.pH D.时间 E.温度3、关于米氏方程常数Km,哪个是正确的（D ）A.饱和底物浓度时的速度B.在一定酶的浓度下，最大速度的一半C.饱和底物浓度的一半D.速度达最大速度半数时的底物浓度4、选择无机载体材料的优点是其（A ）A稳定性好B在厌氧条件下易被微生物分解C机械强度低D耐酸碱、成本低、寿命短5、下列关于酶应用过程中的一些缺陷错误的是（C ）A酶的稳定性较差B酶的一次性使用C不溶于水，易于与底物、产物分离D产物的分离纯化较

7、困难四、简答题1、比较固定化酶与游离酶的优缺点优点：1）可提咼稳定性2）能回收，易于产物分离，可反复使用3）简化提纯工艺，增加产物回收4）酶反应过程能加以严格控制缺点：1）存在扩散限制2）适于催化小分子物质3）活性中心受损，酶活性降低2、比较抗体与酶的异同点相同点：都具有特异性，都是蛋白质不同点：1、抗体没有催化活力，酶具有催化活力2、本质差别：酶是能与反映过渡态选择结合的催化物质，而抗体是和基态紧 密结合的物质3、酶的活性和合成受到代谢调节，种类有限；抗体只有在抗原存在时才会产 生，种类无限3、计算比活力、总活力、回收率、纯化度举例：某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比

8、活力，回收率及纯 化倍数。体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml）初提取液1202002.5硫酸铵沉淀58101.5解：（1）起始总活力：200x120 = 24000 （单位）（2）起始比活力：200-2.5 = 80 （单位/毫克蛋白氮）（3）纯化后总活力810x5 = 4050 （单位）2（4）纯化后比活力810-1.5 = 540 （单位/毫克蛋白氮）（5）产率（百分产量）：4050-24000=17%（6）纯化倍数：540-80=6.75五、问答题1、酶非水相催化的主要类型及优点类型：1）、酶在与水共溶的有机介质体系中催化反应2）、酶在有机介质和水组成的两相体系中的催化反

9、应3、酶在近乎无水的有机溶剂中催化反应，包括非极性有机溶剂-酶悬浮体系和非极性 有机溶剂-PAGE修饰酶单相体系等4）、酶在反胶束体系中催化反应优点：1）、在非水系统中，绝大多数有机化合物溶解度高，尤其是能提高非极性底物的 溶解度，而酶不溶于有机介质，因此酶易于回收再利用。2）、非水介质的参与可以改变反应平衡，使酶可以催化在水中不能进行的反应。3）、能抑制依赖于水的某些不利反应和副产物。4）、从有机溶剂中分离纯化产物比从水中容易，从低沸点的溶剂中可以更容易地 分离纯化产物。5）、酶在非水体系中的热稳定性和储存稳定性增加，而且可以有效减少反应过程 中的微生物污染。6）、可以控制底物的特异性、区域

10、选择性和立体选择性。7）、在很多情况下，可以实现游离酶的回收与再利用。8）有机溶剂的凝固点一般远低于水，使一些对温度非常敏感的酶可以在适宜的温 度下进行催化反应。2、什么是密度梯度离心，等密度梯度离心，试作图比较密度梯度离心法等密度梯度离心法通常选用蔗糖通常选用Cscl最大的梯度密度小于最小密度的沉降样品最大的梯度密度大于密度最大的沉降样品在最高的沉降物质达到管底前停止，短时间、 低速度使各组分沉降到其平衡的密度区，长时间、 高速度密度相近、大小不同密度不同、大小不同3、应用微生物开发酶有哪些优点（1）微生物种类多，品种齐全；（2）微生物生长繁殖快，生长周期短，产量高；（3）培养方法简单，原料来源丰富，价格低廉,经济效益高,并可以通过控制培养条件来提高酶的产量；（4）微生物具有较强的适应性和应变能力.