小球藻的培养和保存技术新

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1、小球藻的培养和保存技术如何培养和保存小球藻， 是繁殖小丑鱼的另一个关键。 小球藻可以买成品的，也不贵。也可以自己培养，但比较麻烦。下面是用小球藻培育 和保存的经验。一、 小球藻种的获得小球藻种可以从活体小球藻种液获得。 初次可以从渔友那取得种液，也可从淘宝商家购买，一般一套（小球藻、小球藻、营养液） 100 元左右。二、 小球藻的有关知识小球藻属于绿藻门，绿藻纲，绿球藻目，卵囊藻科，小球藻属，繁殖时，每个细胞形成 2、4、8或16个似亲孢子，似亲孢子经母细胞壁破裂释放。 小球藻细胞内含有丰富的叶绿素， 光合作用非常强，是其他植物的几十倍。 其含有丰富的蛋白质、 维生素、矿物质、食物纤维、核酸及

2、叶绿素等，特别是含有令人注目的生物活性物质糖蛋白、多糖体以及高达 13的核酸等物质。小球藻的直径只有 38微米，必须用 600倍以上的显微镜才能看见，且形状呈圆球形，所以被称为小球藻（绿藻）。小球藻可以生息在淡海水中，它借助阳光、水和二氧化碳，以每隔20小时分裂出 4个细胞的旺盛繁殖能力，不停地将太阳能量转化生成蕴涵多种营养成分的藻体，并在增值中释放出大量的氧气。它的光合能力高于其他植物10倍以上，繁殖能力比陆地上的高等植物强 100倍以上。小球藻生于热带、 温带淡水和海水中， 以细胞分裂进行无性繁殖，并可产生配子进行有性繁殖。适宜温度为 20-23 ，温度过低会影响小球藻的繁殖。海水小球藻适

3、宜盐度20- 30。适宜光照 5000-10000LX，太弱 会抑制光合作用，影响生长和繁殖。适宜水质为 pH=8，氮磷钾、二氧化碳含量高的海水。含量太低会抑制生长和繁殖。三、 轮虫繁殖用活体小球藻的培育条件温度与繁殖缸相近即可，我用室温8-26 。盐度与繁殖缸一样，我用30 ，比重 1.02 。合适的光线，我用自然光，必要时加照明。合适的营养液，可购买或自己配制（方法后面介绍）四、 准备一容器做培养缸， 可以是玻璃或透明塑料的， 容积可根据要繁殖的轮虫的数量确定，我是用食用油瓶改制培养缸，我繁殖轮虫只用 5 升的就够了。准备加热棒、照明、气泵，根据需要使用。收到活体小球藻后，测出比重（一般较

4、低， 1.01 左右），然后据此比重调整培养缸的海水比重， 加入合适的营养液，初次培养用新配的海水和小球藻种液。 然后将种液倒入， 放光亮处繁殖。每天搅拌几次，也可用气泵加气，不要加沙头，就像孵化丰年虾一样。当培养缸海水颜色从淡变深绿时 （一般 7 天左右，生长太快的小球藻营养低） 就可以使用了。 倒出一部分做藻种长期保存（方法后面介绍） ，剩下的添加海水继续培养 3 天左右（变深绿色）。五、 循环培养。正常培养缸在室温 8-26 时可不加温，不加气，用自然光，节约能源。 培养完成后部分把小球藻连水抽出喂养轮虫， 每天不断添加海水 （可以用滤完轮虫的海水，我是用高质量的沙头过滤轮虫） ，一周后

5、只剩很少的小球藻了 （水变成淡绿色），喂养周期结束，然后调整好比重（一般加淡水），添加营养液，重新进入培养循环。 一般 5-6 个循环小球藻就会遭到其他浮游生物的污染，就必须纯化藻种了（方法后面介绍），有些人藻液被蓝藻（有毒）污染，会造成轮虫和小丑鱼的死亡。六、 时间节奏的调整。小球藻培养要掌握节奏, 最好轮虫重新培养时达到最深颜色（培养一周左右）。小球藻太多时可连水抽出放低温处 （冰箱冷藏室） 保存几十天没有问题，还可以用下面方法调整。减慢小球藻增殖的方法：减少照明，降低温度。加快小球藻增殖的方法：增加供气，增加营养液，增加照明，提高温度。一般调整得好， 可以和公子小丑鱼产卵和孵化同步，我的

6、公子小丑隔 15 天产卵一次，小球藻培养8 天喂 7 天，也是 15天循环一次。七、 小球藻种的保存 1。液体保存。用第一次培养好后倒出的一部分藻液 （深绿色）做藻种，用水族呼吸袋包装好后再用橡筋扎紧密封， 然后放入透气的塑料盒中，再放入冰箱的冷藏室保存即可。 使用时取出摇匀（会有沉淀）让温度慢慢升到室温就可以当藻种用了。我最长保存过近一年，还可以正常繁殖。更长的时间就没有试过了。八、 小球藻种的保存 2.干法保存。在加过营养液的海水中加入琼脂， 加热融化后冷却成果冻状，切成小块，然后放入第一次培养好后倒出的一部分藻液（深绿色）中，几天后果冻表面会长有一层小球藻，呈绿色，取出后放入透气的塑料盒

7、中， 再放入冰箱的冷藏室保存即可。 使用时取出，让温度慢慢升到室温就可以当藻种用了。 我最长保存过近一年，还可以正常繁殖。 更长的时间就没有试过了。 每次从冰箱取出一部分即可，使用和保存比液体更方便。九、 小球藻种的浓缩。1、小球藻在光照和营养盐缺乏的情况下会产生沉淀。在培养时，当营养盐较低的时候（生长条件正常，但小球藻不增殖，即浓度不变化），把小球藻装入瓶内，放入冰箱冷藏室，1-3 天后就会沉淀， 倒出上层清液， 即可取得浓缩小球藻液体。用前面介绍的呼吸袋效果更好， 小球藻的活力更高。 营养盐还可以用离子交换树脂吸附来降低。2、用电泳或阳离子絮凝剂如明矾、聚合氯化铝、聚合硅酸硫酸铝等可以让小

8、球藻沉淀，此方法会引入其他盐类。3、用蛋白分离器打出浓缩小球藻，此方法容易破坏小球藻活性，还会富集其他蛋白质。九、 营养液的配制。配方一（适合保存藻种和精细培养）A 液：NaNO3K2HPO4MgSO4CaClNa2CO3150g/L4g/L7.5 g/L3.6 g/L100g/LB 液：Citric acidFerric ammonium citrateEDTANa20.6 g/500mL0.6g/500mL0.1g/500mLC液：H3BO30.286g/100mLMnCl24H2O0.186g/100mLZnSO47H2ONa2MoO4.2H2OCuSO4. 5 H2OCo(NO3)2.

9、6 H2O0.022g/100mL0.039g/100mL0.008g/100mL0.005g/100mL使用时，每 1000 mL 海水添加 A 液 10 mL，B 液 5mL，C液1mL即可，即用即配，配后海水不能长期保存， 否则营养会失效。配方二（适合一般使用）A：三氯化铁毫克、氯化锰毫克、硼酸毫克、乙二胺四乙酸四钠毫克、磷酸二氢钾毫克、和硼酸钠毫克B ：氯化锌克、氯化钴克、钼酸铵克、和硫酸铜克将 AB倒入 1000 毫升的海水中，再加入适量维生素和即可配成营养液。此营养液要即用即配，不能长期保存。配方三（适合临时添加使用）营养液母液配方： 硝酸钠克、磷酸二氢钾克、柠檬酸铁铵克。将以上营

10、养盐加入 1000 毫升海水中即可。使用时每1000 毫升海水加母液10 毫升。此配方容易使小球藻产生沉淀和白化。配方四（适合有经验的使用）蛋分打出污水经加热冷却后使用或经过1 微米的物理过滤后使用。一般每 1000 毫升海水添加 10 毫升蛋分水（可根据蛋分水的浓度不同作适当的调整）。此配方经济环保， 就是打气容易产生气泡和容易引入有害污染。十、小球藻生长慢、沉淀、发白和突然死亡小球藻在温度过低或过高、 盐度过高、光照过低、 太高或太低、营养盐太低、 二氧化碳太低时 生长和繁殖很慢甚至死亡。 只要保持合适的条件就能保证小球藻的正常生长。小球藻小部分沉淀是正常的， 而大量沉淀一般是密度太高或温度过低，还有就是不小心混入促沉淀的化合物（如搞卫生）。一般应每天搅拌几次和加盖，但不能隔绝空气。小球藻发白一般是营养缺乏，及时适量添加营养液即可。小球藻 突然死亡的原因一般是温度过高 、盐度过高和 pH 值变化太大。特别是夏天，因温度高，部分小球藻死亡，然后死亡的小球藻又使水酸化， 进一步加剧小球藻死亡， 最后造成小球藻突然死亡的表象。故夏天温度高时要降温，并充气。