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1、乙肝病毒DNA检测乙肝病毒DNA指的是脱氧核糖核酸，病毒的复制是靠DNA的复制来完成的，DNA的浓度越高，病毒的复制越活跃。合起来，HBV-DNA指的就是乙肝病毒的脱氧核糖核酸。乙肝病毒DNA检测是判断乙肝病毒复制的常用手段。一般的，把数值大于10的3次方为阳性，把3-5次方认为是低量复制，5-7为中等量，大于7次方为大量。乙肝两对半并不能准确的判断病毒复制情况，DNA弥补了这个的不足。不过由于DNA检测技术要求严格，容易受到干扰，因此，一次结果不足以说明问题，遇到阳性，可以换医院再次检查。目录1DNA检测2作用3临床意义4复制过程 第一步：黏附 第二步:脱壳 第三步：入核 第四步：转录 第五
2、步：翻译 第六步：逆转录 第七步：组装5频率6注意事项7检测方法8检测报告9检测费用10检测要空腹吗11乙肝病毒DNA检测的作用1DNA检测以往乙肝患者抗病毒治疗的指征是：乙肝病毒e抗原阳性（大三阳）患者HBVDNA数值要求达到10的5次方拷贝/毫升（20000U/ml），乙肝病毒e抗原阴性（小三阳）患者乙肝病毒DNA数值要求达到10的4次方拷贝/毫升（2000U/ml），但是10的4次方拷贝/毫升以下也不能认为就没有问题了，最新的国际研究资料表明：和肝脏疾病进展相关的病毒DNA水平域值尚不清楚，即使HBVDNA水平持续低于20000U/ml，也可能乙肝病毒情仍在进一步发展，因此HBVDNA数
3、值应该越低越好，目前国际建议的HBVDNA检测正常值应该是： 50U/ml 。2作用目前，乙肝病毒DNA检测在乙肝检查化验中使用的越来越普遍，可见乙肝病毒DNA检测在乙肝检查化验中占的分量越来越重，这是因为乙肝病毒DNA检测对确诊乙肝和评估乙肝治疗效果具有十分重要的作用。主要表现在以下七个方面：1、了解乙肝病毒在体内存在的数量。2、乙肝病毒是否复制。3、乙肝是否传染，传染性有多强。4、是否有必要服药。5、肝功能异常改变是否由病毒引起。6、判断病人是适合用哪类抗病毒药物。7、判断药物治疗的疗效。3临床意义所以说HBVDNA定量检测指标降低在乙肝治疗中有着非常重要的意义，是乙肝转阴的前奏，也是康复
4、最为关键的一步，只有体内的HBVDNA定量指标降低，病毒的复制繁殖才会停止，乙肝的彻底治愈才有希望。乙肝病毒DNA检测的临床意义一、对医生的诊断和用药非常重要。通过乙肝病毒DNA检测能够判定判断乙肝患者适合用哪类抗病毒药物；乙肝病毒DNA检测对用药的剂量、用药时间、是否需要联合用药以及用药的效果等提供重要的参考依据，也是临床上评价抗病毒或免疫增强药物疗效的最客观的指标。乙肝病毒DNA检测的临床意义二、能够直接反映乙肝病毒复制状态及传染性的最佳指标，通过乙肝病毒DNA的含量能直接反映病毒在体内存在的数量、是否传染，传染性有多强。但是需要说明的一点是：乙肝病毒载量的多少并不代表肝脏的损伤程度，也无
5、法判断病情的严重程度。乙肝病毒DNA检测的临床意义三、反映病毒复制的活跃程度，间接地反映机体的免疫应答水平。4复制过程不同于一个真正的生物体，病毒并不通过生长和分裂等方式繁殖自身，而是像铸造机器零件一样，按照一定的模具拷贝出来的。病毒DNA中包含有一些程序，指导病毒的遗传物质和其它一些结构蛋白组分增殖。另外，病毒DNA中还包含有一些信息，使得单一组分能够在细胞因子的帮助下，自发组装成新的病毒颗粒。在医学上，病毒的繁殖被称之为“复制”，在复制的过程中，有两个很重要的因素：一个是催化剂，另一个是模板。没有这两个因素，乙肝病毒就不能复制。乙肝病毒复制的“催化剂”就是乙肝病毒DNA（即HBV-DNA）
6、聚合酶。没有这种聚合酶的作用，乙肝病毒的复制就会停止。乙肝病毒的基因组（HBV-DNA）是由两条螺旋的DNA 链围成的一个环形结构。其中一条较长负链已经形成完整的环状；另一条长度较短的正链，呈半环状。在感染肝细胞之后，这条半环状的DNA链就会以负链为模板，在催化剂HBV-DNA聚合酶的作用下延长，最终形成完整的环状。这时的乙肝病毒基因组就形成了一个完全环状的双股DNA。把这种DNA称做共价闭合环状DNA（即cccDNA），可以把它看作是病毒复制的原始模板。模板形成后，病毒基因会以其中的一条cccDNA为模板，利用肝细胞基因中的酶和DNA 聚合酶的“催化”，一段基因又一段基因地复制，形成负链和正
7、链。最后再装配到一起形成新的HBV-DNA颗粒。第一步：黏附HBV人侵人体后，依靠其外膜(表面抗原，HBsAg)能粘附在肝细胞膜上，当然，粘附的首要条件是HBsAg先要识别肝细胞膜。一旦粘附成功，HBv的外膜也就完成了它的使命，甩掉了外膜，HBV钻进肝细胞内。第二步:脱壳HBV核心部分来到肝细胞内，在肝细胞浆中还要脱掉它的“核壳”(核心抗原即HBcAG及E抗原即HbEAG)，这样，就暴露出了它最核心部分，即乙肝病毒核酸(HBv DNA)，HBV大有“赤膊上阵”之意。HBV-DNA包涵着乙肝病毒的全部基因，是它主宰着HBv的复制的。第三步：入核HBv-DNA从肝细胞浆内进入肝细胞核，在这里它要进
8、一步发育完善，形成了HBv的“共价闭合环状脱氧核塘核酸”(HBv cccDNA)。这个cccDNA十分了得，它深深藏匿在肝细胞核内，而肝细胞核外面有一层坚韧的核膜，目前所有药物都难以通过这坚韧的核膜，因而对cccDNA也无可奈何，但cccDNA却掌控着HBv所有的遗传信息，指令着HBv的复制。因此现有的药物想彻底消灭人体内的HBv真比登天还难，这些药物只能抑制HBv的繁殖或复制，“全部转阴”也只能是一种幻想。第四步：转录HBV在这一阶段会以cccDNA为“模子”，像录音带似的把HBv cccDNA上的所有信息全都转录到“信息核糖核酸”(mRNA)上。这个转录过程需要人体内的酶类帮忙，因为所有的
9、病毒都不能自己独立生活必须有生物的机体帮忙，才能完成这个转录过程。HBv也是这样。在人体酶类的帮助下完成它的复制环节。第五步：翻译在mRNA上已录取了HBv的所有信息，然后就是“翻译”了，其实就是开始制造病毒蛋白。MRNA通过“翻译”过程，可将HBv的各种蛋白制造出来，如HBv的外膜蛋白(HBsAg)、核壳蛋白(HBeAg、HBcAg)、HBvDNA多聚酶等；至此，HBv的外膜有了，HBv的核壳也有了，这些东西只是零件，飘浮游离着的，还有重要的HBv最核心部分没有“制造”山来。第六步：逆转录啥叫“逆转录”把HBv的遗传信息从DNA转录到RNA上叫做“转录”，是正常的“顺转录”；而将HBv的遗传
10、信息从RNA上再转录到DNA上，就叫做“逆转录”了。那么，HBv的mRNA上的遗传信息最后就转录成了HBV的DNA，这时，HBv的最核心部分(即HBv DNA)也算制造完成。第七步：组装从第五步和第六步的复制看来，HBv的所有零件均已制作完毕，到了第七步也就简单了，把这些零件进行组装，装配妥了，HBv的复制也算大功告成了。HBv就是这样繁殖或复制的。看起来好像挺复杂，其实HBv复制过程是很快的一个复制周期不到48小时。复制出的下一代HBv或侵入另外的健康的肝细胞，或被释放到血液中去，在人们抽血化验时也就被检测到了。5频率无论是大三阳还是小三阳的病人，发现患有乙肝的时候就建议检测HBV DNA。
11、一般来说，病人的具体情况可能会不太一样，如果在一个病毒的活动期，乙肝病毒DNA检测可能需要勤一些，一到两个月就应检测一次，如果是在病毒的耐受期，病情相对比较稳定，可以36个月检测一次。在进行抗病毒治疗的过程中，也是需要定期检测HBV DNA。一般来说至少三个月要检查一次。6注意事项检查注意事项：1、 这个检查与是否进餐没有任何关系,所以如果你只做HBV DNA检查,可以检查前进餐.2 、如果你还要做肝功能检查,建议你在检查前避免进餐,避免熬夜,避免酗酒,避免用药,女性生理期避免做肝功能检查.对于乙肝结果的认识,有这几点注意事项：1、关于单位的换算.最常见的单位是copies/ml,也有重量的单
12、位,比如fg/ml,pg/ml.1 pg = 1000 fg,那么1 pg/ml = 283,000 copies/ml.2、由于PCR的方法虽然精确度高,但是误差相对较大,而且假阳性率也比较高,所以,对于每次乙肝DNA检查的结果,在两个数量级之内的变化,通常会认为没有变化或变化不大.而且DNA也在不断的波动,所以不能以一次或两次的检查结果就简单的判断是否好转,应该综合其它结果以及DNA的变化趋势.3、对于乙肝阴性的标准,我们一般认为是10的3次方,但不能一概而论,应该视化验单上具体给出的参考值而定.阴性最准确的表达方式是,未检测到,化验单表示为参考值copies/ml,并没有具体的数值.4、
13、DNA复制程度的大小并不代表肝脏实际损害的程度,DNA复制程度高,并非就代表损害严重.7检测方法主要有：荧光定量PCR技术、竞争PCR技术、PCR酶联免疫吸附法、荧光标记引物法和PCR酶联化学发光法。临床上最先进的乙肝病毒DNA检测方法是实时荧光定量PCR方法，由于此技术要求较高，目前只有少数大型医院有条件使用实时荧光定量PCR方法。8检测报告1、乙肝病毒DNA检测报告：主要包括定性和定量。2、定性，即确定是阴性还是阳性。乙肝病毒DNA的正常值为阴性，即乙肝病毒DNA1 x 10的3次方拷贝/ml ，这时体内的乙肝病毒复制活跃。4、定量，即检测乙肝病毒在血液中的含量。定量检测结果主要是对抗病毒
14、治疗提供检测和疗效参考。由于结果是数字的，而不是“高/低”、“阴/阳”、“正常/不正常”，所以看起来比较麻烦。确定正常值指标一定要知道所做实验的参考范围。参考范围因检测仪器、方法、试剂的不同而有差异。5、“+”：阳性，体内病毒存在复制。对应于定量方式中HBV-DNA1x10E3 copies/ml。6、“”：阴性，病毒的复制程度低于检测限。对应于定量方式中HBV-DNA1000copies/ml，常提示病毒有复制，而且拷贝数的高低与病毒复制的程度成正相关;若结果阴性，则表明病毒处于不活跃阶段，病情比较平稳。2乙肝病毒DNA检测：判断乙肝病毒传染性强度的重要指标：一般来说如乙肝病毒DNA测定值1
15、000copies/ml，常提示具有传染性，且检测值越高就说明乙肝病毒复制越活跃，传染性越强。3.乙肝病毒DNA检测可为临床治疗提供可靠的依据：乙肝抗病毒治疗的标准为乙肝病毒DNA1000copies/ml，且转氨酶升高超过正常值两倍以上者;对一些肝脏有进行性损害(经肝穿活检证实)、乙肝病毒dna阳性者，即使肝功能正常，必要时也应考虑抗病毒治疗。4.可评价乙肝抗病毒治疗效果的依据：在治疗过程中应定期检测、记录乙肝DNA的检测结果，以作比较，观察抗病毒疗效，如抗病毒治疗3个月或半年，乙肝病毒DNA仍不转阴或下降少于2次方，则提示该药物抗病毒疗效欠佳，可考虑停药或换用其他抗病毒药。5.其他：乙肝病毒DNA检测结果在一定程度上可以辅助判断乙肝病毒是否产生了变异，如在治疗过程中乙肝病毒dna检测结果由阴性转为阳性时，则提示病毒已发生变异，应结合具体病情重新选择抗病毒药物。
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