柑橘黄龙病病原多态性及抗血清的制备与应用

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1、植物检疫专业毕业论文 精品论文 柑橘黄龙病病原多态性及抗血清的制备与应用关键词:柑橘黄龙病 外膜蛋白 病原多态性摘要:本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的

2、条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。正文内容 本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得

3、到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件

4、对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品

5、种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调

6、查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩

7、增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和11

8、60bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化

9、性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在1

10、6S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感

11、染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化

12、DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明

13、他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分

14、析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分D

15、NA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、

16、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pM

17、D18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。本研究应用8个不同地区亚洲种病原DNA片段及16S rDNA经PCR扩增后分别得到长约为563bp和1160bp左右的片段,表明他们在长度上没有明显区别

18、。进一步的SSCP结果显示,不同地区柑橘黄龙病亚洲种病原DNA片段及16SrDNA序列在组成上也没有差异,这说明来自不同地区、不同寄主品种的柑橘黄龙病亚洲种在16S rDNA和及部分DNA片段上没有明显差异。 利用CTAB法从不同地区的感病长春花叶片中获取病原的总DNA,合成含有合适酶切位点的引物,通过PCR方法扩增出特异性目的条带。PCR扩增产物经回收、连接、转化DH5大肠杆菌克隆至pMD18-T载体上,经蓝白斑和氨苄青霉素抗性筛选、PCR和双酶切鉴定,获得了重组质粒pT-HLBOMP,并进行序列测定,应用生物信息学软件对核苷酸、编码蛋白的理化性质、同源性等进行预测分析。 利用传统方法提纯病

19、原,用于免疫家兔制备抗血清。提纯的病原制备的抗血清效价均达到1:12800,工作浓度分别定为1:1600,以上述由病原制备的抗血清抽样调查福建省柑橘黄龙病产区感染情况,经对福建省福州、顺昌、永春等地的柑橘样品检测,各地感染率高达30-50。特别提醒:正文内容由PDF文件转码生成,如您电脑未有相应转换码,则无法显示正文内容,请您下载相应软件,下载地址为 。如还不能显示,可以联系我q q 1627550258 ,提供原格式文档。 垐垯櫃换烫梯葺铑?endstreamendobj2x滌?U閩AZ箾FTP鈦X飼?狛P?燚?琯嫼b?袍*甒?颙嫯?4)=r宵?i?j彺帖B3锝檡骹笪yLrQ#?0鯖l壛枒l

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