第十七章 支原体

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1、第十九章 支原体支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型 微生物。自然界分布广泛,种类多,分为两个属:一为支原体属,有几十个种 另一为脲原体属,仅有一种。与人类感染有关的主要是肺炎支原体和溶脲脲原 体。第一节 概 述一、生物学性状(一)形态与结构支原体的大小为0.20.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的 麻烦。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性。革兰氏染色不易着色, 故常用Giemsa染色法将其染成淡紫色。细胞膜中胆固醇含量较多,约占36%, 对保持细胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于胆固醇的物质(如二性霉素B、 皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使

2、支原体死亡。支原体基因组为一环状以 双链DNA,分子量小(仅有大肠杆菌的五分之一),合成与代谢很有限。肺炎支 原体的一端有一种特殊的顶端结构,能使支原体粘附于呼吸道粘膜上皮细胞表 面,与致病性有关。(二)培养特性 营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加入 1020%人或动物血清以提供支原体所需的胆固醇。最适pH7.88.0之间,低于7.0则死亡,但解脲 脲原体最适PH6.06.5。大多数兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入5%C02生 长更好。生长缓慢,在琼脂含量较少的固体培养基上孵育23天出现典型的“荷 包蛋样”菌落:圆形(直径1016um),核心部分较厚,向下长入培养基,周 边为一层薄的

3、透明颗粒区。此外,支原体还能在鸡胚绒毛尿囊膜或培养细胞中 生长。繁殖方式多样,主要为二分裂繁殖,还有断裂、分枝、出芽等方式,盖 因缺乏细胞壁造成分裂时二个子细胞大小均所致。同时,支原体分裂和其DNA 复制不同步,可形成多核长丝体。(三)生化反应与分型一般能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸,能利用精氨酸的则不能分 解葡萄糖,据此可将支原体分为两类(见表 19-1)。溶脲脲原体不能利用葡萄 糖或精氨酸,但可利用尿素作能源。各种支原体都有特异的表面抗原结构,很少有交叉反应,具有型特异性。 应用生长抑制试验(GIT)、代谢抑制试验(MIT)等可鉴定支原抗原,进行分型。表 19-1 人类支原体的主要生

4、物学性状名称需要胆固醇 分解葡萄糖 分解精氨酸 吸附红细胞肺炎支原体+-+人型支原体+-+-生殖支原体+-穿透支原体+-+溶脲脲原体-(四)抵抗力支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境渗透压敏感,渗透压的突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感,但对 醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。对影响壁合成的抗生素如青霉 素不敏感,但红霉素、四环素、链霉素及氯霉素等作用于支原体核蛋白体的抗 生素,可抑制或影响蛋白质合成,有杀灭支原体的作用。二、致病性与免疫性支原体不侵入机体组织与血液,而是在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞粘附 并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞

5、膜上的脂质与胆固醇造成 膜的损伤,释放神经(外)毒素、磷酸酶及过氧化氢等。巨噬细胞、lgG及lgM对支原体均有一定的杀伤作用。呼吸道粘膜产生的 SlgA 抗体已证明有阻止支原体吸附的作用。在儿童中,致敏淋巴细胞可增强机 体对肺炎支原体的抵抗力。三、支原体与L型细菌的区别L 型细菌是在抗生素、溶菌酶等作用下变成的一种细胞壁缺陷型细菌,其许多特性与支原体相似,在鉴定时很有必要将二者区别开来(见表)。支原体表 19-2 支原体与 L 型细菌的区别L 型细菌自然界中广泛存在自然界很少存在绝大多数生长需胆固醇生长不一定需要胆固醇在一般培养基中稳定大多需高渗培养在遗传上与细菌无关,且无论在什 在遗传上与原

6、菌相关,并可在诱 么条件下也不能变成细菌导因素去除后回复为原菌菌落较小,0.10.3mm菌落稍大,0.51.0mm第二节 主要病原性支原体一、肺炎支原体肺炎支原体是人类支原体肺炎的病原体,引起的肺炎占非细菌性肺炎的 1/2 左右。支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主,有时并发支气管肺炎,称为 原发性非典型性肺炎。主要经飞沫传染,潜伏期23周,发病率以青少年最高。 临床症状较轻,甚至根本无症状,若有也只是头痛、咽痛、发热、咳嗽等一般 的呼吸道症状,但也有个别死亡报道。一年四季均可发生,但多在秋冬时节。肺炎支原体的诊断方法主要依靠分离培养和血清学试验。标本可采可疑病 人的痰或咽试子,接种于含血清或

7、酵母浸膏的琼脂培养基。 510 天后观察有无 直径30100um的圆形房顶样菌落。多次传代后可变为典型的“荷包蛋”样菌 落,并能吸附多种动物红细胞和气管上皮细胞、HeLa细胞等,且此类吸附可被 特异性抗体所抑制。分离的支原体经形态、溶血与生化反应作初步鉴定后需进 一步用特异性抗血清作生长抑制试验和代谢抑制试验。补体结合试验、间接免 疫荧光试验、间接血凝等方法测定抗体只在初次感染时出现阳性。另外,有 1/3 3/4患者的血清可与人0型红细胞在4C时有非特异性凝集(称为“冷凝集试 验”),37C时消失,患病一周时达到高峰。此方法简便,有助于诊断。目前 临床诊断倾向早期寻找抗原。方法如ELISA、P

8、CR等技术。治疗可选用红霉素、四环素和氯霉素等。支原体死疫苗和减毒活疫苗仍在试验中。二、泌尿生殖道感染支原体 引起泌尿生殖道感染的支原体主要有溶脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体 现已被列为性传播性疾病的病原体。在非淋菌性尿道炎(NGU )中,感染率仅次 于衣原体。可引起泌尿生殖道感染,在孕妇可致流产、早产、死胎,或在分娩 时感染新生儿,引起呼吸道感染。此外,溶脲脲原体还可引起不孕症。溶脲脲 原体的分离可用加尿素和酚红的含血清支原体肉汤。肉汤中可加青霉素抑制杂 菌的生长。溶脲脲原体具有尿素酶,可分解尿素产氨,使酚红变红。在固体培 养基上用低倍镜观察,可见有微小的荷包蛋样菌落或颗粒样菌落生长。免疫斑 点试验。治疗用红霉素、四环素、强力霉素等高度敏感的抗生素。

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