TG1感受态细胞说明书

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1、TG1感受态细胞说明书一、简介大肠杆菌经Ca离子处理后可摄取外源DNA (Plasmid、Phage DNA), 处于这种状态的细胞称作感受态细胞(Competent Cells)。在进行基 因重组实验时，使用感受态细胞的转化实验应用十分广泛。制作基因 文库、重组质粒体以及进行亚克隆实验时，特别是在目的基因含量十 分低的情况时，使用高效的感受态细胞十分重要。而TG1菌株常常 用于噬菌体的制备。本公司生产的感受态细胞是采用氯化钙处理得到的感受态细胞，使用 pUC19质粒检测，转化效率可达107-108,在-70C下保存几个月转化 效率不发生改变。二、使用方法(1) 取出感受态细胞，置于冰上5mi

2、n，解冻。(2) 然后将连接体系(510ul)加入感受态中(100ul),轻弹感受态离心管底部，混匀，冰浴30分钟。(3) 将离心管放入42C水浴90秒后，迅速放于冰上。(4) 每管中加500卩1 LB(SOC)培养基(不含抗生素)，37C振荡培养1 小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。(5) 室温4,500rpm离心5分钟，弃去9001上清后，用剩余lOOp! 培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB琼脂平板或含X-gal、IPTG、Amp的LB琼脂平板表面。(6) 将平板置于室温直至液体被吸收。(7) 倒置平皿，于37C培养，1216小时后可出现菌落。三、注意事项1.用此感受态进行转化需要热激，不能电转化，请勿分装。2 .感受态细胞应保存在-70 C,不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。3 .为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化,将损失降到最低。4 所有操作均需注意无菌操作。