转基因水稻讲义转基因抗虫水稻

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1、转基因水稻讲义转基因抗虫水稻 序言：水稻是三大粮食作物之一，世界上近二分之一人口，全部以水稻为主食，它是人类营养和能量摄入最主要的谷物，提供全世界五分之一以上热量消耗。概况：早在上世纪八十年代早期国际水稻生物技术的研发就在洛克斐勒基金的资助下开展。至今在水稻生物技术方面的专利超出三百项，包括四百多个组织和机构。从1993年起，在美洲、欧洲、亚洲和澳洲的很多国家陆续开始了转基因水稻的田间试验。现在，已经有6个转基因水稻品种取得了不一样的同意认可，包括种植、食用、饲用、进口和加工等方面。全球已培育出近50个转基因抗虫水稻品系，大部分均已进入田间试验阶段，鉴于其环境安全性及食品安全性，还未进行商业化

2、种植，除了2021年伊朗同意抗虫转基因水稻的商业化种植。我国转基因水稻关键是华中农业大学张启发院士课题组在研究，其研发的抗虫转基因水稻“华恢1号”和“Bt汕优63”于2021年8月取得农业部转基因生物安全证书，不过现在并没有获批进行商业化种植。除抗虫水稻外，部分药用或耐除草剂水稻陆续被同意进口或商业化应用。1998年起，美国同意Ventra Bioscience企业研发的转溶菌酶，乳铁蛋白、人血清白蛋白基因的3个药用转基因水稻的商业化种植。美国同意安万特企业的转bar基因耐除草剂水稻及先正达企业的黄金大米等。我们组经过上网查找资料、借阅图书馆书籍和问询老师的方法对转基因水稻有了深入的了解，现在

3、和大家一起来揭开转基因水稻的神秘面纱。首先要介绍的是现在人类对转基因水稻研发所能达成的技术水平。技术比较成熟的有以下四种水稻：1、抗虫转基因水稻2、抗除草剂转基因水稻3、抗花粉过敏转基因水稻4、金稻技术还在研发中的水稻关键有抗逆性转基因水稻、高产和优质性状转基因水稻这两种。表格接下来介绍转基因水稻的工艺步骤。我们知道，基因工程包含上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术关键是对外源基因的重组设计，分为以下几步：1、切2、接3、转4、增5、检每一步详细的操作方法会依据供体、受体细胞的不一样而改变，越详细到能够直接指导我们的实际操作的资料信息就越高精尖，现在我们的能力无法理清这些，因此只总结了通常

4、能够选择的几个方法。第一步获取目标基因关键有三种方法，分别是鸟枪法、人工合成法和从文库中获取。鸟枪法：cDNA法：将供体生物细胞的mRNA分离出来，利用反转录酶在体外合成cDNA，并将之克隆在受体细胞内，经过筛选取得含有目标基因编码序列的重组克隆，这就是cDNA法克隆蛋白质编码基因的基础原理。化学合成人工合成法：聚合酶链式反应化学合成：假如目标基因的全序列是已知的，则能够利用化学合成法直接合成。现在已能利用DNA合成仪自动合成不超出50bp任何特定序列的寡聚核苷酸单链。目标基因的化学合成实质上是双链DNA的合成，能够分别直接合成其两条互补链，然后退火即可。对于大片段目标基因的合成，一次合成收率

5、很低，故通常采取单链小片段DNA模板拼接的方法。聚合酶链式反应：PCR扩增技术的本质是依据生物体DNA的复制原理在体外合成DNA。包含三步程序：1、将待扩增双链DNA加热变性，形成单链模板；2、加入两种不一样的单链DNA引物，并分别和两条单链DNA模板退火；3、DNA聚合酶从两个引物的3羟基端根据模板要求合成新生DNA链，组成一轮复制反应。反复上次操作n次，理论上即可从1分子的双链DNA扩增到2的n次方个分子。从文库中获取：基因文库是指某一特定生物体全基因组的克隆集合。基因文库的构建就是将生物体的全基因组分成若干DNA片段，分别和载体DNA在体外拼接成重组分子，然后导入受体细胞中，形成一整套含

6、有该生物体全基因组DNA片段的克隆，并将各克隆中的DNA片段根据其在细胞内染色体上的天然序列进行排序和整理，所以某一生物体的基因文库实质上就是一个基因银行。大家既能够经过基因文库的构建储存和扩增特定生物基因组的全部或部分片段，同时又能够在必需时从基因文库中调出其中的任何DNA片段或目标基因。第二步中，在转基因水稻工艺步骤中关键选取农杆菌Ti质粒作为载体。选定载体后要对其进行改造和构建，通常全部要删除无须要区域，缩小它的相对分子量，同时采取方法避免它的扩散，而且还要删除反复的酶切位点，加入标识基因等。在外源DNA片段和载体分子剪接前，还需要对连接位点做特殊的技术处理，以提升连接效率，全部这些操作

7、均由一系列功效各异的工具酶来完成，其中部分常见的工具酶本身也已使用基因工程方法产生，如部分的限制性核酸内切酶、T4-DNA连接酶和Klewnow DNA聚合酶等。最终的重组质粒的T-DNA区包含T-DNA边界序列、复制原点、突变开启子片段、GUS汇报基因、抗性基因。第三步中，以经过改造的农杆菌Ti质粒为载体，经过寄主感染受体植物的路径将外源基因转入受体细胞。Ps:利用农杆菌感染植物细胞关键是依据它在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物和裸子植物的受伤部位的性质，然而起初这种方法只被用于双子叶植物中，这是因为单子叶植物如水稻，对农杆菌并不敏感，所以，利用它感染水稻时，我们要人为添加乙酰丁香酮，

8、驱使农杆菌移向受伤细胞。通常选取叶盘法进行转化。第四步就是短时间培养转化细胞，以扩增DNA重组分子使其整合到受体细胞的基因组中。第五步，是筛选和判定经转化处理的细胞，跟踪目标基因在转基因植物中的行为。关键是对汇报基因、外源DNA及其在转录水平上的表示、外源表示蛋白的检测。汇报基因因为其表示产物易于检测，在这里不赘述。对外源DNA的检测：点杂交、Southern杂交和PCR判定法点杂交是将提取DNA或RNA不经酶切,直接点到硝酸纤维膜或尼龙膜上和探针进行杂交的技术。利用点杂交,能够初步判定转化体中是否有整和的外源基因。罗云波用DNA、RNA的点杂交技术对转基因植株进行判定,取得和田间表现一致的结

9、果。但点杂交的特异性差,阳性植株还需深入作Southern杂交验证。Southern杂交是将经酶切DNA转移到杂交膜上和探针杂交的技术。利用Southern杂交,能够确定外源基因在植物中的组织结构、外源DNA整和的位置及拷贝数、转基因植株F1世代外源基因的稳定性。研究发觉,整合到植物基因组中的外源基因多以单拷贝形式存在,也有的是多拷贝的。Kitisvi的研究表明,整合到番茄基因组中的外源基因以14个拷贝出现,且整合到单一位点上,未发觉转基因番茄表型的显著差异。在其它的研究中也发觉外源基因以多拷贝的形式存在,通常在15拷贝之间变动,偶然也有2050拷贝。然而,多拷贝的转基因对植物来讲是不利的,它

10、们可能经过异源配对,引发染色体构的改变,从而造成转基因的失活,也可能经过转录调控而引发转基因的失活。通常来讲,直接转基因法往往采取大量的DNA拷贝,轻易取得较高百分比的多拷贝转基因植株,而农杆菌介导的TDNA转移出现多拷贝转基因植株的百分比相对较低。Southern杂交可清除操作过程中的污染,和转化愈伤胞间质粒残留所引发的假阳性信号,正确度高。但Southern杂交程序复杂,成本高,且对试验技术条件要求较高。PCR是在体外快速特异地扩增目标基因DNA片段的有效方法。能在几小时内使pg水平的起始物达成ng乃至g水平,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色后很轻易观察,不经过杂交分析就能够判定出基

11、因组中的部分次序。这项技术可用于转化后外源基因的判定和植物基因组的分析。武长剑等用PCR技术检测出转基因水稻中基因和抗除草剂基因的存在。应用PCR法检测易出现假阳性,可用PCR-Southern杂交深入验证。有时Northern杂交的信号弱,可用RT-PCR,将RNA反转录成cDNA,再和探针杂交,从而检测外源基因的表示7。利用RAPD-PCR技术,能够检测出对照植株和转化植株带型差异,还可用该技术检测不一样代植株间基因组的稳定性及后代的分离。和Southern分析相比,PCR检测DNA用量少,操作简单,成本低,不需同位素即可完成。另外,PCR还能检测目标基因的完整性。但PCR检测也存在缺点,

12、DNA插入植物基因组后易发生重排,即使载体上的抗性基因能表示,目标基因也未必完整地存在于转化体中,从而造成检测结果的误差。检测基因在转录水平上的表示：Northern杂交：是将试材RNA和探针杂交的技术,用于检测基因在转录水平上的表示。Northern杂交的关键原理是把变性RNA转移和固定在特定的薄膜上,用特定的DNA探针来检测RNA。Northern杂交和Southern杂交相比,更靠近于性状表现,更有现实意义,被广泛用于转基因植株的检测。但RNA提取条件严格,在材料内含量不如DNA高,不适于大批量样品的检测。对外源表示蛋白的检测：Western杂交技术：是将蛋白质从SDSPAGE胶中电转移

13、至固相支持体上,然后对固定化蛋白质进行免疫学测定的方法。Western杂交灵敏度极高,能达成标准的固定相放射免疫水平。能够测出粗蛋白提取物中小于50ng抗原,在较纯的制剂中,可测出15ng抗原。Western杂交检测目标基因在翻译水平的表示结果,能直接显示目标基因在转化体中是否经过转录、翻译最终合成蛋白而影响植株的性状表现。通常来讲,Western杂交的结果和性状表现有直接关系。Southern、Northern、Western杂交分别从整合、转录、翻译水平检测外源基因的行为,说服力强。这些技术需要转膜、杂交,操作繁琐,费用高,不适合大批量样品的检测,可对转基因植株随机取样检测。Souther

14、n杂交特异性强,现在,对转基因植株中基因的存在、整合及稳定性通常全部要经过Southern杂交来确定,是检测外源基因的最可靠的方法。Westhern杂交灵敏度高,能检测出蛋白质表示量,最含有现实意义。在实际工作中,研究者多把几个方法结合利用,以取得外源基因不一样表示水平的信息。下游技术中，首先要对水稻愈伤组织进行诱导。方法以下：以水稻幼胚为试材诱导愈伤组织1消毒：取水稻未成熟种子，按以下步骤消毒：1 用自来水冲洗种子，去掉浮起的瘪谷；2 将种子放入250ml无菌烧杯中，用200ml 70%酒精消毒2分钟；3 加入250ml 25%次氯酸钠溶液，同时加数滴吐温-20，浸泡90分钟； 4 倒去Na

15、ClO溶液，用无菌蒸馏水清洗种子4-5遍。2诱导和继代培养：1 用镊子夹住种子，在无菌滤纸上用钢钩挤出幼胚，置入诱导培养基中；2 操作完成后封好培养皿，在暗处适温下培养5天；3 继代培养。用镊子剥下胚性愈伤组织，置入继代培养基中，暗处适温下培养3天。以水稻成熟胚为试材诱导愈伤组织1.消毒：取水稻成熟种子，人工或机械脱壳，挑选饱满光洁无菌斑的种子，按以下步骤消毒：1 将种子放入100ml无菌烧杯中，倒入70%酒精消毒2分钟；2 倒去酒精，加入100ml 20%次氯酸钠溶液，浸泡30分钟； 3) 倒去次氯酸钠溶液，用无菌蒸馏水清洗种子4-5遍，最终一遍浸泡30分钟。 2诱导和继代培养：2诱导和继代

16、培养：1 种子放在无菌滤纸上吸干，置入成就胚诱导培养基中，每皿1214颗；2 操作完成用封口膜封好培养皿，在28光照培养箱，培养3周；3 在超净工作台上打开培养皿，用镊子挑取自然分裂的胚性愈伤组织，置入继代培养基中，在28光照培养箱，继代培养1周。1、 挑取农杆菌单克隆或吸收所保藏的农杆菌菌液100l于4ml YEP培养液中，28，250rpm振荡培养20-36h至菌液OD600为。2、感菌和共培养：1 取培养好的菌液500l于离心管中，4，4000rmp，离心2min，去上清。用含200umol/l As的30ml AAM感菌液制成悬浮液，使菌液OD600的终浓度为；2 将长到一定大小的水稻

17、愈伤组织挑出，放入农杆菌悬浮液侵染5分钟；3 将愈伤组织取出，置于无菌的滤纸上沥干30-40分钟；4 将愈伤组织置于共培养基上。25暗培养天；5 将愈伤组织取出，用无菌水清洗5-6次，其间需不停的振荡。再用含500mg/l头孢拉定的无菌水清洗12遍。最终置于无菌滤纸上沥干2小时；6 将晾干的愈伤转入含500mg/l头孢拉定和50mg/l潮霉素的选择培养基上进行第一轮选择，28，光照培养14天；7 将长有抗性愈伤的初始愈伤转到含500mg/l头孢拉定和50mg/l潮霉素的培养基上进行第二轮选择，28，光照培养，直到颗粒性的抗性愈伤组织长出。3、抗性愈伤组织的预分化将新长出的抗性愈伤组织转入预分化

18、培养基中，25，光照培养7天。4、抗性愈伤组织的诱导分化和生根挑取从同一愈伤来的颜色鲜黄的抗性愈伤3-4颗，移入装有分化培养基的培养皿或塑料广口瓶中，用封口膜封好，放入恒温培养室中，等候分化成苗。待苗长至1cm左右，放入生根培养基中壮苗。5、转基因苗的锻炼和移栽转基因苗从分化到移栽最短时间为两个月左右。将苗根部和茎叶分化得较完好的试管挑出，打开封口膜，加入适量蒸馏水或无菌水，炼苗3天至一周左右，然后洗去琼脂，移栽到温室的土钵中生长，检测。转基因水稻的利和弊因为利全部是现象级的，不管我们对转基因技术是否了解，也全部知道转基因技术的多个大致优势。利：1、对健康有保障。将抗虫基因转入到植物体内表示，

19、这么就能够大大的降低农药的使用量。农药残留对人体有绝正确伤害这已经是不争的事实了，而转基因处理了这一问题。再比如，抗虫的转基因玉米不会被虫咬，就会降低玉米身上的伤口，部分有害的微生物就不能去侵犯它，这就降低了微生物侵害的几率，对我们的健康是一个保障。即使转基因有潜在的未知的危害，但她确实处理了已然存在危害原因。2、合成人体不能合成的营养物质。这就相当于是营养品了。和非转基因相比，有部分转基因食品，尤其是未来部分转基因食品，增加了部分我们所需要的营养素。这些营养素很多是我们身体不能本身合成的，对我们大有好处。3、降低对土壤肥力的要求。转基因对土壤肥料的要求大大降低了，从而也降低了化肥的使用量，这

20、既保护了土壤环境，维持了土壤微生物生存的合理环境，同时也能够实现在环境恶劣的地域栽种谷物，增加了土地的利用率。弊：因为存在太多不确定的原因，因此有关转基因的负面猜测则显著多于其带来的好处。1、因为抗虫植物是对付虫子的，那么虫子吃了全部会死，那人还能吃吗？对于入口的东西，大家往往会慎之又慎，转基因食品，一般人对它了解还极为有限，它有毒吗？其实，要造成人体中毒，首先人要有毒蛋白的受体。举个简单的例子，毒蛇咬了我们一口，我们可能有生命危险，这是因为我们有这种毒蛋白的受体。自然界中，有很多动物，蛇咬了不死，和蛇能和平共处，因为它们没有蛇毒蛋白受体。而现在转基因食品中转的比较多的是一个抗虫蛋白的基因，这

21、种基因翻译出来的蛋白在昆虫内有受体，因此会造成昆虫死亡，但其在人体没有受体，对人体没有作用。另外，致毒的东西，没有足够的致毒量对人体也是安全的。不过，这只是一次一般的毒理学试验，就是说她只是说将这种蛋白，如Bt蛋白，注射到体内看机体会发生什么反应。因为我们吃东西是经过消化道的，而不是靠注射，因此从一定程度上看这是一个无聊的试验，不含有任何说服力。而毒蛋白，如Bt蛋白，经过消化道的消化成小分子氨基酸才能被吸收，而小分子氨基酸则是生物界共有的物质，无任何异同。就算Bt蛋白不被吸收那么它在胃液的极酸条件下也会失活的，而不会对人体有任何危害。可这只是问题的表面。认为你是将一段本不属于自己的基因转移到了

22、自己的基因组中去了，那就改变了基因的环境，就是说会对其它基因的正常表示会产生未知的影响，可能会激活一些本不该在某阶段表示的基因，或抑制一些基因的表示。这么，即使细胞中的全部物质全部是有基因合成蛋白质开始的，不过在随即的一系列生理生化反应中，某个被影响的基因会对氨基酸的转化会产生什么影响呢？会产生某种糖类物质或脂类物质，或某种物质过量合成或合成不足。我们知道细胞癌变。不是一朝一夕的事，是长久的理化原因或生理病理原因长久积累的结果。同理，蛋白质会被消化，那糖类呢，有时候糖类不会被消化就能够直接被吸收，还有物质过量表示会对细胞的正常生长产生错误的调控。据报道，科学家研究发觉，有些转基因生物产品可能含

23、有有毒物质和过敏源，会对人体健康产生不利影响，严重的甚至能够致癌或造成一些遗传疾病。尽管到现在为止还没有有说服力的研究汇报表明这些改良品种有毒，但部分研究学者认为，对于基因的人工提炼和添加，可能在达成一些大家想达成的效果的同时，也增加和积聚了食物中原有的微量毒素。这种毒素的积累是个相当长的过程，但它确实可能正在进行中，所以现在谁也不能确保这些改良品种没有毒。英国科学家普斯陶教授的研究汇报说，经过基因改造的马铃薯对试验老鼠的肝、胃和免疫系统全部会造成伤害。即使她的试验结果有待于深入证实，但仍可提醒大家转基因食品可能有损于人类的健康。这个问题估量各类教授应该也想到了，不过，这个问题何其复杂，现在的

24、科技手段还无法完成相关测定。2、转基因食品对人体的长久影响。上面说到了，基因组环境的改变会影响其它基因的表示，假如是在某个时期不该表示某种基因此那种基因却表示了，或反过来说。比如，抑制了控制生长的基因的表示，那么机体的生长就受到极大的干扰，早熟、衰老等等。3、基因转移对植物机体及生态影响的试验。有些作物插入抗虫或抗真菌的基因可能对其它非目标生物起到作用，从而杀死了环境中有益的昆虫和真菌。有科学家在试验室里做了这么一组对照试验，用抗虫转基因的玉米分别饲喂玉米钻心虫和草蛉，试验结果表明，在钻心虫的死亡率高达60的同时，草蛉的成熟期也比正常时间晚了3天。草蛉是一个益虫，被农民大量繁殖以防治棉铃虫和蚜

25、虫等农业虫害。这个试验证实，抗虫转基因玉米没有识别益虫和害虫的能力，它在毒杀害虫的同时，也损害了益虫。若大规模地种植抗虫作物可能意味着降低有益昆虫的种群。英国的自然杂志1999年5月发表了美国康奈尔大学副教授约翰?罗西的一篇论文，引发世界关注。该文说，抗虫害转基因“BT玉米”的花粉含有毒素，蝴蝶幼虫啃食撒有这种花粉的菜叶后会发育不良，死亡率尤其高。科学家认为，植入BT基因使玉米能够产生杀伤害虫的物质，从而含有抗虫害能力，但也所以而有了毒性，可能对生态环境造成不利影响。有研究者认为外来基因会以一个大家现在还不甚了解的方法破坏食物中的营养成份。美国伦理和毒性中心的试验汇报则说，和通常大豆相比，耐除

26、草剂的转基因大豆中，防癌的成份异黄酮降低了。大量的转基因生物进入自然界后很可能会和野生物种杂交，造成基因污染，从而影响到生物多样性的保护和连续利用，这种污染对环境及生态系统造成的危害比其它任何原因对环境造成的污染全部难以消除。比如：抵御除莠剂的转基因油菜会使野生芥菜受到传染，从而使野生芥菜对除杂草方法不敏感。中科院海洋所硕士生的一篇论文有关转基因，提到可引发水产动物肌体炎症。检测则发觉已经侵入到了罗非鱼肌体内部，7周后则造成罗非鱼肌体内部产生炎症！研究显示，在罗非鱼心脏、肝脏、肠、胃、卵巢、精巢、脑、鳃丝、脾脏、胆囊、肌肉等不一样部位的DNA中全部能检测到外源基因的存在。该研究还指出，采取巢式

27、PCR检测方法对市场上的豆制品进行检测，结果发觉，市场上有%的豆制品被检测出含有转基因成份。另外，依据中科院网站的报道称，由海洋生物技术研究和开发中心刘梅、王雷等负担的青岛市科技发展项目“转基因作物检测及安全性评价方法的研究”经过验收和结果判定。从结果的内容判定，该结果的关键内容和这篇硕士论文的关键研究内容很一致。报道指出，该项目首次研究了转基因大豆对罗非鱼生理生化指标的影响、转基因大豆中外源基因在罗非鱼各组织中的分布和外源基因在养殖水体微生物间的漂流。判定委员一致认为，研究结果总体达成国际优秀水平。 市场上有%的豆制品被检测出含有转基因成份。我们一直想搞清楚，市场上的大豆有多少是转基因的，也

28、在全国30个省会城市购置了大豆样品，但因检验费用问题，至今中国试验没有做。有些人曾问过中粮集团的领导，她们说市场上的大豆没有转基因的，转基因大豆全部用了榨油了。那么，市场上豆制品转基因成份哪里来呢？湖南师大的一篇硕士研究论文披露：用张启发的Bt汕优63转基因水稻进行小鼠喂养试验，仅仅进行了90天的试验，小鼠的肠腺细胞就出现了病变增生。其研究和英国普兹泰教授的研究结果一致，全部证实转基因食物有害健康。英国普兹泰教授在电视上公开期望大家不要当小白鼠后饭碗被砸了；而湖南师大硕士把试验结论定性为“基础上是安全的”恐怕是不得已而为之，因为在现在大力推行转基因主粮这么一个大的气氛下，如把结论定性为不安全的

29、话怕是连硕士学位全部拿不到！不然根据试验的真实情况，既然出现了小鼠病变，本应该定性为“不安全”才对。 另外，这篇论文还指出了Bt63转基因水稻还含有潜在的过敏源。我们对转基因水稻只是略知皮毛，甚至能够说因为没有深入研究和试验，对其的了解愈加偏于字面意思，因此作为生物工程专业的学生，我们愈加不能不负责任地、轻易地、想当然地对其进行评价。我们小组在网上摘取了部分于专业人士而且令我们以为较有道理的想法：令人不能忽略的现实状况是，当国外反对转基因食品的运动已经进行得如火如荼之时，就其安全问题已经争得面红耳赤的时候，中国的大多数消费者尚没有明白过来“转基因”为何物。所以应加大宣传力度，让国人了解转基因食

30、品，立即建立中国的生物安全法。未来不管是中国人还是外国人在中国境内进行相关转基因食品方面的研究、开发、生产、销售能够有法可依，科学有序，避免美国和加拿大“先发展、后治理”的恶果。严禁外国企业随便在中国境内进行危险的试验，销售没有经过安全检验的转基因食品。不然可能未见其利，先受其害，甚至得不偿失。中国消费者权益保护法也明确要求，消费者应该对商品有知情权。现在，国外已经普遍采取了在转基因食品上粘贴标签的作法，而中国尚没有要求在转基因食品上打标识的要求，这不符合消费者知情的标准。让消费者充足了解和认识转基因食品，不但仅是保护了消费者的正当权益，同时也有利于转基因食品的健康发展。以上弊处也正是我们必需

31、对转基因水稻进行检测盒安全性评价的原因。下面来谈一下转基因水稻的检测。笔者认为这一步和前面基因工程技术中的第三步不一样，难度更大，我们能够试想，给我们一袋大米，让我们去判定它有没有转基因，那么我们首先要提取DNA，通常提取水稻DNA全部是用水稻叶片，而检测商品大米时，大米所对应的水稻叶片早已“尘归大地”，根本就拿不到水稻DNA，那该怎么办呢？依据2021年5月9日晚，中国农业科学院油料作物研究所副研究员吴刚来华中农大作出的有关“转基因水稻判定和检测方法探索”的学术汇报，我们知道了从欧盟要求中国提供出口作物的转基因检测到我国转基因水稻TT51-1热门事件，全部要求国家建立相关检测转基因作物的方法和标准，但一开始提取大米DNA时就碰到很大麻烦，为处理这一难题，她们查询多种文件，在试验中探索，最终拿到水稻DNA。当然她们面临的困难远不止这些，然而她们不畏坎坷，最终建立起一套定性和定量检测转基因作物的方法及标准，为国家做出了贡献。她们建立的检测方法及标准到底是什么？我们没有查到，然而这激发了我们很大的爱好，我们相信，在以后的深入学习中我们还会逐步了解到。任何的工艺全部离不开设备，我们在中国采招网上看到了一份2021年浙江省成套招标代理有限企业有关中国水稻研究所转基因水稻环境安全评价和检测技术中心科研仪器设备的公开招标公告。釆招仪器以下：最终，总结一下做此次课题的心得体会。