表面等离子共振技术在相互作用研究中的应用

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1、Analyzing Biomolecular Interactions 熊熊 玉玉 翠翠生物分子互作技术生物分子互作技术(Biomolecular Interaction Analysis)是基于是基于SPR(Surface Plasmon Resonance)原理的新原理的新型生物传感分析技术。传统的检测生物分子间相互作用的型生物传感分析技术。传统的检测生物分子间相互作用的探针分子和目标分子亲和常数的方法如平衡透析法、光谱探针分子和目标分子亲和常数的方法如平衡透析法、光谱测量法、热量测定法、脱氧核糖核酸酶足迹法等,大多需测量法、热量测定法、脱氧核糖核酸酶足迹法等,大多需要荧光标记或放射性标记

2、。本文将介绍一种应用要荧光标记或放射性标记。本文将介绍一种应用SPR(Surface Plasmon Resonance)原理检测生物传感芯片)原理检测生物传感芯片(biosensor chip)上配位体与分析物作用的一种新技术。上配位体与分析物作用的一种新技术。SPR是是在不需使用荧光或同位素标记甚至无须纯化各种在不需使用荧光或同位素标记甚至无须纯化各种生物组分的天然条件下,通过传感器芯片实时监测各类生物组分的天然条件下,通过传感器芯片实时监测各类生物分子如多肽、蛋白质、寡核苷酸、寡聚糖、脂类甚生物分子如多肽、蛋白质、寡核苷酸、寡聚糖、脂类甚至全病毒、细胞之间相互作用的整个过程,并通过分析至

3、全病毒、细胞之间相互作用的整个过程,并通过分析软件获取生物分子结合软件获取生物分子结合/解离、亲和性解离、亲和性/特异性、协同特异性、协同/拮拮抗、反应速率抗、反应速率/浓度变化等互作动力学参数。浓度变化等互作动力学参数。Krestschmann棱镜型棱镜型金属膜金属膜反射率高反射率高化学稳定性好化学稳定性好50-100nm金属膜直接吸附法金属膜直接吸附法共价连接法(生物素共价连接法(生物素-亲和素、葡聚糖亲和素、葡聚糖凝胶、水凝胶、高分子膜、多肽等)凝胶、水凝胶、高分子膜、多肽等)单分子复合膜法单分子复合膜法分子印膜技术分子印膜技术分子敏感膜分子敏感膜Sensor chip 金属膜金属膜 分

4、子敏感膜分子敏感膜SPR是一种物理光学现象。是一种物理光学现象。在发生全反射的界面涂上在发生全反射的界面涂上一薄层金膜(或其它金属一薄层金膜(或其它金属膜),由于金膜中有自由膜),由于金膜中有自由电子,它们并不是静止不电子,它们并不是静止不动而是不停在平衡位置附动而是不停在平衡位置附近振动,并具有一定的频近振动,并具有一定的频率。当光由另一侧以大于率。当光由另一侧以大于临界角入射到金膜的界面,临界角入射到金膜的界面,由于入射光会在界面方向由于入射光会在界面方向有一分量,当这一分量与有一分量,当这一分量与金膜中电子振荡频率相同金膜中电子振荡频率相同时,二者将发生共振时,二者将发生共振,界界面处的

5、全反射条件将被破面处的全反射条件将被破坏坏,呈现衰减全反射现象,呈现衰减全反射现象,入射光被金属表面电子吸入射光被金属表面电子吸收收,使反射光能量急剧下使反射光能量急剧下降降当入射光波长固定时,当入射光波长固定时,反射光强度是入射角的反射光强度是入射角的函数,其中反射光强度函数,其中反射光强度最低时所对应的入射角最低时所对应的入射角称 为称 为 共 振 角(共 振 角(S P R angle)SPR对附着在金属薄膜表面的对附着在金属薄膜表面的非常敏感非常敏感,当表面当表面介质的属性改变或者附着量改变时,介质的属性改变或者附着量改变时,将不同。因此将不同。因此,SPR谱(共振角的变化谱(共振角的

6、变化vs时间)能够反映与金属膜表面接触时间)能够反映与金属膜表面接触的体系的变化的体系的变化。P moleculesT moleculesmolecule increasedissociatesassociation与传统的相互作用技术如超速离心,荧光法,热量测与传统的相互作用技术如超速离心,荧光法,热量测定法等相比,定法等相比,SPR生物传感器具有如下显著特点:生物传感器具有如下显著特点:实时检测实时检测,能动态地监测生物分子相互作用的全过程;能动态地监测生物分子相互作用的全过程;无需标记样品,保持了分子活性;无需标记样品,保持了分子活性;样品需要极少,一般一个表面仅需要样品需要极少,一般一

7、个表面仅需要1毫克蛋白;毫克蛋白;检测过程方便快捷,灵敏度高;检测过程方便快捷,灵敏度高;应用范围非常广泛;应用范围非常广泛;高通量,高质量的分析数据;高通量,高质量的分析数据;由于由于SPR基于对未穿透样品的反射光的测量基于对未穿透样品的反射光的测量,所以能在混所以能在混浊的甚至不透明的样品中进行浊的甚至不透明的样品中进行.SPR在生物化学、免疫学、微生物检测、药在生物化学、免疫学、微生物检测、药物筛选及研发、环境污染的控制、医学诊物筛选及研发、环境污染的控制、医学诊断、食品及药物检测、工业遥感等方面都断、食品及药物检测、工业遥感等方面都有广泛的应用。有广泛的应用。随着随着SPR技术成为科研

8、中的一个不可缺少技术成为科研中的一个不可缺少的部分的部分,SPR生物传感器的应用将更加趋向生物传感器的应用将更加趋向多样化多样化,特别是它在小分子检测和脂膜领域特别是它在小分子检测和脂膜领域的新兴应用将使其在未来的药物发现和膜的新兴应用将使其在未来的药物发现和膜生物学中扮演一个越来越重要的角色。生物学中扮演一个越来越重要的角色。在这种技术的推动下,新的科研技术和手在这种技术的推动下,新的科研技术和手段会不断涌现。段会不断涌现。Thank You!9、静夜四无邻,荒居旧业贫。22.8.1422.8.14Sunday,August 14,202210、雨中黄叶树,灯下白头人。8:58:418:58

9、:418:588/14/2022 8:58:41 AM11、以我独沈久,愧君相见频。22.8.148:58:418:58Aug-2214-Aug-2212、故人江海别,几度隔山川。8:58:418:58:418:58Sunday,August 14,202213、乍见翻疑梦,相悲各问年。22.8.1422.8.148:58:418:58:41August 14,202214、他乡生白发,旧国见青山。2022年8月14日星期日上午8时58分41秒8:58:4122.8.1415、比不了得就不比,得不到的就不要。2022年8月上午8时58分22.8.148:58August 14,202216、行

10、动出成果,工作出财富。2022年8月14日星期日8时58分41秒8:58:4114 August 202217、做前,能够环视四周;做时,你只能或者最好沿着以脚为起点的射线向前。上午8时58分41秒上午8时58分8:58:4122.8.149、没有失败,只有暂时停止成功!。22.8.1422.8.14Sunday,August 14,202210、很多事情努力了未必有结果,但是不努力却什么改变也没有。8:58:418:58:418:588/14/2022 8:58:41 AM11、成功就是日复一日那一点点小小努力的积累。22.8.148:58:418:58Aug-2214-Aug-2212、世

11、间成事,不求其绝对圆满,留一份不足,可得无限完美。8:58:418:58:418:58Sunday,August 14,202213、不知香积寺,数里入云峰。22.8.1422.8.148:58:418:58:41August 14,202214、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。2022年8月14日星期日上午8时58分41秒8:58:4122.8.1415、楚塞三湘接,荆门九派通。2022年8月上午8时58分22.8.148:58August 14,202216、少年十五二十时,步行夺得胡马骑。2022年8月14日星期日8时58分41秒8:58:4114 August 2022

12、17、空山新雨后,天气晚来秋。上午8时58分41秒上午8时58分8:58:4122.8.149、杨柳散和风,青山澹吾虑。22.8.1422.8.14Sunday,August 14,202210、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。8:58:418:58:418:588/14/2022 8:58:41 AM11、越是没有本领的就越加自命不凡。22.8.148:58:418:58Aug-2214-Aug-2212、越是无能的人,越喜欢挑剔别人的错儿。8:58:418:58:418:58Sunday,August 14,202213、知人者智,自知者明。胜人者有力,自胜者强。22.8.1422.

13、8.148:58:418:58:41August 14,202214、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。2022年8月14日星期日上午8时58分41秒8:58:4122.8.1415、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。2022年8月上午8时58分22.8.148:58August 14,202216、业余生活要有意义,不要越轨。2022年8月14日星期日8时58分41秒8:58:4114 August 202217、一个人即使已登上顶峰,也仍要自强不息。上午8时58分41秒上午8时58分8:58:4122.8.14MOMODA POWERPOINTLorem ipsum dolor sit amet,consectetur adipiscing elit.Fusce id urna blandit,eleifend nulla ac,fringilla purus.Nulla iaculis tempor felis ut cursus.感 谢 您 的 下 载 观 看感 谢 您 的 下 载 观 看专家告诉

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