药理学实验方案

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1、药理学实验方案药理实验设计I设计人：2011级药学一班 张礼杰 2011515010 信盼 2011515024 陈茂琴 2011515026 何朵朵 2011515028 药学四班 杨 森 20115151 01 冯 禹 2011515110 王同月 2011515102元胡止痛片中抗炎和镇痛作用研究1. 实验目的：探讨元胡止痛片的镇痛和抗炎作用IIIl=j2. 实验原理:元胡止痛片收载于元胡止痛片收 载于中国药典是由元胡、白芷两味药组成 的中药复方制剂为行气活血止痛剂临床用于 治疗气滞血瘀胃痛、胁痛、头痛及月经痛等症 疗效确切。本实验是为验证元胡止痛片的镇痛 和抗炎作用进行验证。实验对四川

2、禾邦阳光制 药厂家生产元胡止痛片不同剂量进行了药效 学研究采用小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法和耳 肿胀法实验分别测定小鼠扭体反应抑制率、小 鼠痛阂值提高率和肿胀率从而确定不同剂量 的镇痛和抗炎作用效果。在基础医学研究中筛选镇痛药的常用致 痛方法概括有物理法（热、电、机械）和化学 法。动物的疼痛反应常表现出嘶叫、舔足、翘 尾、蹦跳及皮肤、肌肉抽搐。化学法，即将某 些化学物质，如强酸、强碱、钾离子、缓激肽 等，涂布于动物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射损伤物质引起受试动物腹痛，动物表现出“扭体反应”（即腹部内凹、躯干与 后肢伸张、臀部高起）。l=j3. 实验方法：使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳 肿

3、胀法，并分别建立小鼠疼痛和炎症模型，灌 胃给予不同剂量元胡止痛片配成的溶液，观察 对动物的镇痛和抗炎作用。4. 实验过程：1.内容4.1药品与试剂元胡止痛片：四川禾邦阳光制药股份有限公司， 国药准字z51021658，规格：片芯重0.25g，12 片阿司匹林：浙江金华市第三制药厂，国药准字: H13023716,临用前用蒸馏水配制为适当浓度 的混悬液。4.2动物：健康昆明种小白鼠，雌性，32只1=III4.3器材：数控超级恒温槽，烧杯、1ml注射 器、电子秤4.4分组：l=j空白对照组（灌胃0.9%生理盐水10 mL/kg） 元胡止痛片高、低剂量组（0.2, 0.4mg / 10g）阳性药阿司

4、匹林对照组（灌胃阿司匹林0. 4 g/kg）4.5人和动物剂量换算公式小白鼠二人 0.0026 /g202方法（1）热板法1. 动物筛选：致痛潜伏期（痛阈值）为530s 之间的合格雌性小鼠。32只，热板法镇痛试验 筛选痛阈值合格的小鼠，取早小鼠于给药前先 用热板仪于55 0. 5 C分别测定每只小鼠 的正常痛阈值将小鼠放于智能热板仪上至出 现舔后足的所需时间作为痛阈值（s），连续2 次，间隔30 s,测定平均值即为正常痛阈值。 将舔后足时间V 5 s或30 s，或跳跃者不用 于此实验2. 器材：数控超级恒温槽，烧杯、1ml注射器、 电子秤、热板仪3. 分组：按体重随机分组，每组8只，各鼠给 药

5、前测定二次正常痛阈值（二次测定间隔1h）,以其平均值为给药前正常值，按4.4分组 给药4. 测定痛阈值：热板法小鼠的镇痛作用参照文献方法，取恒温水浴锅，调节恒温水浴，使 水温恒定在55 + 0. 5C,将500ml烧杯放入其 中，使烧杯底部接触水面。取合格雌性小鼠， 随机分组，按0.2mg/10g灌胃不同药液，测定 给药后15、30、60、90分钟后各鼠痛阈值。5. 痛阈提高百分率按下式计算痛阈提高百分 率表格1药物对小鼠热板法影响记录低浓度组别给药30柄：剂量样本舔足时 间痛阈提 高百分 率生理盐 水组给药90min：组别剂量样本舔足时 间痛阈提 高百分 率生理盐 水组阳性药 物对照 组试验

6、药 物1组 高浓度试验药 物1组 低浓度（2）醋酸扭体法：本实验将0.7%醋酸直接腹 腔注射，刺激腹膜引起持久的疼痛反应，致使 小鼠出现“扭体反应”。镇痛药物可以抑制动物 的“扭体反应”，本法敏感、简便、重复性好。1. 器材：1ml注射器、电子秤2. 药品：元胡止痛片：四川禾邦阳光制药股份 有限公司，国药准字z51021658，规格：片芯重0.25g阿司匹林：浙江金华市第三制药厂，国药准字:H13023716,（临用前用蒸馏水配制为适当浓度的混悬液） 醋酸溶液3. 动物：2025g雄性小白鼠32只4. 随机分组、编号，每组8只，按4.4分组给 药5. 给药1h后，给每只小鼠腹腔注射0. 6%的

7、 醋酸（临用前新鲜配制）每只0. 2 L,6. 观察：5min后记录15分钟内各小鼠出现扭体反应”的次数。表格2药物对小鼠醋酸扭体法影响记录组别剂量样本扭体 次数生理盐 水组阳性药 物对照 组试验药 物组高 浓度 （混合 药物）试验药 物组正 常浓度 （混合 药物）7. 注意事项（1）小鼠体重轻，“扭体反应”次数较低。(2) 室温以20C为宜，低温时，小白鼠扭体 次数减少。(3) 动物的疼痛反应个体差异较大，因此实验 用动物数越多结果越可靠。(3) 耳肿胀法1. 器材：注射器，电子秤，棉签，鼠耳打孔 器，剪刀2. 药品：元胡止痛片：四川禾邦阳光制药股份 有限公司，国药准字z51021658，规

8、格：片芯重0.25g阿司匹林：浙江金华市第三制药厂，国药准字: H13023716,(临用前用蒸馏水配制为适当浓度的混悬液) 二甲苯3. 分组：取小鼠32只，随机分为4组，每组8只：I三4. 给药：分组与给药剂量与4.4相同5. 测量:给小鼠的右耳前后涂上二甲苯0.1ml/ 只，30分钟后处死小鼠，沿耳廓对称剪下两只 耳壳，用6mm打孔器取耳片，以两耳重量差计 算肿胀度。6. 计算肿胀率肿胀率（%）司右耳片重（mg）-左耳片重（mg）/ 左耳片重（mg）X100%肿胀抑制率 =（对照组耳肿率-实验组耳肿 率）/对照组耳肿率*100%参考文献: 1李见春,黄继汉，桂常青,郑青山.元胡止痛 栓镇痛

9、作用的实验研究J.中国临床药理学与 治疗学,2004(04)2唐岚.元胡止痛分散片药学研究J.成都中 医药大学,2002徐叔云(Au FY)，卞如濂(Ban RL)，陈修(Chen X).药理实验方法学.第3版M .北京：人民卫生出版社， 2002. 886, 911, 934, 1408.4杨巧芳，孟庆刚.炎症动物模型探要J. 中华中医药学刊,2008,26(3):5165林定齐非甾体类抗炎药及解热镇痛药用药情况分析J当代医学2012 (02)6刘和莉，李月玲，薛永志；不同温度和醋酸 浓度对小鼠扭体疼痛模型的影响J包头医学院学报2012 (02)清单：元胡止痛片：四川禾邦阳光制药股份有限公司， 国药准字z51021658，规格：片芯重0.25g,12 片阿司匹林：浙江金华市第三制药厂，国药准字: H13023716,临用前用蒸馏水配制为适当浓度 的混悬液。生理盐水二甲苯0.7%醋酸溶液4.2动物：健康昆明种小白鼠，雌性，110只4.3器材：数控超级恒温槽，烧杯、1ml注射 器、电子秤棉签，鼠耳打孔器，剪刀