紫外分光光度法测定维生素A含量
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紫外分光光度法测定维生素 A 含量维生素A (vitaminA )又称视黄醇(其醛衍生物视黄醛)是一个具有 酯环的不饱 和一元醇,包 括维生素 A 1、A2 两种。维生素 A1 和 A2 结构相似)1. 原理 维生素A的异丙醇溶液在325nm波长下有最大吸收峰,吸光度与维生素A的含量 成正比。2. 试剂(1)维生素A标准溶液:同比色法试剂(2)异丙醇。3. 仪器紫外分光光度计。4. 操作方法(1) 样品处理按照三氯化锑比色法进行。(2) 标准曲线绘制分别取维生素 A 标准溶液(每毫升含 10 I.U) 0. Oml, 1. Oml ,2.0ml, 3.0ml, 4.0ml,5.0ml,于 10ml 棕色容量瓶中,用异丙醇定容。以空白液调仪器零点,于紫外分光光度计上在 325nm 波长下分别测定吸光度,绘制标准曲线。(3) 样品经皂化、提取、洗涤、浓缩后,迅速用异丙醇溶解并移入 50ml 容量瓶中,用异丙醇定容,于紫外分光光度计325nm处测定其吸光度,从标准曲线上查出相当的维生素A含量。 5计算维生素 a(I.U / 100g) = a*V/m*100式中a由标准曲线查得维生素A含量(I.U/ml)V样品的异丙醇溶液体积(ml)m样品质量(g)。
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