猪传染性胸膜肺炎

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1、猪传染性胸膜肺炎猪传染性胸膜肺炎Porcine contagious Pleuropneumonia一、猪传染性胸膜肺炎一、猪传染性胸膜肺炎Porcine contagious Porcine contagious PleuropneumoniaPleuropneumonia（一）发生与危害（二）主要临床症状（三）流行病学特点（四）诊断方法及应用（五）疫苗防治（一）猪传染性胸膜肺炎的发生与危害（一）猪传染性胸膜肺炎的发生与危害1.1.由胸膜肺炎放线杆菌（由胸膜肺炎放线杆菌（APPAPP）引起猪的一种高度）引起猪的一种高度接触传染性、致死性呼吸道传染病。接触传染性、致死性呼吸道传染病。2.2.急

2、性和亚急性病例以纤维素性出血性胸膜肺炎、急性和亚急性病例以纤维素性出血性胸膜肺炎、慢性病例以纤维素性坏死性胸膜肺炎为主要特征。慢性病例以纤维素性坏死性胸膜肺炎为主要特征。3.3.曾被称为曾被称为“猪接触性传染性胸膜肺炎猪接触性传染性胸膜肺炎”、“猪嗜猪嗜血杆菌胸膜肺炎血杆菌胸膜肺炎”。4.4.猪呼吸困难，急性死亡猪呼吸困难，急性死亡 最急性型的死亡率可高达最急性型的死亡率可高达80-100%80-100%5.5.慢性耐过猪生长缓慢慢性耐过猪生长缓慢 日增重下降约日增重下降约5-33.6%,5-33.6%,饲料报酬降低约饲料报酬降低约4.6-4.6-25.5%25.5%6.6.耐过种猪由于细菌存

3、在于扁桃体中，成为潜在的耐过种猪由于细菌存在于扁桃体中，成为潜在的传染源，使本病随种猪扩散。传染源，使本病随种猪扩散。7.7.本病易与猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬病、副猪本病易与猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬病、副猪嗜血杆菌病等混合发生，给世界各国的养猪业造嗜血杆菌病等混合发生，给世界各国的养猪业造成了巨大的经济损失，并已成为当前的主要猪病成了巨大的经济损失，并已成为当前的主要猪病之一。之一。8.8.近年来，该病已遍布全球，在欧、美、亚洲等许近年来，该病已遍布全球，在欧、美、亚洲等许多国家和地区均有发生。在美国、加拿大、丹麦多国家和地区均有发生。在美国、加拿大、丹麦和瑞士等主要养猪国家，本病已成为猪

4、的主要传和瑞士等主要养猪国家，本病已成为猪的主要传染病。染病。9.20009.2000、20022002、20042004年分别在澳、美、德国召开年分别在澳、美、德国召开的第的第1616、1717、1818届国际猪病会以及届国际猪病会以及20032003、20052005年分别在韩国、菲律宾召开的第年分别在韩国、菲律宾召开的第1 1、2 2届亚洲猪病届亚洲猪病会上，都设立了猪传染性胸膜肺炎专场研讨会，会上，都设立了猪传染性胸膜肺炎专场研讨会，表明本病已成为国际上猪病研究的热点。表明本病已成为国际上猪病研究的热点。猪传染性胸膜肺炎的世界分布猪传染性胸膜肺炎的世界分布欧洲、欧洲、美洲、澳大利亚、美

5、洲、澳大利亚、亚洲、南非亚洲、南非猪传染性胸膜肺炎在我国的流行和分布猪传染性胸膜肺炎在我国的流行和分布 自自19901990年确诊年确诊猪传染性胸膜肺猪传染性胸膜肺炎以来，本病已炎以来，本病已在我国在我国2020多个省多个省市发生和流行市发生和流行,损损失巨大。失巨大。目前目前APPAPP有有1515个血清型个血清型 外毒素外毒素（RTXRTX）是其主要的毒力因子，其中）是其主要的毒力因子，其中ApxIApxI和和ApxIIApxII毒力最强。毒力最强。所有血清型所有血清型APPAPP均产生均产生ApxIVApxIV且仅在且仅在体内产生体内产生，因此因此ApxIVApxIV可以用于可以用于种特

6、异性诊断及其鉴别诊断。种特异性诊断及其鉴别诊断。RTX toxinsAPP serotypesApxIApxIIApxIIIApxIV11122233344455566677888999101011111112121313141414151515病原：胸膜肺炎放线杆菌病原：胸膜肺炎放线杆菌ActinobacillusActinobacillus pleuropneumoniae pleuropneumoniae,APP,APP我国流行的优势血清型我国流行的优势血清型 “九.五和十.五”期间,我们共检测了全国各地送检的100，000多份猪血清，阳性率为53%左右，有的甚至超过了70%。我们从湖北

7、、湖南、广东、浙江、上海、河南、山东、广西、福建、江西等10个省（市）出现呼吸道症状猪的肺脏中分离到100余株APP，主要流行的血清型主要为1、2和7型。省省 份份流行的主要血清型流行的主要血清型广西、广东广西、广东1、2、3、7型型湖北、湖南湖北、湖南2、3、7、10型型福建、海南福建、海南1、7 型型浙江、上海浙江、上海2、7 型型河南、江西河南、江西1、2、7型型（二）本病主要临床症状（二）本病主要临床症状1.1.APPAPP只感染猪，不同年龄的猪均可感染，但以只感染猪，不同年龄的猪均可感染，但以2 25 5月龄较为易感。月龄较为易感。2.2.主要特征在急性期表现为主要特征在急性期表现为

8、体温升高，严重的呼吸困体温升高，严重的呼吸困难，张口呼吸、呈犬坐姿势，慢性期为阵咳、消瘦。难，张口呼吸、呈犬坐姿势，慢性期为阵咳、消瘦。3.3.本病的发生受外界因素影响很大，一般无明显季节本病的发生受外界因素影响很大，一般无明显季节性，多见于晚秋冬春，气温剧变；潮湿、通风不良、性，多见于晚秋冬春，气温剧变；潮湿、通风不良、饲养密集；管理不善等条件下发生，尤其是在重新饲养密集；管理不善等条件下发生，尤其是在重新组群，增加应激因素时多发。组群，增加应激因素时多发。4.4.发病率视各地的管理系统和所采取的预防措施不同，发病率视各地的管理系统和所采取的预防措施不同，但一般较高，在但一般较高，在8.51

9、008.5100。5.5.死亡率根据环境和菌株毒力不同，可在死亡率根据环境和菌株毒力不同，可在0.40.4100100之间。据近几年各地的发病情况分析，之间。据近几年各地的发病情况分析，哺乳仔猪哺乳仔猪发病率与死亡率均高，而生长育肥猪死亡率并不高，发病率与死亡率均高，而生长育肥猪死亡率并不高，仅略高于正常死亡率。仅略高于正常死亡率。6.6.本病的感染途径是本病的感染途径是呼吸道呼吸道，即通过咳嗽、喷嚏而传，即通过咳嗽、喷嚏而传播。公猪在感染链中可能起一种重要作用。播。公猪在感染链中可能起一种重要作用。7.根据病程可分为最急性、急性、亚急性和慢性4种临床发病形式。1.最急性：突然发病，体温升高到

10、41.5，沉郁、厌食，病猪卧地，无明显呼吸症状。一般12天突然死亡。2.急性：同圈或不同圈许多猪同时发病，体温40.541，沉郁、拒食、咳嗽、呼吸困难，有时张口呼吸，呈犬坐姿势，初为鼻、耳、腿部皮肤，继而全身皮肤发绀，常出现心脏衰竭，病程依据肺部病变或开始治疗时间而不同，可发生死亡，也可能转为亚急性或慢性。3.亚急性或慢性：常由急性转为而成，体温不升高或略有升高，食欲不振，阵咳或间断性咳嗽，增重率降低。在慢性感染群中，常有很多隐性感染猪，当受到其它病原微生物侵害时(如肺炎霉形体、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌)，则临床症状可能加剧。8.剖检病变：剖检主要病变为肺炎和胸膜炎，肺炎大部分为两侧

11、性，涉及心叶及尖叶和部分隔叶，隔叶上的病灶常常是局部的，而且界线分明，肺炎区色暗，坚实、切面脆弱。1.急性：以出血性纤维素性胸膜肺炎为特征，胸腔内有血液样液体。在急性死亡病例、气管和支气管充满泡沫状血样粘性渗出物。2.慢性：以纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征，在大部分慢性病例，大小不同的结节，这些脓肿样结节被一层厚结缔组织膜包裹，有些区域胸膜粘连。在许多病例肺部病变消失，只残留局灶性胸膜粘连。3.在自然病例中常见胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌协同作用混合感染形成复杂的呼吸道病综合征。急性：急性：呼吸困难呼吸困难急性死亡急性死亡心包积液心包积液纤维素性化脓性坏死性胸膜炎、肺炎纤维素性、出血性、坏死

12、性肺炎淋巴结肿大APP血清7型菌接种小鼠的死亡情况2108CFU组2109CFU组6109CFU组APP-1APP-1型（弱毒株型（弱毒株Shope4071)Shope4071)以以10108 8菌量气管内注射菌量气管内注射19h19h，死亡，从口、鼻腔流出大量血水样渗出物，死亡，从口、鼻腔流出大量血水样渗出物感染发病幸存猪，两个月后转为慢性，感染发病幸存猪，两个月后转为慢性，生长迟慢生长迟慢、僵、僵化，化，毛粗、皮无光泽毛粗、皮无光泽。人工接种人工接种APPAPP血清血清1 1型型12h12h内死亡病理变化内死亡病理变化人工接种APP-1型菌后7天肺病变化脓灶化脓灶人工接种APP-1型菌后7

13、天喉头和肺病变喉头的化脓性灶胸腺体出血,肺的大体外观滴鼻接种APP-1型菌后2天(背部皮肤变红)APP人工感染急性死亡病例(接种后36小时死亡)APP人工感染急性死亡病例(接种后36小时死亡)肺脏充血、化脓灶APP人工感染急性死亡病例(接种后36小时死亡)喉头出现脓性灶APP人工感染急性死亡病例(接种后36小时死亡)脾脏边缘出血性梗死鼻粘膜肿胀,充血APP人工感染急性死亡病例(接种后36小时死亡)肠道的病理剖解变化APP人工感染急性死亡病例(接种后36小时死亡)急性型死亡猪的外观急性型死亡猪的外观:皮肤发紫皮肤发紫心包积液心包积液,粘连粘连（三）诊断方法（三）诊断方法1.1.根据临床症状和剖检

14、病变可对本病作出初步根据临床症状和剖检病变可对本病作出初步诊断，确诊需借助病原分离鉴定和血清学诊诊断，确诊需借助病原分离鉴定和血清学诊断方法。断方法。2.2.病原学诊断方法病原学诊断方法 （1 1）病原分离鉴定）病原分离鉴定 (2)PCR (2)PCR诊断方法诊断方法 华中农业大学自华中农业大学自19961996年以来，已建立了年以来，已建立了ApxIApxI、ApxIIApxII、ApxIIIApxIII、ApxIVApxIV、omlAomlA(外膜蛋白外膜蛋白)、tfbtfb(转转铁结合蛋白铁结合蛋白)PCR)PCR诊断方法。由于诊断方法。由于ApxIVApxIV只在体内表只在体内表达而在

15、体外不表达，达而在体外不表达，ApxIVApxIV-PCR-PCR可作为鉴别诊断，可作为鉴别诊断，结合当前我国用得最多商品化灭活疫苗，结合当前我国用得最多商品化灭活疫苗，可以区可以区分灭活疫苗免疫猪和野毒感染猪，达到净化并最分灭活疫苗免疫猪和野毒感染猪，达到净化并最终根除猪传染性胸膜肺炎。终根除猪传染性胸膜肺炎。ApxIVApxIV-PCR-PCR 扩增特异性试验结果扩增特异性试验结果 M DNA marker 2000 +M DNA marker 2000 +阳性对照阳性对照 1-131-13，14:14:APPAPP血清血清1-131-13和和1515型标准株型标准株 15:TM/SN15

16、:TM/SN液体培养基液体培养基 16:PPLO16:PPLO液体培养基液体培养基 17:17:猪副嗜血杆菌猪副嗜血杆菌 18 18 多杀性巴氏杆菌多杀性巴氏杆菌 19:19:支气管败血波氏杆菌支气管败血波氏杆菌 20:20:大肠杆菌大肠杆菌 21 21 葡萄球菌葡萄球菌22:22:链球菌链球菌 2323阴性对照阴性对照 (无菌水无菌水)ApxIVApxIV-PCR-PCR 扩增灵敏性试验结果扩增灵敏性试验结果 M：DNA marker 2000 1-101-10：APPAPP（10109 9-10-100 0）CFU/ml CFU/ml+阳性对照阳性对照 -阴性对照阴性对照 ApxIVApx

17、IV-PCR-PCR扩增临床样品试验结果扩增临床样品试验结果3 3、血清学诊断、血清学诊断快速玻片凝集快速玻片凝集(RSA)(RSA)试验试验试管凝集试管凝集(TA)(TA)试验试验2-2-巯基乙醇试管凝集巯基乙醇试管凝集(2-ME-TA)(2-ME-TA)试验试验乳胶凝集乳胶凝集(LAT)(LAT)试验试验环状沉淀环状沉淀(RP)(RP)试验试验协同凝集协同凝集(Co-A)(Co-A)试验试验补体结合反应补体结合反应(CF)(CF)间接血凝间接血凝(1HA)(1HA)试验试验免疫荧光免疫荧光(1F)(1F)试验试验酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)(ELISA)：ApxI-Apx

18、I-、ApxII-ApxII-、ApxIII-ApxIII-、ApxIVApxIV-ELISA-ELISA（1 1）目前比较常用的诊断方法）目前比较常用的诊断方法：间接血凝试验间接血凝试验(IHA)(IHA)和酶联免疫吸附试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)(ELISA)。（2 2）本实验室建立）本实验室建立ApxI-ApxI-、ApxII-ApxII-、ApxIII-ApxIII-、ApxIVApxIV-ELISA-ELISA诊断方法，已将诊断方法，已将ApxII-ELISA ApxII-ELISA、ApxIVApxIV-ELISA-ELISA研制成试剂盒。试剂盒灵敏度高，研制成试剂盒。试剂

19、盒灵敏度高，特异好，而且特异好，而且ApxIVApxIV-ELISA-ELISA配套灭活疫苗使用，配套灭活疫苗使用，还具有鉴别诊断特点，目前已在临床上大量使还具有鉴别诊断特点，目前已在临床上大量使用。用。APP ELISAAPP ELISA诊断试剂盒诊断试剂盒近几年来近几年来APPAPP耐药性现象越来越常见，常用的药物对耐药性现象越来越常见，常用的药物对该病已无明显的疗效。该病已无明显的疗效。本实验室已经测定了分离的本实验室已经测定了分离的100100多个多个APPAPP菌株对菌株对1414种种药物的敏感性，结果发现这些菌株只对先锋霉素、药物的敏感性，结果发现这些菌株只对先锋霉素、庆大霉素和氯

20、霉素敏感，其它庆大霉素和氯霉素敏感，其它11 11种药物无效。种药物无效。随着人们对无药物残留、绿色食品需求的期望越来随着人们对无药物残留、绿色食品需求的期望越来越高，那么抗生素在动物饲料中应用的限制也越来越高，那么抗生素在动物饲料中应用的限制也越来越严格。抗生素在本病预防和控制等方面的应用必越严格。抗生素在本病预防和控制等方面的应用必将受到严格限制和逐步禁止。将受到严格限制和逐步禁止。因此，疫苗接种已成为预防和控制该病的主要措施。因此，疫苗接种已成为预防和控制该病的主要措施。（四）疫苗免疫预防（四）疫苗免疫预防灭活疫苗灭活疫苗目前，临床应用的主要是亚单位疫苗和灭活疫苗。目前，临床应用的主要是

21、亚单位疫苗和灭活疫苗。在我国，商品化疫苗有亚单位疫苗。由于亚单位在我国，商品化疫苗有亚单位疫苗。由于亚单位疫苗成分单一，免疫保护十分有限，也不能给异疫苗成分单一，免疫保护十分有限，也不能给异源源APPAPP血清型感染提供交叉保护；另外，通过物理血清型感染提供交叉保护；另外，通过物理或化学方法提取、纯化蛋白来制备亚单位疫苗生或化学方法提取、纯化蛋白来制备亚单位疫苗生物活性差、成本高，而且需要多次注射。物活性差、成本高，而且需要多次注射。灭活疫苗灭活疫苗可降低同种血清型菌感染造成的死亡率可降低同种血清型菌感染造成的死亡率，具有具有安全、不散毒，不返祖、返强，便于贮存和运安全、不散毒，不返祖、返强，

22、便于贮存和运输等优点。因此，应用最多的还是灭活疫苗。输等优点。因此，应用最多的还是灭活疫苗。由于猪胸膜肺炎放线杆菌血清型多种，不同血清型由于猪胸膜肺炎放线杆菌血清型多种，不同血清型之间的交叉免疫保护率又不高，所以不同来源灭活之间的交叉免疫保护率又不高，所以不同来源灭活疫苗的效果也各不相同，因此要根据病原流行情况疫苗的效果也各不相同，因此要根据病原流行情况及其菌种的毒力、免疫原性来确定生产用菌种。及其菌种的毒力、免疫原性来确定生产用菌种。流行病学调查结果表明流行病学调查结果表明,我国流行的胸膜肺炎放线杆我国流行的胸膜肺炎放线杆菌血清型主要是菌血清型主要是1 1、2 2和和7 7型。华中农业大学动

23、物传染型。华中农业大学动物传染病研究室对从自行分离鉴定的病研究室对从自行分离鉴定的1 1、2 2和和7 7型胸膜肺炎放型胸膜肺炎放线杆菌菌株，按血清型分为三组线杆菌菌株，按血清型分为三组,同一血清型不同菌同一血清型不同菌株间进行了各种形态、生化、毒力和免疫原性试验，株间进行了各种形态、生化、毒力和免疫原性试验，选择毒力强、免疫原性好、组成均一、性质稳定的猪选择毒力强、免疫原性好、组成均一、性质稳定的猪胸膜肺炎放线杆菌血清胸膜肺炎放线杆菌血清1 1型（型（JL9901JL9901株）、血清株）、血清2 2型型（XT9904XT9904株）和血清株）和血清7 7型（型（GZ9903GZ9903株）

24、作为生产用株）作为生产用菌种，成功研制出了菌种，成功研制出了1 1、2 2、7 7型三价灭活疫苗。型三价灭活疫苗。疫苗安全性好、产生抗体水平高，免疫猪完全能够抵疫苗安全性好、产生抗体水平高，免疫猪完全能够抵抗各种血清型菌攻击。抗各种血清型菌攻击。猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗目前国内唯一获农业部批准的商品化传胸疫苗兽药生字（2006）170041060 国家九五、十五科技攻关成果国家九五、十五科技攻关成果 目前国内唯一获得批准文号的传胸疫苗目前国内唯一获得批准文号的传胸疫苗 国内分离的优势菌株，覆盖国内流行的主要血清国内分离的优势菌株，覆盖国内流行的主要血清型，针对性强型，针对性强 免疫原性好，

25、免疫保护率高免疫原性好，免疫保护率高 含有天然毒素、保护更全面含有天然毒素、保护更全面 先进的发酵工艺、新型浓缩与乳化工艺先进的发酵工艺、新型浓缩与乳化工艺猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗的主要特点细菌发酵罐系统细菌发酵罐系统电脑自动记录数据电脑自动记录数据结果结果1 1：疫苗对最小使用日龄仔猪、不同接种途：疫苗对最小使用日龄仔猪、不同接种途径的一次单剂量接种的安全性径的一次单剂量接种的安全性 试验分试验分组组接种接种剂量剂量接种后不同时间（天）的体温接种后不同时间（天）的体温()()0 01 12 23 34 45 56 67 78 8试验猪试验猪2ml39.839.80.40.439.939.

26、90.40.439.339.30.10.139.739.70.30.339.639.60.10.139.839.80.30.339.439.40.30.339.739.70.30.339.639.60.40.42ml39.739.70.40.439.839.80.30.339.439.40.10.139.239.20.30.339.839.80.20.239.839.80.40.439.639.60.30.339.939.90.30.339.639.60.40.4TSBTSB对照对照2ml39.639.60.10.139.739.70.40.439.539.50.20.239.439.40.3

27、0.339.439.40.20.239.839.80.10.139.839.80.20.239.639.60.50.539.739.70.20.2 灭活疫苗分别以灭活疫苗分别以2ml2ml分别通过接种分别通过接种35-4035-40日龄断日龄断奶仔猪后，仔猪无临床症状，包括呼吸情况、精神奶仔猪后，仔猪无临床症状，包括呼吸情况、精神状况、食欲等正常，未见异常变化。同时，作为状况、食欲等正常，未见异常变化。同时，作为TSBTSB培养基接种的对照猪，体温也未升高（培养基接种的对照猪，体温也未升高（P0.05P0.05），），疫苗安全性很好疫苗安全性很好 。1 1、安全性、安全性结果结果2 2：对仔猪

28、单剂量重复接种的安全性：对仔猪单剂量重复接种的安全性 疫苗批号疫苗批号动物数量动物数量接种途径接种途径免疫剂免疫剂量量重复接种次数重复接种次数体温及临床症状体温及临床症状结果结果2002012002014 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 2体温，呼吸、食体温，呼吸、食欲、精神状态都欲、精神状态都正常正常2002022002024 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002032002034 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002042002044 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002052002054 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002062002064 4肌肉注射

29、肌肉注射2mL2mL2 2TSBTSB对照对照2 2肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 2 疫苗分别通过颈部肌肉以疫苗分别通过颈部肌肉以2ml2ml剂量重复接种的剂量重复接种的35-35-4040日龄断奶仔猪以及注射日龄断奶仔猪以及注射2ml TSB2ml TSB培养基的对照猪在培养基的对照猪在整个观察期间没有出现猪胸膜肺炎临床症状，体温也整个观察期间没有出现猪胸膜肺炎临床症状，体温也没有升高情况。没有升高情况。结果结果3 3：疫苗对：疫苗对35-4035-40日龄仔猪单剂量重复日龄仔猪单剂量重复接种的安全性接种的安全性疫苗批号疫苗批号动物数动物数量量接种途径接种途径免疫剂免疫剂量量重复接种次重复

30、接种次数数体温及临床症状结果体温及临床症状结果2002012002014 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 2体温，呼吸、食欲、精体温，呼吸、食欲、精神状态都正常神状态都正常2002022002024 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002032002034 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002042002044 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002052002054 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 22002062002064 4肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 2TSBTSB对照对照2 2肌肉注射肌肉注射2mL2mL2 2结果结果4 4：疫苗对妊娠：疫苗对妊娠9090

31、天母猪安全性天母猪安全性疫苗批号疫苗批号母母猪猪头头数数免免疫疫剂剂量量免免疫疫途途径径产仔成绩产仔成绩死胎数死胎数健活仔数健活仔数流产数流产数2002012002014 42 2颈颈部部肌肌肉肉注注射射0 041410 02002022002024 42 20 039390 02002032002034 42 20 040400 02002042002044 42 20 038380 02002052002054 42 20 042420 02002062002064 42 20 046460 0TSBTSB对照对照2 22 20 038380 0结果结果5 5：妊娠母猪接种疫苗后产仔成绩统

32、计：妊娠母猪接种疫苗后产仔成绩统计疫苗批号疫苗批号试验母猪头数试验母猪头数产仔成绩产仔成绩死胎数死胎数健活仔数健活仔数流产数流产数2002012002014 40 041410 02002022002024 40 039390 02002032002034 40 040400 02002042002044 40 038380 02002052002054 40 042420 02002062002064 40 046460 0TSBTSB对照组对照组4 40 038380 0仔猪免疫后仔猪免疫后4 4周，分别用检测多血清型的周，分别用检测多血清型的IHAIHA试验和试验和分别检测分别检测1 1

33、、2 2和和7 7型的琼脂扩散试验检测免疫猪与对型的琼脂扩散试验检测免疫猪与对照猪的抗体水平。照猪的抗体水平。结果表明：疫苗在免疫仔猪后结果表明：疫苗在免疫仔猪后4 4周，周，间接血凝试验抗间接血凝试验抗体水平都在体水平都在1:161:16以上以上，达到保护性，达到保护性IHAIHA抗体水平。抗体水平。琼琼脂扩散试验检测脂扩散试验检测血清血清1 1、2 2和和7 7型型特异性型型特异性抗体抗体，抗体，抗体都转阳性，且都转阳性，且在在1:4-1:161:4-1:16之间之间。具体结果如下：。具体结果如下：2 2、抗体水平、抗体水平结果结果1 1：仔猪免疫后：仔猪免疫后4 4周的间接血凝抗体水平周

34、的间接血凝抗体水平疫苗批次疫苗批次动物头数动物头数免疫剂量免疫剂量免疫免疫4 4周后抗体周后抗体水平水平2002012002014 42ml2ml1:321:325.35.32002022002024 42ml2ml1:641:6411.311.32002032002034 42ml2ml1:321:326.86.82002042002044 42ml2ml1:321:324.14.12002052002054 42ml2ml1:321:3215.615.62002062002064 42ml2ml1:641:641.21.2TSBTSB对照对照4 42ml2ml疫苗在免疫仔猪后疫苗在免疫仔猪

35、后4 4周，间接血凝试验抗体水平都在周，间接血凝试验抗体水平都在1:161:16以，以，达到保护性达到保护性IHAIHA抗体水平。抗体水平。结果结果2 2：仔猪免疫后：仔猪免疫后4 4周的抗体水平周的抗体水平（血清（血清1 1型琼脂扩散试验）型琼脂扩散试验）疫苗批次疫苗批次动物头数动物头数免疫剂量免疫剂量免疫免疫4 4周后抗周后抗体水平体水平2002012002014 42ml2ml1:61:65.35.32002022002024 42ml2ml1:41:411.311.32002032002034 42ml2ml1:81:86.86.82002042002044 42ml2ml1:41:4

36、4.14.12002052002054 42ml2ml1:41:48.48.42002062002064 42ml2ml1:81:81.21.2TSBTSB对照对照4 42ml2ml结果结果3 3：仔猪免疫后：仔猪免疫后4 4周的抗体水平（血清周的抗体水平（血清2 2型型琼脂扩散试验）琼脂扩散试验）疫苗批次疫苗批次动物头数动物头数免疫剂量免疫剂量免疫免疫4 4周后抗体周后抗体水平水平2002012002014 42ml2ml1:81:85.95.92002022002024 42ml2ml1:161:163.33.32002032002034 42ml2ml1:81:82.82.8200204

37、2002044 42ml2ml1:81:84.34.32002052002054 42ml2ml1:81:89.89.82002062002064 42ml2ml1:161:161.61.6TSBTSB对照组对照组4 42ml2ml结果结果4 4：仔猪免疫后：仔猪免疫后4 4周的抗体水平（血周的抗体水平（血清清7 7型琼脂扩散试验）型琼脂扩散试验）疫苗批次疫苗批次动物头数动物头数免疫剂量免疫剂量免疫免疫4 4周后抗体周后抗体水平水平2002012002014 42ml2ml1:41:42.72.72002022002024 42ml2ml1:81:86.56.52002032002034 42

38、ml2ml1:161:162.52.52002042002044 42ml2ml1:81:87.87.82002052002054 42ml2ml1:161:165.25.22002062002064 42ml2ml1:81:81.71.7TSBTSB对照组对照组4 42ml2ml结果结果5 5：仔猪免疫后间接血凝抗体消长情况：仔猪免疫后间接血凝抗体消长情况疫苗疫苗批次批次头头数数免疫后不同时间（天）免疫后不同时间（天）IHAIHA抗体水平（抗体水平（1 1：）7 714142828606090901201201501501801802102102002012002014 4-8 82.82.

39、817175.75.7545411.211.210810823.223.223623634.434.4565620.120.11:321:3213.13.3 36.56.52.12.12002022002024 4-8 82.22.216165.65.634348.78.711511534.534.510810824.624.630303.33.31:141:144.4.3 34 41.1.1 12002032002034 4-16167.27.2333311.11.3 3404012.312.3989823.223.221121134.434.4323210.210.21:161:166.6

40、.6 6-2002042002044 4-8 82.62.618185.45.4424212.312.311011021.221.220120124.424.4303011.211.21:161:167.7.3 32 23.3.2 22002052002054 4-8 82.82.816163.63.6454512.812.810710733.233.222022014.414.432329.29.21:161:1610.10.3 34 42.2.3 32002062002064 4-8 81.61.619192.62.6464613.313.3969643.243.221121144.444

41、.430305.25.21:161:168.8.4 42 20.0.9 9TSBTSB对照对照4 4-从表可以看出，疫苗在免疫后2周，抗体转阳，效价达1:16左右，4周后达保护线水平，以后逐渐上升，60-120天处于抗体水平高峰，持续至免疫后180天。35-4035-40日龄仔猪免疫不同时间的抗体水平和攻日龄仔猪免疫不同时间的抗体水平和攻毒结果毒结果试验分组试验分组动动物物数数免疫免疫后天后天数数被检头数的被检头数的IHA抗体（抗体（1：X）攻毒保护数攻毒保护数/免疫数免疫数481632641281型型2型型7型型免疫组免疫组487121210000/40/40/414121220001/41

42、/41/4211212129743/44/44/428121212121184/44/44/4TSBTSB对照对照3671000000/30/30/3142000000/30/30/3211000000/30/30/3280000000/30/30/33 3、免疫保护率、免疫保护率 疫苗免疫仔猪后，检测间接血凝抗体1：16以上，28天用APP-1、APP-2、APP-7攻毒，疫苗免疫猪均获得了保护。在对照组中，用APP-1攻毒，猪全部死亡；而APP-2、APP-7攻毒对照组全部发病。具体效果如下：结果结果1 1：疫苗免疫后：疫苗免疫后2828天攻毒（天攻毒（APP-1APP-1攻毒）攻毒）疫苗

43、批次疫苗批次免疫免疫剂量剂量(ml)(ml)试验试验猪数猪数(头头)攻毒后的保护情况攻毒后的保护情况保护数保护数存活数存活数保护率保护率2002012002012 24 43 34 43/43/42002022002022 24 44 44 44/44/42002032002032 24 43 34 43/43/42002042002042 24 43 34 43/43/4TSBTSB对照对照2 24 40 00 00/40/4 血清1型菌攻毒后,对照猪呼吸困难血清1型菌攻毒（10亿）后，对照猪12h内4/4急性死亡结果结果2 2：疫苗免疫后：疫苗免疫后2828天攻毒情况（天攻毒情况（APP-

44、APP-2 2攻毒）攻毒）疫苗批次疫苗批次免疫免疫剂量剂量(ml)(ml)试验猪试验猪数数(头头)攻毒后的保护情况攻毒后的保护情况保护数保护数存活数存活数保护率保护率2002012002012 24 44 44 44/44/42002022002022 24 44 44 44/44/42002032002032 24 44 44 44/44/42002042002042 24 44 44 44/44/4TSBTSB对照对照2 24 40 01 1（发病）（发病）0/40/4血清2型菌气管攻毒后(72小时内死亡后剖解)，肺脏和喉头的化脓灶喉头出现化脓灶肺脏典型化脓灶结果结果3 3：疫苗免疫后：疫

45、苗免疫后2828天攻毒（天攻毒（APP-7APP-7攻毒）攻毒）、疫苗疫苗批次批次免疫免疫剂剂量量(ml)(ml)试验试验猪猪数数(头头)攻毒后的保护情况攻毒后的保护情况保护数保护数存活数存活数保护率保护率2002012002012 24 44 44 44/44/42002022002022 24 44 44 44/44/42002032002032 24 44 44 44/44/42002042002042 24 44 44 44/44/4TSBTSB对照对照2 24 40 01 1（发病）（发病）0/40/4APP-7APP-7攻毒对照组死亡攻毒对照组死亡3/4,3/4,一头发病一头发病 肌肉注射肌肉注射2ml：各种年龄的猪：各种年龄的猪 推荐免疫程序为：推荐免疫程序为：仔猪仔猪35-40日龄进行第日龄进行第1次免疫接种，首次免疫接种，首免后免后3-4周进行第周进行第2次免疫次免疫母猪在产前母猪在产前6周和周和2周各注射周各注射1次，以后每次，以后每半年加强免疫半年加强免疫1次次种公猪一年种公猪一年2次次猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗的使用GMP车间侧景谢谢