UV-2550紫外分光光度计操作规程

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1、UV-2550紫外可见分光光度计操作和维护作业指导书1.仪器的工作环境仪器应在温度为535,相对湿度不大于85%的环境中工作,放置仪器的桌子不应受到影响使用的振动,室内无强烈电磁场干扰,避免直接暴露在阳光下,避开有硫化氢、二氧化硫、氟气、氨气等腐蚀气体的地方。仪器供电电压变化不超过220V22V,频率变化不超过50Hz1Hz,仪器地线端应良好接地。2.仪器的主要技术指标及规格2.1 光学系统: 单光束、衍射光栅2.2 波长范围: 190nm900nm2.3 波长设定: 190nm850nm,按0.1nm间隔任意设定2.4 波长显示: 四位LED,精确至0.1nm2.5 波长准确度: 1nm2.

2、6 波长重复性: 0.5nm2.7 光源: 12V30W卤钨灯、氘灯2.8 光源切换: 自动2.9 检测器: 光电倍增管R9282.10 带宽: 2nm2.11杂光: 0.5%(在200nm,碘化钾溶液)2.12测光量程: 透射比0%100%2.13 透射比准确度: 0.5%2.14 透射比重复性: 0.3%3.操作步骤 3.1装置的连接:首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器。操作完毕如下图所示,加装了UV-1650、UV- 2550、UV- 2450以及UV- 3150;使用时点击实际连接的仪器,例如下图的UV- 2550,然后点击上图的连接键,这样装置与PC机连接(当然,中间的通讯电缆

3、的连接、通讯口的指定等都是必须的,此处不再赘述)并开始下示的初始化面。初始化大约需要5分钟左右,进行一系列的检查和初置,如一切顺利通过就可以开始测定。3.2测定首先选择测定的方式,在主菜单上能发现右图所示的各键,自左至右分别为:3.2.1报告生成器:用于制作各种格式的报告。3.2.2动力学测定方式:一般测定吸收值随时间的变化,通常用于酶反应随时间的变化。3.2.3光度测定(定量)方式:可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。校准曲线可使用多点、单点、K因子等方法。由于具有自定义方程的功能,DNA/蛋白质测定等以前需要特殊选购的软件才能进行的工作,使用UVPROBE可自编程序进行测定。3.2.4

4、光谱测定方式:可进行紫外可见区的光谱测定。3.3光度测定方式3.3.1参数的设置点击菜单栏中的键,出现下图:测定的方式选择测定波长的列名选择和登录波长登录后的波长显示区此处显示的波长类型是“点”表示测定高度,如果选择的是范围,则需输入起始和结束波长,并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。无论如何选择,波长都是必须的,并要加入以后才有效。3.3.2显示设置在某单栏上有右列各键,点击以后分别出现标准表(最左)、样品表(左2)、工作曲线图(右2)和样品图(最右)。工作曲线样品图标准表样品表3.4定量测定:光度测定首先如前所述,选择了点及波长,然后在方法中选择校准,在此决定用工作曲线法定量

5、,并选择多点、单点或K因子法等。关闭方法画面后出现如下图象进行定量测定也需要基线校正和自动调零,方法如前面所述。此后,样品室内逐个放入标准,点击上图下方的读数键即可。注意,无论是测定标准或未知样品,必须输入名称才有效。标准测定完毕,工作曲线自动显示。接下去就可测定未知样品的浓度了。有时不测定浓度,只测定某些波长的读数,则在校准方法中选择“原始数据”,在登录时选择若干需要的波长,即可测定各波长的读数。在工作曲线图象上点击鼠标右键,选择属性,可从该图象上得到许多有用的信息,见下图:只需在这些显示的项目中做标记,相应的信息即出现在工作曲线图象的左下方。见下图的划圈部分:4.故障分析 现 象 原 因

6、措 施仪器完全不工作 1 电源未接通 1 检查电源线电源指示灯不亮 2 2A熔丝断 2 更换2A熔丝管仪器数据显示不稳定 1 预热时间不稳 1 仪器预热30min2 供电电源不稳 2 供电电源目无突变3 环境振动过大断电保护失效 3 调换工作环境检查断电保护直流电源是否正常初始化测光不正常 1 检查光源灯 1 是否损坏需要更换2 波长不准 2 调整波长 5.日常保修及定期检查5.1每次操作使用结束后,应仔细检查样品室内是否有溶液溢出,若有溢出必须随时用滤纸吸干,否则会引起测量误差或影响仪器使用寿命。5.2仪器使用一段时间(一般每年12次),用鐠钕滤光片检查波长准确度。 5.3仪器每次使用完毕,请用随机提供防尘套罩住,在套子内放入数袋硅胶,以免灯室受潮,使反射镜霉变或沾污,影响仪器寿命。

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