病毒的主要成分

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1、病毒的重要成分一、病毒的构造包膜：蛋白质、多糖、脂类 是某些病毒在成熟过程中穿过宿主细胞，以出芽方式向宿主细胞外释放时获得的，具有宿主细胞膜或核膜成分。 有包膜的病毒体称为包膜病毒，无包膜的称为裸露病毒。 包膜的重要作用：维持病毒体构造的完整性。核衣壳：1、核心：核酸 2、衣壳：包绕在核酸外面的蛋白质外壳。衣壳具有抗原性，是病毒的重要抗原成分，可保护病毒核酸免受环境中核酸酶或其她影响因素的破坏，并能介导病毒进入宿主细胞。有如下类型：螺旋对称性，20面体对称性，复合对称性。二、病毒的化学构成和功能1、病毒核酸：DNA或RNA，是主导病毒感染、增殖、遗传、变异的物质基本。部分核酸偶感染性。2、病毒

2、蛋白质：病毒的重要成分，约占病毒体总重量的70%，由病毒基因组编码，具有病毒的特异性。3、脂类和糖：脂质重要存在包膜中。病毒的致病作用一、病毒感染的传播方式病毒感染的传播方式有水平传播和垂直传播二、病毒感染的致病机制对宿主细胞的致病作用1、杀细胞效应：2、稳定状态感染：不具有杀细胞效应的病毒引起的感染细胞融合：其成果是形成多核巨细胞或合胞体。细胞表面浮现病毒基因编码的抗原：病毒感染的细胞膜上常浮现病毒基因编码的新抗原。3、包涵体形成：4、细胞凋亡：5、基因整合与细胞转化：病毒感染的免疫病理作用通过与免疫系统互相作用，诱发免疫反映损伤机体。1、抗体介导的免疫病理作用：病毒的包膜蛋白、衣壳蛋白均为

3、良好的抗原，能刺激机体产生相应抗体。2、细胞介导的免疫病理作用：3、致炎性细胞因子的病理作用：4、免疫克制作用：某些病毒感染可克制免疫功能。病毒的免疫逃逸病毒的免疫逃逸能力：病毒也许通过逃避免疫监视、避免免疫激活或制止免疫反映发生的方式逃脱免疫应答。三、病毒感染的类型显性感染与隐性感染1、显性病毒感染：2、隐性病毒感染：病毒进入机体不引起临床症状。隐性感染者称为病毒携带者。急性病毒感染持续性病毒感染：1、潜伏感染：潜伏期查不出病毒。凡使机体免疫力下降的因素均可激活潜伏病毒使感染复发。 2、慢性感染：感染后未完全清除，在血中科持续检测出病毒。 3、满发病毒感染：慢性发展的进行性加重病毒感染。较为

4、少见但后果严重。 4、急性病毒感染的迟发并发症：呼吸道病毒 正粘病毒涉及甲、乙、丙型流感病毒一、生物学性状形态构造1、核衣壳：由病毒分节段的单负链RNA与核蛋白(NP)构成。其上还附着有RNA依赖的RNA复合酶复合体蛋白。 甲乙型流感病毒有8个节段。 流感病毒的核酸无感染性。 NP是重要的构造蛋白，抗原构造稳定，与M蛋白一起决定病毒的型特异性，很少发生变异，其抗体中无中和病毒的能力。 根据NP和MP的抗原性不同，可将流感病毒分为甲、乙、丙三型。2、包膜：由内层基质蛋白（MP）和外层脂蛋白（LP）构成。其作用为：维持病毒外形和完整性。 MP蛋白抗原构造较稳定，呈型特异性，其抗体中无中和病毒的能力

5、。刺突：血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）。HA和NA的抗原构造很不稳定，易发生变异，是划分甲型流感病毒亚型的重要根据。抵御力流感病毒的抵御力较弱。培养特性1、细胞培养2、动物接种3、鸡胚尿囊腔培养二、致病性和免疫性致病性流感病毒抗原易变异，传播迅速，是引起流行性感冒的重要病毒。丙型流感病毒只感染人类。免疫性机体可形成特异性免疫应答。呼吸道粘膜局部分泌的sIgA抗体有阻断病毒感染的保护作用，但只能短暂存在几种月。血清中抗HA特异性抗体为中和抗体，有抗病毒感染、减轻病情的作用，可持续数月至数年。 副粘膜病毒副粘膜病毒科涉及：副流感病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺验病毒、尼派病毒、人偏肺病毒等

6、。一、麻疹病毒抗原性较稳定，只有一种血清型。麻疹病毒的唯一自然储存宿主为人，重要通过费米传播，感染性极强，易感者接触后几乎全都发病。二、腮腺炎病毒重要引起腮腺肿胀、疼痛为重要症状的流行性腮腺炎。腮腺炎病毒只有一种血清型。人是腮腺炎病毒的唯一储存宿主，重要通过飞沫传播。病后可获得持久免疫。桃拉综合征病毒病病原：桃拉综合症病毒 (TSV)属于RNA病毒，二十面体，无囊膜，有包涵体。症状：身体从尾扇开始发红，发红部位逐渐前推，病虾不变软，病情后期身体浮现黑斑。感染对象：重要感染南美白对虾，重要发生在虾的蜕皮期传播方式：重要是水平传播国内由于引进南美白对虾并进行了规模养殖，该病在南美白对虾养殖密集区中

7、已有发现。病虾不吃食或少量吃食，在水面缓慢游动，在特急性到急性期，幼虾身体虚弱，外壳柔软，消化道空无食物，在附足上会有红色的色素沉着，特别是尾足、尾节、腹肢，有时整个虾体体表都变成红色。较大规格的病虾步足末端有蛀断、溃疡现象，两根触须、尾扇、胃肠道均变红，胃肠道肿胀（肠内有少量食物），肝胰脏肿大，变白。透过部分病虾的甲壳，发现肌肉由本来的半透明变成白浊，特别是腹部末端，似甲壳与肌肉分离状。部分病虾的头胸甲处浮现白区，镜检发现甲壳和胃肠壁压片红色素细胞扩散。染病初期大部分病虾头胸甲有白斑，久病不愈的病虾甲壳上有不规则的黑斑。由于病毒病的来势较快，感染率较高，死亡率较大，因此，对病毒病的避免工作特

8、别重要：1、生石灰，一次量，每667m3水体，100150kg，彻底清塘、曝晒池底。2、生石灰，一次量，每1m3水体，0.10.2g或1520g，全池泼洒，1520天1次。3、聚维酮碘对受精卵浸浴消毒。4、养殖过程中一般采用益水宝、高能氧、亚硝酸盐降解灵等，保持水体的相对稳定，定期进行池塘消毒，杀灭克制水体中病原微生物的繁殖，饲料中添加维C、 免疫多糖、生物酶添加剂等提高虾体的免疫力，改善肠胃的微循环；同步添加对虾病毒净、氟苯尼考等抗菌药物控制虾体内病原微生物的繁殖。5、投优质饵料，定期定量投喂。双生病毒科双生病毒科的病毒粒子为双联体构造，无包膜，由两个不完整的二十面体构成。双生病毒科的病毒一

9、般发生在热带和亚热带地区。该科下共有3个属。中文学名： 双生病毒科拉丁学名： Geminiviridae界： 病毒界科： 双生病毒科特性病毒粒子为双联体构造，每个粒子大小为18nm30nm，无包膜，由两个不完整的二十面体构成（T=1），共有22个五聚体壳粒。病毒的外壳蛋白由单个多肽构成，分子质量为2834kDa，每个壳粒构造估计有5个外壳蛋白分子。该科是植物病毒中惟一具有单链DNA的单分体或二分体基因组病毒。病毒包裹单分子或两分子闭环状ssDNA，每分子DNA长2.53.0kb，总基因长约2.55.2kb。编码辨别布于DNA的病毒链和互补链，其中间为基因间隔区。病毒复制是经一种双链复制中间体，

10、通过滚环复制，ssDNA合成起始于基因间隔区的一段保守序列TAATATT/AC，病毒基因双向转录，在基因间隔区具有转录起始点。大多数双生病毒的增殖部位局限于植物韧皮部组织，在细胞核中形成病毒粒子汇集体，细胞核膨大并形成颗粒状构造和纤维状构造，纤维状环也许是病毒复制装配的场合。双生病毒科的病毒一般发生在热带和亚热带地区。该科中的玉米线条病毒属重要限于侵染禾本科单子叶植物，菜豆金色花叶病毒属和曲顶病毒属侵染双子叶植物。自然界中，玉米线条病毒属和曲顶病毒属通过叶蝉以持久方式传播，菜豆金色花叶病毒属通过粉虱以持久方式传播，病毒在介体昆虫中不繁殖，虫卵不带毒。有些种也可以通过机械传毒，但一般较难。病毒具

11、有效的免疫原性，菜豆金色花叶病毒属内病毒之间有血清学关系，曲顶病毒属与菜豆金色花叶病毒属的某些病毒有远缘血清学关系。玉米线条病毒属（单分体基因组、叶蝉传播、单子叶植物寄主）曲顶病毒属（单分体基因组、叶蝉或角蝉传播、双子叶植物寄主）菜豆金色花叶病毒属（多为二分体基因组、粉虱传播、双子叶植物寄主）病毒的分类地位病毒(VIRUS) 被觉得是一种无细胞构造的低等生物,长期以来,病毒的分类地位始终很不清晰,生物界大概有两种大相径庭的分类措施: 1.觉得病毒构造简朴,并且大多数以RNA为遗传物质,来源于最原始的有机化学构造,是产生于细胞之前的原始地球的一种生命形式.因此,按此学说,其产生从发生时间看,要早

12、与细胞生物. 2.觉得病毒缺少自主的生命活动,只有在细胞内才干体现生命现象,并且所有为胞内寄生,依托寄主合成自身物质.因而,病毒的发生应晚于细胞,它们也许是细胞在进化中扔掉的核酸片断.近年来,因对病毒的理解进一步进一步,发现了大量证据支持第二种学说,因而目前一般把病毒的来源定在细胞生命体之后.以上是前人有关病毒的见解,下面使我的观点.在下对于物理学略有研究的基本上,又接触到了DR.考夫曼的著作,其上病毒被觉得是一种趋于最低能量的稳定构造,其遗传物质的排布几乎都达到了最低能量水平,病毒体就成为了一种低熵物质,这就带来两个成果,一种是使病毒可以耐受极为苛刻的环境,二是使其不具有积极的生命活动. 而

13、一切细胞生物涉及我们自己都是一种不断在向外排熵的物体,我们的熵是无时无刻不在增大的,只是我们在不断的将其转移到环境中去,我们自身才保持了一种动态平衡,疾病从本质上来讲,就是此平衡遭破坏,因而,我们乃至整个生物圈事实上都是一种耗散构造,不断得注入能量,不断的消耗,才干不断的生息繁衍. 由此,我们大概也能看出其中不同了.从本质上来说,病毒是与我们完全不同的生命形式! 因而,细胞与病毒有也许并没有先后问题,它们完全有也许是平行进化的.只是它们走得是两条截然不同的路,是积极的稳定与被动的稳定.而两者都达到了生存的目的.两者都是自然选择的成功者.EB病毒概述 EB病毒（epstein-barr viru

14、s，EBv）是epstein和barr于1964年初次成功地将burkitt非洲小朋友淋巴瘤细胞通过体外悬浮培养而建株，并在建株细胞涂片中用电镜观测到疱疹病毒颗粒，故名。EB病毒的形态与其她疱疹病毒相似，圆形、直径180nm，基本构造含核样物、衣壳和囊膜三部分。核样物为直径45nm的致密物，重要含双股线性dna，其长度随不同毒株而异平均为17.5104bp分子量108.衣壳为20面体立体对称，由162个壳微粒构成。囊膜由感染细胞的核膜构成，其上有病毒编码的膜糖蛋白，有辨认淋巴细胞上的EB病毒受体，及与细胞融合等功能。此外在囊膜与衣壳之间尚有一层蛋白被膜。EB病毒仅能在b淋巴细胞中增殖，可使其转

15、化，能长期传代。被病毒感染的细胞具有EBv的基因组，并可产生多种抗原，已拟定的有：EBv核抗原（EBna），初期抗原（ea），膜抗原（ma），衣壳抗原（vca），淋巴细胞辨认膜抗原（lydma）。除lydma外，鼻咽癌患者EBna、ma、vca、ea均产生相应的lgg和lga抗体，研究这些抗原及其抗体，对阐明EBv与鼻咽癌关系及初期诊断均有重要意义。EB病毒长期潜伏在淋巴细胞内，以环状dna形式游离在胞浆中，并整合天染色体内。EB病毒在人群中广泛感染，根据血清学调查，国内35岁小朋友EB病毒vca-lgg抗体阳性率达90%以上，幼儿感染后多数无明显症状，或引起轻症咽炎和上呼吸道感染。青年期发生

16、原发感染，约有50%浮现传染性单核细胞增多症。重要通过唾液传播，也可经输血传染。EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染b淋巴细胞，这些细胞大量进入血液循环而导致全身性感染。并可长期潜伏在人体淋巴组织中，当机体免疫功能低下时，潜伏的EB病毒活化形成得复发感染。人体感染EBv后能诱生抗EBna抗体，抗ea抗体，抗vca抗体及抗ma抗体。已证明抗ma抗原的抗体能中和EBv.上述体液免疫系统能制止外源性病毒感染，却不能消灭病毒的潜伏感染。一般觉得细胞免疫（如t淋巴细胞的细胞毒反映）对病毒活化的“监视”和清除转化的b淋细胞起核心作用。由EBv感染引起或与EBv感染有关疾病重要有传染性单核细胞增多症、非

17、洲小朋友淋巴瘤（即burkitt淋巴瘤）、鼻咽癌。所有的病毒感染都是不也许根除的，也就是从体内彻底清除，只能加强锻炼，加强营养，提高免疫力。一、免疫性人体感染EBV后能诱生抗EBNA抗体，抗EA抗体，抗VCA抗体及抗MA抗体。已证明抗MA抗原的抗体能中和EBV.上述体液免疫系统能制止外源性病毒感染，却不能消灭病毒的潜伏感染。一般觉得细胞免疫（如T淋巴细胞的细胞毒反映）对病毒活化的“监视”和清除转化的B淋细胞起核心作用。二、微生物学诊断EBV分离培养困难，一般用血清学措施辅助诊断。在有条件实验室可用核酸杂交和PCR等措施检测细胞内EBV基因组及其体现产物。（一）EBV特异性抗体的检测 用免疫酶染

18、色法或免疫荧光技术检出血清中EBVlgG抗体，可诊断为EBV近期感染。在鼻咽癌血清中可测出VCA-lgG抗体达90%左右，病情好转；抗体效价不降，因此对鼻咽癌诊断及预后判断有价值。特别国内学者大规模人群调查，发现抗EA-lgA效价上升，极大地增长了得鼻咽癌的危险性，为该癌肿的初期诊断，提供了重要手段。（二）嗜异性抗体凝集实验 重要用于传染性单核白细胞增多症的辅助诊断，患者于发病初期血清可浮现lgM型抗体，能凝集绵羊红细胞，抗体效价超过1：100有诊断意义，但只有6080%病例呈阳性，且少数正常人和血清病病人也具有此抗体，但是正常人和血清病人的抗体经豚鼠肾组织细胞吸取实验，可变为阴性。三、临床体

19、现CAEBV发生在非免疫缺陷个体，CAEBV不是一种独立的疾病，可发生在任何年龄 .由于EBV可使不同部位多种类型淋巴细胞感染及克隆增生，临床体现多种多样，其病理变化几乎可波及到各个器官。T细胞类型的CAEBV重要体现为发热、VCA-IgG及EA-IgG抗体滴度升高；NK细胞类型的CAEBV重要体现为蚊虫过敏及相应的皮肤损害，骨髓或外周血中大颗粒细胞增多及IgE滴度升高。四、重要症状和体征发热（92.7%），可呈现低烧、中档度烧及高烧，合并HLH时常常浮现高烧不退。发热因素重要与CAEBV时IFN-、肿瘤坏死因子（TNF-）及白介素等细胞因子的异常分泌有关，也也许和继发感染有关。肝脏肿大（79

20、.3% ） ， 脾脏肿大（73.2% ） ， 肝功能异常（67.1% ） ，血小板减少症（45.1% ）， 贫血（43.9%）， 淋巴结病（40.2%）。 蚊虫过敏， 体现为蚊虫叮咬后局部皮肤的红斑、水疱及溃疡形成，并且伴有高烧。皮疹，皮肤牛痘样水疱， 腹泻及视网膜炎。其她少见体现Ohga S等报道1例在14个月龄时诊断为CAEBV的患儿，8岁时浮现肌无力和感觉异常，脑组织活检显示大脑广泛分布EBV感染的T淋巴细胞，证明EBV引起的淋巴组织增殖性疾病（lymphoproliferative disorders， LPD）可发生在中枢神经系统。其她体现尚有结肠炎、皮肤肌炎、T细胞型多肌炎、肾脏损

21、害等。另有报道8岁男孩因眼内直肌NK细胞浸润导致双侧眼球突出。I. 下述状况持续6月以上：a） 从EBV原发感染开始症状始终持续b） EBV抗体滴度异常（涉及抗VCA-IgG1：5120，抗EA抗体1：640或EBNA抗体1：2. II.重要脏器受损的组织学标志：a） 淋巴结炎b） 噬血现象c）脑膜脑炎d）持续性肝炎e）脾肿大f）间质性肺炎g）骨髓增生不良h）视网膜炎III.证明受损组织或外周血中EBV数量增多：a）受损组织中EBV的DNA、RNA或蛋白增多b）外周血中EBV的DNA水平增高。诊断CAEBV需满足上述每一项中的至少一条并排外任何免疫缺陷涉及HIV感染CAEBV并不是一种独立的疾

22、病，诊断CAEBV的同步需要加上重要病理损害器官的疾病，如：恶性淋巴瘤、HLH、冠状动脉瘤、心肌炎等。如果临床疾病与EBV有关，但外周血中抗体滴度或EBV的DNA拷贝数不增高，则只能诊断为慢性EB病毒感染（CEBV）。合并严重叠并症的CAEBV称为严重慢性EB病毒活动性感染（SCAEBV），涉及淋巴瘤、心肌病、冠状动脉瘤、HLH及肝功能衰竭等。EB病毒感染首发症状及其有关性疾病，以加强对本病的结识，提高临床诊断水平。措施：对255例小儿EB病毒感染患儿进行回忆性分析及总结。成果：EB病毒感染多数以发热为首发症状（占63.1%），另一方面以咳嗽（占13.7%）、颈部肿块（占4.7%）、眼睑浮肿（

23、占3.5%）、肝脾肿大（占3.1%）、咽痛（占2.7%）、皮疹（占2.0%）为首发的亦有较多，较少见的尚有以头痛（占1.6%）、黄疸（占1.2%）、口腔溃疡（占0.8%）、肝炎（占0.8%）、皮肤出血点（占0.8%）、腹胀（占0.4%）、心律失常（占0.4%）、腮腺肿大（占0.4%）、惊厥（占0.4%）、声嘶（占0.4%）为首发症状的。EB病毒感染大多数引起传染性单核细胞增多症（占51.8%），其她有关性疾病涉及呼吸道感染（占22.4%）、扁桃体炎（占9.0%）、淋巴结炎（占4.3%）、病毒性心肌炎（占2.0%）、病毒性脑炎（占1.6%）、噬血细胞综合征（占1.6%）、肝炎（占1.6%）、川崎

24、病（占1.2%）、镜下血尿（占1.2%）、恶性淋巴瘤（占0.8%）、溃疡性口炎（占0.8%）、腮腺炎（占0.4%）、喉炎（占0.4%）、组织细胞增生症（占0.4%）、恶性网状细胞增生症（占0.4%）和血小板减少性紫癜（占0.4%）。结论：EB病毒感染可累及全身各个系统，临床体现多种多样，临床医生应综合分析，结合有关实验室检查，尽早明确诊断，减少误诊。五、防治原则目前有二种疫苗问世，其中之一为国内用基因工程措施构建的同步体现EBV gp320和HBsAg的痘苗疫苗，重点使用在鼻咽癌高发区。另一为提纯病毒gp320膜蛋白疫苗，正在英国大学生患者中作小规模接种，以期观测该疫苗与否能减少传染性单核细胞

25、增多症的发病率。无环鸟苷（AC）和丙氧鸟苷（DHPG）可抑EBV复制，均有一定疗效。病毒的致瘤机制人乳头瘤病毒为例HPV能引起人类皮肤和粘膜的多种良性乳头状瘤或疣，某些型别感染还具潜在的致癌性。HPV与生殖道肿瘤的发生有密切关系，并与口腔、咽、喉、气管等处的乳头状瘤和皮肤的疣等良性病变有关，其中与宫颈癌发生的关系最引人关注。随着分子生物学和分子流行病学的迅速发展，病毒感染与肿瘤的关系受到广泛注重。自Durst等应用核酸杂交技术在宫颈癌组织中检测到HPV16型和18型DNA以来，众多学者从临床到分子生物学等不同方面对HPV与宫颈癌的有关性进行了大量研究。其与宫颈肿瘤的病因学关系也日益明了，WHO

26、于1992年宣布HPV是引起宫颈癌的首要因素,是仅次于乙肝病毒与肝癌有关强度的一种病毒致癌因子。E5蛋白 HPV16的E5蛋白是一种含84个氨基酸的疏水膜蛋白，重要散在分布在内质网及高尔基体上。HPV16E5不能永生化原始的人角质细胞C；但能协同E6和E7，发挥很重要的补充作用。 E5蛋白重要生物活性是通过结合溶酶体ATP酶上16 kD的脂蛋白l2o J，克制H 通过，使EGFR降解受阻，EGFR数目增多，EGF与EGFR作用后所激活的多种信号通路兴奋时间延长。如体现HPV16E5的细胞在予以EGF后，可观测到MAP激酶活性增强，CFos和C-Jun的体现增长。这提示E5也许通过MAP激酶途径

27、来发挥其致癌作用。大多数HPV的上游调节区域涉及AP1的结合位点，并存在于体现E5的细胞中，由于CFos和CJun的体现增长，HPV的上游调节区启动子转录水平有所增长，因此HPV E5蛋白对于E6和E7蛋白的产生非常重要。此外，EGF是人角质细胞通过G 期所必需的细胞因子，E5的活性提示它可通过EGF来增进细胞周期进展。 HPV11和16 E5蛋白在N1H3T3细胞株中能克制p21抑癌基因的体现，并使人角质细胞永生化。提示p21基因的体现受抑也许是癌基因所介导的生长刺激的机制之一21。E6蛋白 E6蛋白是一种含151个氨基酸的蛋白，涉及2个锌指状构造。E6蛋白能有效地使人乳腺上皮细胞永生化，与

28、E7协同作用使人包皮角质细胞(HFK)永生化。E6的重要功能是通过与p53和一种泛素连接酶E6AP形成复合物，使p53泛素化分解而失去作用。E6还能通过将p53阻滞在胞浆内来制止p53作用。E6对p53的克制作用在HPV感染过程中非常重要，由于HPVE7单独体现时，可以提高p53含量；HPVE2能诱导依赖p53的凋亡作用。p53升高以及诱导依赖p53的凋亡很也许在病毒复制前即可杀死感染细胞。体现E6的细胞能阻滞p53所诱导的细胞周期停滞及凋亡，因此，E6对p53的作用是增殖感染的重要部分，它的这一功能使有基因异常的细胞得以持续增殖。有文献报道，HPV16E6蛋白能通过克制p53的联合兴奋因子C

29、BPp300来克制p53的作用。由于p3O0，CBP的某些目的基因参与细胞因子及免疫信号的产生，如IL-6，IL-8。HPVE6对0300CBP的克制作用，是HPV感染的免疫克制机制之一 除了与p53作用，HPV18E6还能通过E6-AP蛋白泛肽作用降解凋亡前蛋白Bak，这种与Bak的作用也许是不依赖p53的凋亡克制作用。另有实验表白E6通过形成CmycE6一E6AP复合物来制止Cmyc所介导的凋亡，以保证病毒感染的持续存在。 与E7类似，E6同样也能绕过多种细胞周期负性因子的调控，如pl6和p27所致的G 期细胞周期停滞，使细胞进入DNA合成期(S期)。22-25E7蛋白 E7蛋白是涉及98

30、个氨基酸的磷酸化核酸蛋白，共分为3个功能区CR1，CR2，CR3。E7通过位于c末端的锌指状构造形成二聚体；N末端的CR1和CR2区对E7蛋白的体外转化有重要作用。E7是HPV的重要致癌蛋白，高危型HPV(16、18、31)E7单独即能使人角质细胞(HFK)永生化。 E7通过CR2区的LXCXE构造特异地与Rb第649772位氨基酸的口袋构造结合，并释放核转录因子E2F，使细胞进入DNA合成期。有趣的是LXCXE构造的氨基酸序列在许多病毒蛋白及细胞内Rb结合蛋白中亦存在 ，如腺病毒的E1A蛋白、猿病毒40大T抗原(SV40LTAG)、CyclinD和组氨酸去乙酰化酶(HDAC)等。这个区域的高

31、度保守性提示，病毒蛋白与pRb结合在其致病过程中具有重要作用，且E7能与细胞内蛋白竞争结合pRb。近来的研究表白，E7 c末端区域(CR3)能与pRb的第803位氨基酸至第841位氨基酸之间的区域相作用，导致E2F因子游离，游离的E2F因子进入核内，与一系列具有共同特殊序列的基因启动子结合，如CMyc，CMyb，CDC2，腺苷酸激酶，二氢叶酸还原酶和DNA聚合酶Or基因，结合后的复合物不仅能诱发DNA复制(S期)所需基因的转录；同步能诱导产生G 期调节因子，涉及CyclinA和CyclinE，进一步对pRb磷酸化，导致G 期的调节失控。E7对CyclinE和CyclinA的影响。能延长宿主细胞

32、终未分化时间，有助于病毒自身复制。 高危型HPV和低危型HPV E7与Rb的结合力是不同的E2。这与LXCXE构造附近的序列有关，HPV6E7蛋白第20位氨基酸是甘氨酸，而HPV16E7蛋白在相应位置则为天冬氨酸 。 E7对E2F的影响，除了依赖pRb途径，E7还能直接结合E2F，并兴奋其转录活性E2。E7还能通过结合组氨酸去乙酰化酶复合物(HDAC1)构成部分Mi2B来克制HDAC1作用E4，HDAC1能与pRb协作克制E2F转录因子活性，在细胞周期调控中有重要作用。E7与HDAC之间的作用提供了E7能削弱基因转录克制的另一种机制。 除了对E2F转录因子的作用，E7能与AP-1(activa

33、tor protein-1)转录因子家族作用。AP-1转录因子家族涉及C-Jun，JunB，C-Fos等，AP-1转录因子介导初期有丝分裂。有研究发现，一方面E7锌指状构造能与CJun的第224249位氨基酸结合，激活细胞周期初期进展基因，在E7转化过程中起重要作用。另一方面E7的LXCXE构造能克制pRb对CJun转录的兴奋，使细胞分化脱离细胞周期进展。HPVE7对细胞分化及细胞周期进展的影响是通过一种复杂的模式进行的。E7还能与某些基本的转录因子结合(如TATA结合蛋白TBP和TBP有关因子-110)来介导它对基因转录的影响。 E7蛋白的体现导致多种细胞周期负性调控的信号失效，涉及p53介

34、导的生长停滞，TGF-p介导的生长克制、p16所介导的细胞周期停滞p21和p27所介导G S期阻滞等。体外实验表白，HPVE7能结合并灭活p21，克服p21介导的对CyclinE和CyclinA有关激酶CDK2的克制，并能阻滞p21对依赖增殖细胞核抗原(PCNA)DNA复制的克制作用，从而削弱p21的双重克制作用。由于p21也可不依赖pRb来克制E2F活性，因此导致p21克制作用的进一步丧失。尽管E7能使细胞免于p53所介导的细胞周期阻滞，但体现E7细胞凋亡水平升高，这也许与DNA复制末期E7直接与CyclinA作用，导致依赖CyclinA的E2F失活过程的失效有关26-29。噬菌体MOI值及

35、其意义MOI 是multiplicity of infection的缩写，中文译为感染复数。老式的MOI概念来源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值，也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。一般觉得MOI是一种比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfu number/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中，含义是感染时病毒与细胞数量的比值。然而，由于病毒的数量单位有不同的表达方式，从而使MOI产生了不同的含义。能产生细胞裂解效应的病毒例如腺病毒、单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu 表达病毒数量，因此其MOI的含义与老式的概念相似。而对于某些病

36、毒如AAV病毒，无法用pfu表达病毒的数量，而是采用TU、IU、病毒颗粒（viral particles, v.p）或基因组数量（vector genome,v.g.）来表达病毒数量，因此其MOI就有了不同含义。采用TU或IU，MOI的含义便是TU number/cell 或IU number/cell。采用v.p.，MOI的含义便是v.p. number/cell 。采用v.g，MOI的含义便是v.g. number/cell。可以将上述不同的MOI 表达方式分为2种：1） 以活性单位表达病毒数量，如pfu, TU, IU。这时MOI的含义是指平均每个细胞感染病毒的活性单位数。2） 以病毒颗

37、粒或基因组数表达病毒数量，如v.p. 或v.g. 。这时MOI的含义是指平均每个细胞感染病毒的病毒颗粒或基因组数。值得一提的是，上述2种不同的MOI 表达方式在含义和数值上均有所不同。前一种是老式意义上的MOI，后一种MOI表达方式的含义更为简化和直观，也逐渐被某些研究者采用。老式意义上的MOI的测定，其原理是基于病毒感染细胞是一种随机事件，遵循Poisson分布规律，可计算出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数（MOI）。其公式为：P(k) = 1- P(0) ,P(0) = e-m 或m = -InP（0）。 其中：P(k) 为被感染细胞的百分率,p(0)为未被感染细胞的百分率,m为MOI值。例如，如果要感染培养皿中99%的培养细胞，则：P(0) = 1% = 0.01 m = -In(0.01)= 4.6 pfu/cell。由此可以看出，由于病毒特性和研究者习惯的不同，MOI的单位由本来商定俗成的 pfu number/cell变成多种表达单位。