《160株新生儿肺炎克雷伯菌的耐药性分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《160株新生儿肺炎克雷伯菌的耐药性分析（3页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、160株新生儿肺炎克雷伯菌的耐药性分析【摘要】目的分析我院新生儿科病区产ESBLs、Ap酶的肺炎克雷伯菌的耐药情况，指导临床合理用药。方法按LSI推荐的超广谱内酰胺酶(ESBLs)确证试验,对肺炎克雷伯菌进展ESBLs检测,并用三维试验法、三维试验抑制试验进展Ap酶检测。结果160株肺炎克雷伯菌中,检到产ESBLs肺炎克雷伯菌84株，阳性率高达52.50%。71株耐头孢西丁菌株检到23株产Ap酶，其中单产Ap酶5株，产Ap+ESBLs菌株18株。Ap酶阳性率为14.38%23/160。结论别离自我院新生儿科的肺炎克雷伯菌对-内酰胺类抗菌药物耐药严重，主要以产ESBLs和或Ap酶为主。给临床抗感
2、染治疗带来很大困难，是院内感染的一大隐患。【关键词】超广谱-内酰胺酶Ap酶肺炎克雷伯菌三维试验三维抑制试验Ap酶是继ESBLs之后,临床上出现的肠杆菌科细菌的又一重要耐药机制,肺炎克雷伯菌作为条件致病菌是新生儿感染性肺炎的常见病原菌，也是重要的院内感染病原菌,在医院感染别离率一直趋于首位。近年来,由于广谱抗菌药物的广泛大量应用,导致这些细菌出现高产Ap酶菌株。近年来，编码Ap酶的基因已转移到质粒上，并在大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中出现1，易在不同菌种间横向播散。所以监测和检测这类细菌产ESBLs和Ap酶的情况,对指导临床合理使用抗菌药物以及预防和控制院内感染的发生具有重要的意义。1材料与方法1.
3、1材料1.1.1菌株来源肺炎克雷伯菌160株均别离自2022年1月至2022年12月我院新生儿病区患儿呼吸道标本。1.1.2一次性培养皿与药敏纸片一次性培养皿为郑州博赛产品；药敏纸片为英国XID公司产品。1.1.3试剂克拉维酸中国药品生物制品检定所；邻氯西林上海四药。1.1.4质控菌株E.liAT25922，K.pneuniaeAT700603，E.laae029，E.laae029。1.2方法1.2.1药敏试验按LSI推荐的K-B纸片法进展测定，并按其制定的标准进展判读。1.2.2超广谱-内酰胺酶(ESBLs)检测按LSI推荐确实证试验测定ESBLs。1.2.3产Ap酶菌株初筛采用K-B法，
4、按照LSI推荐的方法进展2，头孢西丁(30g/片)抑菌环直径17时，提示对FX中介或耐药为疑产Ap酶菌株。1.2.4-内酰胺酶粗提取物的制备取50l0.5麦氏单位菌液参加12l胰蛋白胨肉汤中，35恒温摇床孵育6h,4000r/in，4离心20in，弃上清，将沉淀物-70反复冻融5次，参加pH7.0的0.01l/L磷酸盐缓冲液1.2l混匀，14000r/in，4离心20in，取上清液即为酶粗提物，无菌试验后-20保存。1.2.5三维试验对可疑菌株的酶提取物用头孢西丁三维试验方法进展Ap酶确证。1.2.6三维试验抑制试验3在涂有E.liAT25922菌液的-H平皿中央贴1片30g头孢曲松纸片,垂直
5、挖四个狭缝,分别参加40l的试验菌株酶粗提取物、36l酶粗提取物+4l2l/L邻氯西林、36l酶粗提取物+4l2l/L克拉维酸、36l酶粗提取物+4l2l/L克拉维酸+4l2l/L邻氯西林,35培养24h,扩大生长区域消失为酶抑制实验阳性。2结果2.1160株肺炎克雷伯菌耐药现象较为严重，对16种抗菌药物中的13种均出现不同程度的耐药，其中对青霉素类、一代至四代头孢菌素的耐药率均超过60%，经ESBLs确证试验测定产ESBLs有84株，阳性率高达52.50%。对加酶抑制剂的内酰胺类复合制剂舒普深、特治星的敏感率仅为55.06%、56.05%，头霉素类的头孢西丁敏感率仅为55.63%，应引起临床
6、重视。尚未出现对碳青酶烯类耐药的肺炎克雷伯菌菌株。2.2经产Ap酶菌株初筛试验检出可疑产Ap酶细菌71株，经头孢西丁三维试验方法确证产Ap酶细菌5株。经三维抑制试验确证单产Ap酶菌株5株与三维试验相符，单产ESBLs菌株84株与ESBLs纸片确证试验相符。同时产Ap+ESBLs菌株18株，即产超超广谱内酰胺酶(SSBLs)，耐药情况非常严重，对-内酰胺类抗菌药物包括含酶抑制剂的复合制剂全部耐药，氨基糖苷类、喹诺酮类耐药率也有所进步，仅碳青酶烯类未出现耐药。3讨论超广谱内酰胺酶ESBLs属于Bush分类2be亚组，分子分类中属于A类酶，ESBLs是目前肠杆菌科细菌尤其是肺炎克雷伯菌对广谱头孢菌素
7、产生耐药的最主要原因，它由质粒介导，可使细菌对青霉素和一、二、三、四代头孢菌素以及单环菌素耐药，但对头霉素、碳青酶烯类及酶抑制剂克拉维酸敏感。Ap内酰胺酶是由革兰氏阴性杆菌产生的主要由染色体介导的丝氨酸头孢菌素酶组成的一个酶家族，属于Bush分类中的组类，能水解三代头孢，不被内酰胺酶抑制剂克拉维酸所抑制。研究说明:-内酰胺类抗菌药物头孢西丁和碳青酶烯抗菌药物亚胺培南是强有力的Ap酶诱导剂4。假如用头孢西丁或头孢西丁结合第三代头孢菌素治疗含有ap基因的肠杆菌科细菌如肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌，那么在治疗过程中会因为Ap酶的大量产生而导致治疗失败。理论上讲，四代头孢对产Ap酶菌株敏感，但假如同时产E
8、SBLs那么四代头孢也将无效。实验结果显示，我院新生儿病区别离出的160株肺炎克雷伯菌耐药情况非常严重，仅对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南尚未出现耐药，其他16种抗菌药物均出现不同程度的耐药，其中对新生儿适用的-内酰胺类抗菌药物耐药严重，一代至四代头孢菌素耐药率均超过60%，舒普深、特治星敏感率也仅有55.06%和56.05%。产超超广谱内酰胺酶(SSBLs)的肺炎克雷伯菌检出率高达11.25%(18/160)，针对这类细菌临床用药唯有选用亚胺培南、美罗培南，抗菌药物可选范围之局限令人担忧。由于临床大量广泛使用三代头孢、亚胺培南、美罗培南，在抗菌药物的选择压力下我院新生儿科已挑选出持续高产型Ap酶菌株，一旦处理不当，将持续在医院环境内扩散。假如进一步出现质粒介导的Ap酶菌株5，那么对院内感染将造成严重的威胁。因此，标准临床合理使用高级抗菌药物的任务已迫在眉睫。?抗菌药物临床应用指导原那么?6规定，碳青酶烯类药物不宜用于治疗轻症感染，更不可作为预防用药。因此临床对疑心细菌感染性肺炎的经历性用药或预防性用药应尽量防止碳青酶烯类的使用。
160株新生儿肺炎克雷伯菌的耐药性分析
