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1、 实验动物及动物实验基本操作技术SPF级屏障系统下操作规程实验动物的抓取与固定性别鉴定和年龄的判断妊娠检查第二节 实验动物的抓取与固定小鼠固定盒固定大鼠固定盒固定第三节(A)性别鉴定Female Male 第三节（B)年龄的大致判断日龄/d外观形态特征1仔鼠裸体鲜红3耳壳露出表皮4脐带瘢痕脱落5能翻身8能爬行日龄/d外观形态特征10能听到声音911全身被白毛，门齿长出1315眼皮张开，能跳跃，能抓取东西18以后能自行采食，独立生活日龄/d体重/g日龄/d初生 10 20 30 40 体重/g67 1725 3550 5590 100150日龄/d 50 60 70 80体重/g150210 1
2、70240 210270 240320 二、豚鼠 一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。日龄/d 初生 7 20 30 60 体重/g6080 100120 150200 170220 240300日龄/d 90 120 180体重/g330400 400470 520600 三、家兔 家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔
3、门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。五、犬 犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品
4、种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。年龄 犬齿更换和磨损情况2个月以下 仅有乳齿(白、细、尖)24个月更换门齿46个月更换犬齿(白，牙尖圆钝)610个月 更换臼齿1岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突第四节 妊娠检查 雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断(pregnancy diagnosis)。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发育，避免胎
5、儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要求准确，且及早确诊更为重要。第五节 处死方法 当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。一、大鼠和小鼠 1.颈椎脱臼法：右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头。将脊髓与脑髓拉断，鼠便立即死亡。2.断头法：用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉，鼠立即死亡。3.击打法：右手抓住鼠尾提起，用力摔击其头部，鼠痉挛后立即死去。或用木锤用力击打鼠头部也可致死。4
6、.急性大出血法：可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使鼠立即死亡。5.药物致死法：吸入一定量的一氧化碳、乙醚、氯仿等均可使动物致死。二、狗、兔、豚鼠 1.空气栓塞法：向动物静脉内注入一定量的空气，使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后，可在右心随着心脏的跳动使空气与血液成泡沫状，随血液循环到全身。如进到肺动脉，可阻塞其分支，进入心脏冠状动脉，造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快致死。一般兔、猫等静脉内注入2040ml空气即可致死。每条狗由前肢或后肢皮下静脉注入80150ml空气，可很快致死。2.急性失血法 先使动物轻度麻醉，如狗可按每公斤体重静脉注射硫喷妥纳2030mg，动物即很快
7、入睡。暴露股三角区，用锋利的杀狗刀在股三角区作一个约10cm的横切口，把股动、静脉全切断，立即喷出血液。用一块湿纱布不断擦去股动脉切周围处的血液和血凝块，同时不断的用自来水冲洗流血，使股动脉切口处保持畅通，动物35分钟内即可致死。采用此种方法，动物十分安静，对脏器无损伤，对活杀采集病理切片标本是一种较好的方法。3.破坏延脑法 如果急性实验后，脑已暴露，可用器具将延髓破坏，导致动物死亡。对家兔也可用木锤用力锤击其后脑部，损坏延脑，造成死亡。4.开放性气胸法 将动物开胸，造成开放性气胸。这时胸膜腔的压力与大气压力相等，肺脏因受大气压缩发生肺萎陷，纵隔摆动，动物窒息而死。5.化学药物致死法 静脉内注入一定量的氯化钾溶液，使动物心肌失去收缩能力，心脏急性扩张，致心脏驰缓性停跳而死亡。每条成年兔由兔耳缘静脉注入10氯化钾溶液510ml；每条成年狗由狗前肢或后肢下静脉注入2030ml。即可致死。静脉内注入一定量的福尔马林溶液，使血液内蛋白凝固，动物由于全身血液循环严重障碍和缺氧而死。每条成年狗静脉注入10%福尔马林溶液20ml即可致死。也可将福尔马林与酒精按一定比例配成动物致死液应用。
实验动物及动物实验基本操作技术
