DCD供体CYP3A5基因型分析法在肝移植术后应用的初步研究#

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1、中国科技论文在线DCD供体CYP3A5基因型分析法在肝移植术后应用的初步研究基金项目：基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（20100141110016）武汉市科技攻关项目（201161038344-01）；湖北省自然科学基金项目（2012FFA044）；武汉市科技局公共服务平台建设计划项目（2013060705010326）。 李玲1，叶啟发1,2，明英姿2，成珂2，王彦峰1作者简介：李玲（1985-），女，初级药师，主要研究方向：器官移植与肝胆外科学通信联系人：叶啟发（1954-），男，湖北襄樊，副院长，教授，主任医师，研究方向：肝胆外科，器官移植. E-mail: yqf_china

2、1.51.51.51.51.5 Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Hepatobiliary Diseases of Wuhan University, Transplant Center of Wuhan University, Hubei Key Laboratory of Medical Technology on Transplantation，Wuhan Hubei，430071; Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Hepatobiliary D

3、iseases of Wuhan University, Transplant Center of Wuhan University, Hubei Key Laboratory of Medical Technology on Transplantation，Wuhan Hubei，430071；The 3rd Xiangya Hospital of Central South University, Research Center of National Health Ministry on Transplantation Medicine Engineering and Technolog

4、y, Changsha, 410013;The 3rd Xiangya Hospital of Central South University, Research Center of National Health Ministry on Transplantation Medicine Engineering and Technology, Changsha, 410013;The 3rd Xiangya Hospital of Central South University, Research Center of National Health Ministry on Transpla

5、ntation Medicine Engineering and Technology, Changsha, 410013; Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Hepatobiliary Diseases of Wuhan University, Transplant Center of Wuhan University, Hubei Key Laboratory of Medical Technology on Transplantation，Wuhan Hubei，430071武汉大学中南医院，武汉大学肝胆疾病研究院，武

6、汉大学移植医学中心，移植医学技术湖北省重点实验室，湖北武汉，430071;武汉大学中南医院，武汉大学肝胆疾病研究院，武汉大学移植医学中心，移植医学技术湖北省重点实验室，湖北武汉，430071；中南大学湘雅三医院，卫生部移植医学工程技术研究中心，湖南长沙，410013;中南大学湘雅三医院，卫生部移植医学工程技术研究中心，湖南长沙，410013;中南大学湘雅三医院，卫生部移植医学工程技术研究中心，湖南长沙，410013;武汉大学中南医院，武汉大学肝胆疾病研究院，武汉大学移植医学中心，移植医学技术湖北省重点实验室，湖北武汉，430071430071;430071;430013;430013;4300

7、7115387041070;13875987051;13307318463;13054184410;15392891693027-67813489;027-67812988;027-67812988;027-67812988;027-67813489湖北省武汉市武昌区东湖路169号武汉大学中南医院肝胆疾病研究院二楼;湖北省武汉市武昌区东湖路169号武汉大学中南医院肝胆疾病研究院二楼; 湖南省长沙市岳麓区桐梓坡路138号中南大学湘雅三医院移植科;湖南省长沙市岳麓区桐梓坡路138号中南大学湘雅三医院移植科;湖北省武汉市武昌区东湖路169号武汉大学中南医院肝胆疾病研究院二楼liling.12345;

8、yqf_china;309743092;greet111;276059026李玲（1985-），女，初级药师，主要研究方向：器官移植与肝胆外科学;叶啟发（1954-），男，湖北襄樊，副院长，教授，主任医师，研究方向：肝胆外科，器官移植。;明英姿（1970-），女，副主任医师，器官移植与肝胆外科学。;成珂（1968-），男，副主任医师，器官移植与肝胆外科学。;王彦峰（1964-），男，主任医师，器官移植与肝胆外科学李玲;叶啟发;明英姿;成珂;王彦峰LI Ling;YE Qifa;MING Yingzi;CHENG Ke;WANG Yanfeng叶啟发1.51.51.5基金项目：高等学校博士学科点

9、专项科研基金（20100141110016）武汉市科技攻关项目（201161038344-01）；湖北省自然科学基金项目（2012FFA044）；武汉市科技局公共服务平台建设计划项目（2013060705010326）。1.51.51.51.51.51.51.51.51.51.51.51.51*|*期刊*|*Fung J, Kelly D, Kadry Z, et al. Immunosuppression in liver transplantation: beyond calcineurin inhibitors J. Liver Transpl, 2005, 11: 267. 2*|*期

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11、r and recipient ABCB1 and CYP3A5 gene polymorphisms in Chinese liver transplant patients J. Liver Transpl, 2006, 12 (5): 775-780.4*|*期刊*|*Rahsaz M, Azarpira N, Nikeghbalian S, et al. Association between tacrolimus concentration and genetic polymorphisms of CYP3A5 and ABCB1 during the early stage aft

12、er liver transplant in an Iranian population J. Exp Clin Transplant, 2012, 10 (1): 24-29.5*|*期刊*|*Shi Y, Li Y, Tang J, et al. Influence of CYP3A4, CYP3A5 and MDR-1 polymorphisms on tacrolimus pharmacokinetics and early renal dysfunction in liver transplant recipients J. Gene, 2013, 512 (2): 226-231.

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16、司浓度/剂量比的关系J. 器官移植, 2011, 2(1): 4-8, 13.14*|*期刊*|*李洋, 姜楠, 郭宇, 等. 供受体CYP3A5和MDRl基因多态性与肝移植术后患者他克莫司浓度/剂量比的关系J. 中山大学学报(医学科学版), 2012, 33(1): 49-53.|1|李玲|LI Ling|武汉大学中南医院，武汉大学肝胆疾病研究院，武汉大学移植医学中心，移植医学技术湖北省重点实验室，湖北武汉，430071| Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Hepatobiliary Diseases of Wuhan U

17、niversity, Transplant Center of Wuhan University, Hubei Key Laboratory of Medical Technology on Transplantation，Wuhan Hubei，430071|李玲（1985-），女，初级药师，主要研究方向：器官移植与肝胆外科学|湖北省武汉市武昌区东湖路169号武汉大学中南医院肝胆疾病研究院二楼|430071|liling.12345|027-67813489|15387041070*|2|叶啟发|YE Qifa|武汉大学中南医院，武汉大学肝胆疾病研究院，武汉大学移植医学中心，移植医学技术湖北

18、省重点实验室，湖北武汉，430071；中南大学湘雅三医院，卫生部移植医学工程技术研究中心，湖南长沙，410013| Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Hepatobiliary Diseases of Wuhan University, Transplant Center of Wuhan University, Hubei Key Laboratory of Medical Technology on Transplantation，Wuhan Hubei，430071；The 3rd Xiangya Hospital o

19、f Central South University, Research Center of National Health Ministry on Transplantation Medicine Engineering and Technology, Changsha, 410013|叶啟发（1954-），男，湖北襄樊，副院长，教授，主任医师，研究方向：肝胆外科，器官移植。|湖北省武汉市武昌区东湖路169号武汉大学中南医院肝胆疾病研究院二楼|430071|yqf_china|027-67812988|13875987051|3|明英姿|MING Yingzi|中南大学湘雅三医院，卫生部移植

20、医学工程技术研究中心，湖南长沙，410013|The 3rd Xiangya Hospital of Central South University, Research Center of National Health Ministry on Transplantation Medicine Engineering and Technology, Changsha, 410013|明英姿（1970-），女，副主任医师，器官移植与肝胆外科学。| 湖南省长沙市岳麓区桐梓坡路138号中南大学湘雅三医院移植科|430013|309743092|027-67812988|13307318463|4|

21、成珂|CHENG Ke|中南大学湘雅三医院，卫生部移植医学工程技术研究中心，湖南长沙，410013|The 3rd Xiangya Hospital of Central South University, Research Center of National Health Ministry on Transplantation Medicine Engineering and Technology, Changsha, 410013|成珂（1968-），男，副主任医师，器官移植与肝胆外科学。|湖南省长沙市岳麓区桐梓坡路138号中南大学湘雅三医院移植科|430013|greet111|027

22、-67812988|13054184410|5|王彦峰|WANG Yanfeng|武汉大学中南医院，武汉大学肝胆疾病研究院，武汉大学移植医学中心，移植医学技术湖北省重点实验室，湖北武汉，430071| Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Hepatobiliary Diseases of Wuhan University, Transplant Center of Wuhan University, Hubei Key Laboratory of Medical Technology on Transplantation，Wu

23、han Hubei，430071|王彦峰（1964-），男，主任医师，器官移植与肝胆外科学|湖北省武汉市武昌区东湖路169号武汉大学中南医院肝胆疾病研究院二楼|430071|276059026|027-67813489|15392891693DCD供体CYP3A5基因型分析法在肝移植术后应用的初步研究|The preliminary study on the application of DCD donor CYP3A5 genotype analysis in liver transplantation|基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（20100141110016）武汉市科技攻关项

24、目（201161038344-01）；湖北省自然科学基金项目（2012FFA044）；武汉市科技局公共服务平台建设计划项目（2013060705010326）。- 8 -（1. 武汉大学中南医院，武汉大学肝胆疾病研究院，武汉大学移植医学中心，移植医学技术湖北省重点实验室，湖北武汉，430071；2. 中南大学湘雅三医院，卫生部移植医学工程技术研究中心，湖南长沙，410013）摘要：目的 研究心脏死亡捐献供体基因型分析法对受体FK506的初始剂量指导意义，为肝移植FK506的早期使用提供个体化方案。方法 选择2010年3月-2013年3月心脏死亡捐献肝移植且CYP3A5基因型与供体不相同的受体3

25、6例，随机均分成实验组与对照组，实验组根据供体CYP3A5基因型不同调整术后FK506的初始剂量。对照组按照传统方法根据经验给药。结果 实验组术后7天平均血药浓度为(7.471.83) ng/mL，达目标血药浓度范围占72.2%。对照组肝移植术后第7天平均血药浓度为(8.685.14) ng/ml，达目标血药浓度范围占38.9%。实验组需要调整FK506剂量的占22.2%，而对照组占55.6%。两组术后7天目标浓度范围、需要调整剂量的百分比有统计学差异（P=0.044，P=0.040）。结论 根据DCD供体CYP3A5基因型不同，可以科学调整FK506初始剂量。使移植患者术后尽早达到目标血药浓

26、度，减少排斥反应发生率，降低药物毒副作用，实现FK506个体化用药。关键词：肝移植；心脏死亡供体；CYP3A5基因；个体化用药中图分类号：R452The preliminary study on the application of DCD donor CYP3A5 genotype analysis in liver transplantationLI Ling1, YE Qifa1,2, MING Yingzi2, CHENG Ke2, WANG Yanfeng1(1. Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Hepatobi

27、liary Diseases of Wuhan University, Transplant Center of Wuhan University, Hubei Key Laboratory of Medical Technology on Transplantation，Wuhan Hubei，430071;2. The 3rd Xiangya Hospital of Central South University, Research Center of National Health Ministry on Transplantation Medicine Engineering and

28、 Technology, Changsha, 410013)Abstract: Objective To investigate the effect of the genotypic analysis of donor from cardiac death donation on the initial dose of FK506 for liver transplant recipients and provide liver transplantation patients with individualized administration for the early use of F

29、K506. Method 36 recipients with a different genotype of CYP3A5 from cardiac death donors were collected from March 2010 to February 2013. The matched recipients were randomly divided into experiment group and control group. There was an adjustment of initial doses of FK506 according to the donors di

30、fferent CYP3A5 genotypes in experiment group but the control group not. Results For experiment and control group, the average FK506 blood concentrations in the 7th days after operation were (7.471.83) ng/mL and (8.685.14) ng/ml and the percent of reached optimal FK506 concentrations were 72.2% and 3

31、8.9%. Furthermore, 22.2% and 55.6% recipients needed adjustments of FK506 concentrations. There were significant differences between two groups in the 7th FK506 blood concentrations and the percentage of needing adjustment (P=0.044，P=0.040). Conclusion individualized adjustment FK506 initial doses o

32、f recipients according to cardiac death donors different CYP3A5 genotypes was benefit for reaching optimal concentrations as soon as possible and could decrease the rate of rejection, reduce the side effects.Key words: cardiac death donors; CYP3A5 gene; liver transplantation; individualized medicati

33、on0 引言他克莫司（Tacrolimus, Tac, FK506），作为强有力的免疫抑制剂，其治疗窗窄，在生物利用度和药代动力学等方面存在明显的个体差异。如何合理使用FK506仍是移植医生平衡肝移植患者术后抗排斥与降低毒副作用的棘手问题1。前期研究报道，影响肝移植受体药代动力学参数个体差异的最主要原因是供体而非受体的CYP3A5*3多态性2-3。且CYP3A5*3多态性是唯一对肝移植受体FK506起始用量具有明确指导意义的基因多态性4-6。截至目前，关于CYP3A5基因型与肝移植术后FK506的药代动力学关系大多集中于横断面和回顾性研究。国内外尚无依据心脏死亡捐献（donation afte

34、r cardiac death, DCD）供体CYP3A5*3多态性调整肝移植术后FK506初始用量的前瞻性研究报道。本文拟通过肝移植术前检测DCD供体CYP3A5基因型，比较根据供体基因型进行FK506初始剂量调整组与FK506初始剂量不调整组肝移植患者用药后临床疗效差别，并初步探讨基因多态性个体化用药所带来的社会经济效益。1 材料、对象和方法1.1 研究对象选择2010年3月-2013年2月，作者单位实施的心脏死亡捐献肝移植术36例患者为研究对象，所有患者均为首次肝移植术，术前基础疾病为终末期肝硬化、肝脏恶性疾病、先天性代谢疾病和急性或亚急性肝功能衰竭等终末期肝病。研究符合医院人体实验委员

35、会所制定的伦理学标准，取得伦理委员会的批准同意，并与患者或其家属签署知情同意书。1.2 CYP3A5基因型分析供体DNA提取：术前抽取肝移植供体体静脉血3 mL，置于乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管中。按照DNA抽提试剂盒（天根生化科技（北京）有限公司，北京）说明书提取外周血基因组DNA，于48保存备用。引物设计及PCR扩增：CYP3A5具体引物设计为：前引物：5- TCCCCTCAAGTCCTCAGA-3；后引物：5- CCAGCACAGGGAGTTGAC-3。按照Fermentas公司生产的PCR扩增体系说明书配制反应体系。PCR反应过程如下：94预变性5 min后，94变性30 s，56退

36、火30 s，72延伸30 S，共循环30次，最后再72延伸10 min。进行目的基因片段扩增。2.5%琼脂糖凝胶电泳后UV下观察扩增产物条带。酶解法纯化PCR扩增产物。双脱氧末端终止测序法进行CYP3A5测序：纯化产物按照ABI公司测序PCR扩增体系配制，按照96预变性1 min 后，96 30 s，56 退火30 s，72 延伸30 s，共循环25次实施测序PCR扩增。将扩增后产物采用乙醇沉淀法纯化，上ABI3130仪器进行检测。检测结果使用Chrome软件进行分析。1.3 实验分组及免疫抑制剂方案严格筛选与DCD供体CYP3A5*1/*3基因型不相同的肝移植受体36例，随机均分为实验组和对

37、照组。实验组和对照组肝移植术后均采用FK506+吗替麦考酚酯+强力松免疫抑制方案。给予强力松冲击3-5天，待肝功能指标谷丙转氨酶（alanine aminotransferase, ALT）与谷草转氨酶（aspartate aminotransferase, AST）值回升时，给予FK506与吗替麦考酚酯抗排除治疗。实验组根据供体CYP3A5基因型的不同调整肝移植术后FK506的初始剂量，快代谢型（CYP3A5*1/*1型与CYP3A5*1/*3型）为0.083 mg/(kgd)，慢代谢型（CYP3A5*3/*3）为0.050 mg/ (kgd)。对照组按照传统的给药剂量，快代谢型和慢代谢型起

38、始剂量均采用0.067 mg/ ( kgd)。实验组与对照组吗替麦考酚酯和强力松的使用方案无差别。术后第7天开始监测FK506全血药物浓度，以后根据目标浓度来调整FK506剂量，术后3月内血药谷值浓度控制在（610）ng/mL左右，以后控制在（58）ng/mL左右。1.4 FK506全血谷浓度检测患者于前一日晚20:00服用FK506，次日早晨8:00服药前用含有15% EDTA抗凝剂的紫色采血管抽取外周血2 mL。在雅培i2000仪器(购自美国雅培公司)上，采用化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay, CIA)测定全血FK506血药浓度。所有患者均未服

39、用其他能明显影响CYP3A5活性的药物及食物。1.5 术后随访及实验主要观测指标患者住院的2周内，收集患者肝移植术后FK506的给药剂量、血药浓度、调整剂量的次数。出院后每隔一周，定期随访至少3个月。记录3个月内FK506剂量、血药浓度、体重、肝肾功能、血糖、血常规、乙肝DNA定性定量、甲胎蛋白等指标，记录有无急性排斥反应发生，有无精神异常、失眠、胃肠道反应、脱发、手颤等毒副作用发生。比较实验组和对照组两组肝移植术后7天内达到目标血药浓度范围（610 ng/mL）的百分比、需调整药物剂量的百分比以及3月内急性排斥反应和药物毒副作用（精神异常、失眠、胃肠道反应、脱发、手颤）发生率之间的差异，并比

40、较两组移植术后7天内服用FK506所需的费用及因治疗急性排斥所需的特殊免疫抑制剂的治疗费用间的差异。1.6 统计分析用非参数统计方法进行非正态分布计量数据的比较；用2检验分析两组受体等位基因分布，是否符合Hardy-Weinberg平衡；两组间达到有效血药浓度百分比、需调整药物剂量的百分比、3月内发生急性排斥反应和药物毒副作用发生率比较采用2检验，两组间治疗费用的差异采单因素方差分析进行比较。所有统计分析均通过SPSS 18.0统计软件完成。P0.05认为有统计学意义。2 结 果2.1 供受体一般资料和基因型情况实验组与对照组肝移植患者的36例肝源均来自于心脏死亡捐献供体。其中男性22例，女性

41、14例。年龄为（1362）岁，均为脑外伤、脑肿瘤破裂出血，从脑死亡过度到心脏死亡患者。移植之前肝脏功能正常，病理学检查无明显异常。根据入选及排除标准，共入选受者病例36例。实验组18例，其中男性10例，女性8例，平均年龄（42.37.6）岁，平均体重（54.886.53）kg，*1/*1型3例，*1/*3型6例，*3/*3例9例。对照组18例，其中男性12例，女性6例，平均年龄（41.78.1）岁，平均体重（56.948.02）kg，*1/*1型2例，*1/*3型6例，*3/*3例10例。通过2检验分析，两组不同基因型的分布符合Hardy-Weinberg平衡。两组受体的性别（P = 0.49

42、4）、年龄（P = 0.819）及体重（P = 0.399）比较无显著差别。2.2 CYP3A5不同基因型肝移植受体测序代表图通过脱氧核糖核酸末端终止测序法对供受体DNA标本进行CYP3A5*1/*3基因分型，结果如图1。 图1 CYP3A5*1/*3突变不同基因型测序结果图注：A图：基因型为AA ，代表CYP3A5*1/*1野生型纯合子；B图：基因型为AG，代表CYP3A5*1/*3突变性杂合子个体；C图：基因型为GG，代表CYP3A5*3/*3突变型纯合子。图中灰色部分表示突变位点。2.3 术后第7天FK506浓度及需要调整剂量的病人比例实验组肝移植术后第7天平均血药浓度为(7.471.8

43、3) ng/mL，浓度范围（4.112.8）ng/ mL。对照组肝移植术后第7天平均血药浓度为(8.685.14) ng/ mL，浓度范围（3.022.6）ng/ mL。两组受体不同基因型患者肝移植术后第7天FK506浓度范围及需要调整剂量的病例比例详见表1。实验组达到FK506目标血药浓度范围的占72.2%（13/18），对照组仅38.9%（7/18），实验组需要调整FK506剂量的占22.2%（4/18），对照组占55.6%（10/18）。两组比较发现，移植术后第7天达到目标浓度范围的病例百分比及需要调整剂量的病例百分比均有统计学差异（P=0.044，P=0.040）。表1 两组肝移植受体

44、第7天FK506 谷浓度范围和需要调整剂量病例数 实验组对照组*1/*1和*1/*3 *3/*3*1/*1和*1/*3*3/*3术后第7天谷浓度 6 ng/ml2(22.2%)1(11.1%)4(50.0%)1(10.0%) 610 ng/ml7(77.8%)6(66.7%)3(37.5%)4(40.0%) 10 ng/ml0(0%)2(22.2%)1(12.5%)5(50.0%)需要调整剂量病例数 增加剂量2(22.2%)1(11.1%)4(50.0%)1(10.0%) 减少剂量0(0%)1(11.1%)1(12.5%)4(40.0%) 剂量维持不变7(77.8%)7(77.8%)3(37.

45、5%)5(50.0%)2.4 两组急性排斥反应和毒副作用肝移植术后3个月内实验组与对照组急性排斥反应的发生率分别为22.2%和27.8%，两组FK506毒副作用的发生率分别为11.1%和22.2%，实验组均低于对照组，但两组比较均无统计学差异（P=0.700，P=0.371），见表2。表2 两组肝移植受体FK506疗效比较组别7d达到目标浓度范围百分比需调整剂量的百分比3月内急性排斥反应发生率3月内毒副作用发生率 实验组 72.2%(13/18)22.2%(4/18)22.2%(4/18)11.1%(2/18) 对照组 38.9%(7/18)55.6%(10/18)27.8%(5/18)22.

46、2%(4/18)P 值 0.0440.0400.7000.3712.5 两组肝移植术后早期治疗费用比较实验组*1/*1和*1/*3患者7天内每人FK506平均用量及平均药费用高于对照组*1/*1和*1/*3患者。但由于实验组患者初始剂量增加，其发生急性排斥反应产生的药费，*1/*1和*1/*3患者显著高于对照组*1/*1和*1/*3患者。而实验组*3/*3型患者FK506剂量及药费则明显要低于对照组*3/*3型患者，而用于治疗急性排斥反应的药费两组*3/*3型患者间比较尚无明显差异。表3 两组肝移植受体早期治疗药费用比较实验组对照组*1/*1和*1/*3*3/*3*1/*1和*1/*3*3/*

47、3平均体重54.2955.4957.3656.60术后7天每人FK506平均用量mg352128287天内FK506每人平均药费（元）1174.38699.46779.84740.51急性排斥治疗平均药费（元）7843.52229.412391.51249.03 讨 论在我国，肝移植术后免疫抑制剂的临床应用一般采用经验性给药，即FK506的初始剂量通常按0.067 mg/( kgd) 给药，然后根据治疗药物监测（therapeutic drug monitoring, TDM）结果调整剂量。但TDM仅在服用药物且达到稳态血药浓度后方能进行，存在滞后性7。而且关系到围手术期肝移植患者预后恢复好坏

48、的FK506的初始剂量仍然不能确定。结合前期研究发现8，自从Jounaidi等发现CYP3A5*1以来，随后CYP3A5*2,*3等也逐渐被发现。但仅CYP3A5*3是引起个体间CYP3A5蛋白差异的原因。其主要通过CYP3A5基因剪接位点隐藏，使含有131个核苷酸的基因序列插入到mRNA中，引起终末密码子过早剪切CYP3A5蛋白，最终导致CYP3A5酶彻底失活9。CYP3A5*3属于影响FK506代谢的遗传因素，不会因为时间而改变，可以在移植术前进行测定，实现肝移植受体免疫抑制剂FK506初始剂量的个体化治疗。在人体，CYP3A5酶主要分布于肝脏及肾脏，但肝移植手术彻底改变了移植受体肝脏CY

49、P3A5酶的遗传特性。供体肝脏CYP3A5*1/*3基因多态性及受体肠道CYP3A5*1/*3基因多态性对术后FK506的代谢的影响尚无明确定论。前期大量研究表明10,11，受体CYP3A5*1/*3基因多态性对FK506的代谢存在明显影响。我们推测主要与受体肠道CYP3A5酶发挥作用有关。另有研究报道12，供体肝脏CYP3A5*1/*3基因多态性与FK506服用剂量的个体化差异密切相关。李洋13,14等同时研究受体及供体CYP3A5*1/*3基因多态性对FK506代谢的影响发现，供体CYP3A5*1/*3基因多态性明显改变了FK506代谢的时间-浓度曲线，而受体CYP3A5基因型则不具有明显

50、作用。本研究选择CYP3A5*1/*3基因多态性与无血缘关系的DCD供体不相同的肝移植受者为对象，严格控制了DCD供受体间CYP3A5基因型不一致性，为证明供体肝脏CYP3A5*1/*3基因多态性对FK506血药浓度的影响奠定了遗传基础。此外，本实验选取了前瞻性设计分析方法，严格按照入排标准选择实验对象。且改变了给药后评估的回顾性分析方法，首次按照基因型不同直接给予受体FK506相应的初始剂量，对比经验性确定FK506初始剂量而言，其后期疗效评估更具有临床指导意义。参考文献 1 Fung J, Kelly D, Kadry Z, et al. Immunosuppression in live

51、r transplantation: beyond calcineurin inhibitors J. Liver Transpl, 2005, 11: 267. 2 Yu S, Wu L, Jin J, et al. Influence of CYP3A5 gene polymorphisms of donor rather than recipient to tacrolimus individual dose requirement in liver transplantation J. Transplantation, 2006, 81 (1): 46-51.3 Wei-lin W,

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53、netic polymorphisms of CYP3A5 and ABCB1 during the early stage after liver transplant in an Iranian population J. Exp Clin Transplant, 2012, 10 (1): 24-29.5 Shi Y, Li Y, Tang J, et al. Influence of CYP3A4, CYP3A5 and MDR-1 polymorphisms on tacrolimus pharmacokinetics and early renal dysfunction in l

54、iver transplant recipients J. Gene, 2013, 512 (2): 226-231.6 Provenzani A, Notarbartolo M, Labbozzetta M, et al. The effect of CYP3A5 and ABCB1 single nucleotide polymorphisms on tacrolimus dose requirements in Caucasian liver transplant patients J. Ann Transplant, 2009, 14 (1): 23-31.7 张小东. CYP3A基因

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56、): 808-815.10 刘其雨, 李立, 李晓彦. CYP3A5在肝移植术后他克莫司个体化治疗中的意义J. 中国普外基础与临床杂志, 2010, 17 (8): 795-802.11 金昭, 张伟霞, 陈冰, 等. CYP3A5和MDRl基因多态性与肝移植病人他克莫司浓度/剂量比的关系J. 中国药学杂志, 2008, 43(9): 649-653.12 余松峰, 吴丽花, 金晶, 等. 供体CYP3A5基因多态性影响肝移植术后FK506的个体化用药J. 中国药学杂志, 2007, 42(4): 314-317.13 李洋, 张琪, 姜楠, 等. 供受体CYP3A5基因多态性与肝移植患者术后他克莫司浓度/剂量比的关系J. 器官移植, 2011, 2(1): 4-8, 13.14 李洋, 姜楠, 郭宇, 等. 供受体CYP3A5和MDRl基因多态性与肝移植术后患者他克莫司浓度/剂量比的关系J. 中山大学学报(医学科学版), 2012, 33(1): 49-53.