《葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎大鼠模型的建立》由会员分享，可在线阅读，更多相关《葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎大鼠模型的建立（5页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎大鼠模型的建立赵平，董蕾，罗金燕，马卉，管海涛，商鹤玲【关键词】结肠炎Establishentfdextransulfatesdiuinduedulerativelitisdelinrats【Abstrat】AI:Testablishtheratdelfulerativelitis(U).ETHDS:Theratserefirstgiven40g/Ldextransulfatesdiu(DSS)indrinkingaterfr7dandthengivennlyaterfr10d.Thediseaseativityindex(DAI)falltheratsasevalu
2、ateddaily.Theratserekillednday8,13and18andthelesinsreandhistlgialsreflnereevaluated.Segentsfdistallnereadequatelypreparedfrtransissineletrnirspibservatins.TheEightindexfeu,ln,thyusandspleenerealulatedandtheyelperxidase(P)ativityfretuaseasured.RESULTS:Ratsreeiving40g/LDSSslutinfr7ddevelpeddiarrheaand
3、psitivefealultbld.Inflaatinflnainlyinvlvedtheuusebraneandsubusa.Falersinsftheepitheliu,gbletellsdepletin,destrutinfryptandneutrphilinfiltratinerebserved.TheinreasefPativity(8.843.67)nkat/gtissuevs(127.1927.84)nkat/gtissue,P0.01andeightfspleen(3.451.00)g/gvs(5.071.31)g/g,P0.05asalsbserved.Afterreplai
4、ngtheDSSslutinithater,thesyptsandlnipathlgialhangesfratseregraduallydisappearedandthePativitysignifiantlydereasedP0.05.NLUSIN:ThislitisdelinratsappearstsharenearlyalltherphlgialharateristisithhuanU.【Keyrds】diseasedels,anial;litis,ulerative;dextrasulfatesdiu【摘要】目的:建立大鼠溃疡性结肠炎U模型.方法：给SD大鼠饮用40g/LDSS溶液7d
5、，然后改正常饮水10d.每日进展疾病活动指数(DAI)评分.于实验8,13和18d分别处死45只，行组织学大体评分、组织病理评分及透射电镜观察.计算盲肠、回盲部至肛门段结肠、胸腺、脾脏质量指数并测直肠髓过氧化物酶P含量.结果：大鼠饮用40g/L的DSS7d均出现腹泻、隐血试验阳性.可见炎症主要累及黏膜和黏膜下层，部分外表上皮脱落，上皮内杯状细胞减少，隐窝破坏，浸润的炎症细胞以中性粒细胞为主.伴有P升高(8.843.67)nkat/gvs(127.1927.84)nkat/g,P0.01及脾脏增大(3.451.00)g/gvs(5.071.31)g/g,P0.05.停药后病症及结肠病变逐渐恢复，
6、P活性显著降低P0.05.结论：此模型病理改变类似人U.【关键词】疾病模型，动物；结肠炎，溃疡性；葡聚糖硫酸钠0引言溃疡性结肠炎ulerativelitis,U在我国的发病率逐渐增高.其确切的病因和发病机制至今尚不完全清楚,缺乏有效的根治方法.因此建立U动物模型,对研究U的病因、病理机制及新药开发具有重要意义.葡聚糖硫酸钠(dextransulfatesdiu,DSS)诱导的U动物模型与人类U的病理形态极为近似，但不同物种及不同浓度DSS所诱导的U的病变特征不同.我们选用SD大鼠建立U动物模型，并观察该模型不同时期的病症、病理等改变如下.1材料和方法1.1材料安康雄性SD大鼠26只，体质量18
7、0200g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供.葡聚糖硫酸钠Siga公司消费,r5000,硫磺含量150200g/kg.髓过氧化物酶yelperxidas，P检测试剂盒购自南京建成生物研究所.H600透射式电子显微镜由日本日立公司消费.1.2方法大鼠随机分为DSS模型组n=20和正常对照组n=5，DSS模型组饮用40g/LDSS溶液7d诱发急性结肠炎,然后改正常饮水10d.正常对照组大鼠正常饮水.DSS模型组每日记录大鼠体质量、大便性状、隐性或显性出血情况,进展疾病活动指数(DAI)评分1.于实验8n=5,13n=5和18dn=4用200g/L乌拉坦7L/kgip麻醉，剖腹观察结肠外观，延系
8、膜侧剖开结肠，行组织学大体评分2.取盲肠、回盲部至肛门段结肠、胸腺、脾脏称质量，计算体质量指数.取升结肠、横结肠、远段结肠各1.5,用40g/L甲醛溶液固定,切片,HE染色，行组织病理评分3.取距肛门3处直肠黏膜行透射电镜观察.称取直肠黏膜100g，-80保存，按P试剂盒说明进展检测.统计学处理：使用SPSS10.0软件行统计学处理.数据以xs表示，采用neayANVA分析.P0.05为差异有显著性.2结果大鼠饮用40g/LDSS37d出现急性结肠炎病症，腹泻、隐血试验阳性最早于3d出现，肉眼血便最早于4d出现.动物体质量明显下降，5d除血便极轻的2只大鼠体质量稍增加和1只大鼠明显增加外，其余
9、17只体质量仍减轻.饮用DSS过程中大鼠出现毛发色泽灰暗,精神萎靡,食量下降等.停药后12d，腹泻、血便迅速好转.模型组DAI值由2d的0.560.41迅速升至7d的2.040.77，差异有显著性P0.01.79d死亡6只，1只死于肠坏死，1只死于衰竭，4只死于肠道出血.实验8d见大肠缩短，肠壁明显增厚,管壁僵硬，肠黏膜广泛充血、水肿，部分有腐败、出血，可见明显溃疡面.病变以回盲部及远段结肠为重.远段结肠的不规那么溃疡及腐败多见于距肛门缘34内,病变自下向上逐渐减轻.实验13d，结肠病变有所恢复，仍有部分充血、水肿和溃疡.实验18d，结肠病变根本恢复，溃疡愈合，仍有部分充血、水肿，结肠损伤评分
10、较8d显著减低P0.01,Tab1.表1DSS所致结肠炎恢复过程中结肠损伤及组织损伤评分略2.1组织病理改变实验8d越近肛门侧病理改变越明显，与肉眼观察一致.光镜下可见炎症主要累及黏膜、黏膜下层，部分外表上皮脱落，上皮内杯状细胞减少，隐窝破坏，浸润的炎症细胞以中性粒细胞为主,符合急性炎症的组织病理改变Fig1A.实验13d，光镜下可见较局限的隐窝破坏伴上皮再生修复及腺体增生，隐窝变形、排列紊乱.实验18d，黏膜根本恢复正常，仍有少量炎细胞浸润.升结肠、横结肠组织损伤评分各时间段差异无显著性(Tab1).电镜观察发现正常对照组结肠上皮细胞微绒毛完好，细胞连接和细胞器未见损伤，杯状细胞分泌旺盛.D
11、SS模型组结肠上皮细胞有坏死脱落，细胞受损严重，表现为微绒毛稀疏、紊乱、断裂乃至脱落，线粒体肿胀，粗面内质网扩张，核染色体边集明显.杯状细胞明显减少，残留的杯状细胞水肿明显，线粒体肿胀、嵴突减少、嵴断裂，内质网扩张Fig1B.2.2脏器体质量指数和P活性改变实验7d后，盲肠、结肠、脾脏体质量指数显著增加，停药后逐渐恢复Tab2.在DSS致大鼠急性肠炎过程中胸腺体质量指数无明显变化.实验7d后，P活性显著升高，停药5d后显著降低Tab2.表2DSS结肠炎恢复过程中脏器体质量指数及P活性略3讨论大鼠饮用40g/LDSS7d均出现急性结肠炎病症，腹泻、隐血试验阳性最早于3d出现，肉眼血便最早于4d出
12、现.大体观察见肠壁明显增厚，管壁僵硬，肠黏膜广泛充血、水肿，部分有腐败、出血，可见明显溃疡面.病变以盲肠及远段结肠为重.光镜下可见炎症主要累及黏膜、黏膜下层，部分外表上皮脱落，上皮内杯状细胞减少，隐窝破坏，浸润的炎症细胞以中性粒细胞为主,符合急性炎症的组织病理改变.这些改变与人类的U相似1,2.DSS致大鼠U模型简便易行，让实验动物自由饮用DSS配成水溶液即可，重复性好,成模率达100%，成功率高.以往研究说明，人为反复运用DSS刺激，可诱导大鼠出现类似人类的急性期和缓解期交替出现的变化，与人类病变、病程相似1.因此，DSS致大鼠U模型是较为成功的U动物模型.我们观察到单次给DSS，停药后结肠
13、病变逐渐好转，至停药后10d，结肠病变根本恢复，溃疡愈合，仅有部分充血、水肿.故如应用该模型进展药物干预治疗，应注意治疗时机的选择.DSS诱导大鼠结肠炎模型与人类U的病症及病理改变均相似.该模型制作简单、重复性好，除可用于U发病机制的研究外，还可用于开发新型U治疗药物的研究，如黏膜保护剂、抗TNF抗体3,4等有潜在治疗作用的药物.【参考文献】1sanN,AdaiD,AhrneS,etal.dulatinftheeffetfdextransulfatesdiuinduedautelitisbytheadinistratinfdifferentprbitistrainsfLatbaillusand
14、BifidbateriuJ.DigDisSi,2022;49(2):320-327.2LukHH,KJK,FungHS,etal.DelineatinftheprtetiveatinfzinsulfatenulerativelitisinratsJ.EurJPharal,2002;443(13):197-204.3IbaY,SugitY,KaEi,etal.PssiblerlefusalastellsinthereverypressflitisinduedbydextransulfatesdiuinratsJ.IntIunpharal,2022;3(4):485-491.4urakaiA,HayashiR,TakanaT,etal.Suppressinfdextransdiusulfateinduedlitisiniebyzerubne,asubtrpialgingersesquiterpene,andniesulide:SeparatelyandinbinatinJ.BihePharal,2022;66(7):1253-1261.
葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎大鼠模型的建立
