川农动物医学考博资料

《川农动物医学考博资料》由会员分享，可在线阅读，更多相关《川农动物医学考博资料（16页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、1999年博士1. 超二级结构/结构域 在蛋白质分子中，特别是球状蛋白质中，由若干相邻的二级结构单元（即螺旋、折叠片和转角等）彼此相互作用组合在一起，形成有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件单元，称超二级结构。对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个或两个以上相对独立的三维实体缔合而成三级结构，这种相对独立的三维实体称结构域。2. RNase / ribozyme有一类RNA分子本身具有自我催化功能，可完成rRNA的剪接。这种具有催化作用的RNA被称为核酶（ribozyme）。 3. 导肽/信号肽导肽：又称转运肽(transit peptide)或导向序列(targe

2、ting sequence)，它是游离核糖体上合成的蛋白质的N-端信号。信号肽：由编码分泌蛋白的mRNA在翻译时首先合成的N端一段带有疏水氨基酸的多肽，它的主要作用是引导新生的多肽进入内质网腔，随后被信号肽酶水解。 4. Km / Tm Km是米氏常数，等于酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度。Km值是酶的特征性常数，只与酶的性质，酶所催化的底物和酶促反应条件(如温度、pH、有无抑制剂等)有关，与酶的浓度无关。酶的种类不同，Km值不同，同一种酶与不同底物作用时，Km值也不同。 Tm值是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。 5. 化学酶工程/生物酶工程化学酶工

3、程：通过化学修饰、固定化处理、甚至通过化学合成法等手段，改善酶的性质以提高催化效率及降低成本。它包括自然酶、化学修饰酶、化学人工酶及固定化酶的研究和应用。生物酶工程：生物酶工程主要包括三个方面：1.用DNA重组技术(即基因工程技术)大量地生产酶(克隆酶)；2.对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶(突变酶)；3.设计新的酶基因，合成自然界不曾有过的、性能稳定、催化效率更高的新酶。 6. PCR / RAPD聚合酶链式反应（PCR）是利用DNA片段旁侧两个短的单链引物，在体外快速扩增特异DNA片段的技术。随机扩增多态DNA技术(RAPD)是用任意非特异性的单一引物在低温条件下与模板复性并进行PCR扩增

4、，可对研究对象的基因组DNA作多态性分析，获得DNA指纹图谱。7. 主动运输/被动运输 主动运输是指通过细胞膜本身的某种耗能过程,将某种物质分子由膜的低浓度一侧移向高浓度一侧的过程。被动运输：指通过简单扩散或协助扩散实现物质从浓度高处经质膜向浓度低处运输的方式。运输速率依赖于膜两侧被运送物质的浓度差及其分子大小、电荷性质等。不需要细胞代谢供应能量。 8. 盐析/透析 一般来说，所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程叫盐析。与低分子物质比较，蛋白质分子扩散速度慢，不易透过半透膜，粘度大，在分离提纯蛋白质过程中，我们可利用蛋白质的这一性质，将混有小分子杂质的蛋白质溶液放于半透膜制

5、成的囊内，置于流动水或适宜的缓冲液中，小分子杂质皆易从囊中透出，保留了比较纯化的囊内蛋白质，这种方法称为透析(dialysis)。 9. 第一信使/第二信使第一信使是指各种细胞外信息分子，又称细胞间信号分子即细胞因子，诸如内分泌激素，神经递质和神经肽，局部化学介导因子（神经生长因子，旁分泌激素如前列腺素、组胺与嗜伊红趋化因子等），气体信号分子（、），以及免疫细胞产生的抗体、补体与免疫细胞因子。第二信使：通常把激素称为第一信使，激素与靶位受体结合后，生成某些物质，这些物质是联系激素引起生物学效应的重要物质，称为第二信使。例如：cAMP、cGMP等。二、 简答题（任选作2题，每题8分，共16分）

6、1. 今有一蛋白质混合物，各组分基本性质如下： A: M=12,000 PI=10 B: M=62,000 PI=4 C: M=28,000 PI=7 D: M=9,000 PI=5若不考虑其它因素影响，当它们（A）流经象DEAE-纤维素这样的阴离子交换剂，用线性梯度洗脱时；（B）流经Saphadex G-50排阻层析时，这些蛋白质的洗脱顺序如何（A）流经象DEAE-纤维素这样的阴离子交换剂，用线性梯度洗脱时洗脱顺序是，B、D、C、A，因为使用阴离子交换剂说明蛋白质带负电荷，溶液的pH大于它们的等电点，即大于10，而溶液的pH值距蛋白质等电点越远，蛋白质的电荷越多，洗脱越困难。（B）流经Sap

7、hadex G-50排阻层析时，这些蛋白质的洗脱顺序是B、C、A、D，即根据分子量从大到小的顺序洗脱。 2. 原核生物由30S小亚基和50S大亚基组成，但核糖体本身为70S而不是80S,说明理由。3. 磺胺药物作为一种抗菌素可抑制微生物生长，对人体副作用比较小，有机磷农药不仅可杀死害虫，对人也有很大的毒性，为什么？磺胺类药物通过竞争性抑制二氢叶酸还原酶，干扰核酸合成，从而影响细菌生长繁殖，发挥其抑菌作用。由于竞争性抑制属于可逆抑制，能用物理方法除去抑制剂而使酶复活，故对人体的副作用较小。而有机磷农药如 605、敌百虫、DDV等，能抑制某些蛋白酶及酯酶活力，与酶分子活性部位的丝氨酸羟基共价结合，

8、从而使酶失活。这类化合物强烈地抑制对神经传导有关的胆碱酯酶活力，使乙酰胆碱不能分解为乙酸和胆碱，引起乙酰胆碱的积累，使一些以乙酰胆碱为传导介质的神经系统处于过渡兴奋状态，引起神经中毒症状，因此这类有机磷化合物又称为神经毒剂，能杀死害虫，对人也有很大的毒性。4.1958年Sanger完成了胰岛素A链和B链氨基酸顺序列的分析，奠定了蛋白质一级结构测定的方法基础；1975年Sanger 又建立了DNA测序的快速方法，他前后提出的方法在战略上有什么不同？他用桑格试剂（Sangers reagent）（2,4-dinitrofluorobenzene），可附在氨基酸上，從而破壞蛋白質鏈，形成較小的片段，

9、並可以用紙色層分析分析片段，如此一來就可以用簡單又快速的方法來分析。因此Sanger成功的測出胰島素的結構並在1958年為此獲得他的第一座化學諾貝爾獎。 三、问答题（任选作4题，每题11分，共44分）1.肌红蛋白和血红蛋白的结构有何差异？试阐述其结构和功能的相关性。肌红蛋白由一条多肽链和一个辅基血红素构成，相对分子质量为16700，含153个氨基酸残基。除去血红素的脱辅基肌红蛋白称珠蛋白。血红蛋白由四个多肽亚基组成，两个是一种亚基，两个是另一种亚基。每个亚基都有一个血红素基和一个氧结合部位。 2.生物膜主要有哪些生物功能？任举一例阐述膜结构和功能的相互关系。（同2000年 三，3题）3.稳定性

10、同位素示综法和放射性同位素示综法有什么异同？举例说明它们在代谢研究中的应用。根据同位素示踪所标记核素的稳定性和放射性，分为稳定性同位素示综，如15N、13C等和放射性同位素示综，如3H、14C、32P等。 稳定同位素示踪放射同位素示踪所利用的特性同位素质量差异射线灵敏度同常规高成本高高安全性安全不安全污染无有同位素效应低高应用：如Aruna等（1992）用65Zn研究了山羊日粮中锰含量对锌吸收串的影响；陈颂华等（1991）利用65研究了Zn在黄鳝血液及主要器官中的分布和代谢；陈堆松等（1991）利用55+59Fe研究了蛋氨酸铁饲喂妊母治后向仔猪体内的转移；楼洪章等（1991）利用32P研究了玉

11、米螟精子的转移；Gislason等（1992）用59Fe研究了仔猪补铁的吸收利用；王中华等（2000）应用14C标记的丙酸和葡萄糖研究了不同瘤胃乙、丙酸比例对绵羊丙酸糖异生和葡萄糖周转速度的影响。4.试述遗传的分子基础。中心法则图示如下：从“中心法则”可以看出，遗传信息的一般流动方向（图中红线所示）是：遗传信息可以从DNA流向DNA，即完成DNA的自我复制过程，也可以从DNA流向RNA，进而流向蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译过程。在某些病毒中，RNA也可以自我复制，并且还发现在一些病毒蛋白质的合成过程中，RNA可以在逆转录酶的作用下合成DNA。因此，在某些病毒中，遗传信息可以沿图中的蓝线方

12、向流动。上述逆转录过程以及RNA自我复制过程的发现，补充和发展了“中心法则”，使之更加完整。这就是遗传的分子基础。 5.核酸杂交技术的原理是什么？在分子生物学、分子遗传学研究中有什么应用？（同2000年 三，6）6.什么是同工酶？试述电泳法分离同工酶的原理，为什么用聚丙烯酰胺凝胶电泳可得到较好的分离效果？同工酶是能催化相同的化学反应但酶蛋白分子结构有所不同的一组酶。 有下列特点： a. 存在于同一种属或同一个体的不同组成或同一组织同一细胞中。 b. 一级结构不同，理化性质包括带电性质不同，免疫学性质不同，但空间结构中的活性中心相同或相似。c. 往往是四级结构的酶类。 d. 已发现一百多种酶具有

13、同工酶性质。发现最早研究最多的是乳酸脱氢酶，它有五种同工酶。酶是蛋白质，是两性电解质，带有不同数目的电荷，且各个酶的大小、形状等都有差异。蛋白质的这些特征导致其在电场中的泳动速度和方向不同，电泳就是根据蛋白质的这些此特征而进行蛋白质的分离：带正电的蛋白质向负极移动，带负电的蛋白质向正极移动，大分子蛋白质移动速度小于分子量小的蛋白质。十二烷基磺酸钠聚丙稀酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）可以根据蛋白质的分子量大小对其进行分离，酶也是蛋白质，故可以用此方法。SDS-PAGE是在聚丙稀酰胺凝胶系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠和少量巯基乙醇，前者破裂蛋白质分子中的氢键和疏水作用，后者能打开二硫键，使

14、单体蛋白质或亚基（寡聚蛋白解离成亚基）的多肽链处于展开状态。此时SDS与蛋白质单体结合成复合体。由于SDS是阴离子，使多肽链覆盖上相同密度的负电荷，屏蔽了同工酶分子原有的电荷量，使各分子间的电荷差异消失，带上等量的负电荷，电泳时都以同样的电荷/酶质量比向正极移动。而且SDS蛋白质复合体在水溶液中形状都呈长椭圆棒状，改变了酶单体的分子构像，故电泳速度不受酶形状的影响，而只与其相对分子质量即酶的大小有关，这样就可以达到较好的分离效果。7. 什么是遗传密码？有何特点？试述一种遗传密码破译的方法。分子生物学146页遗传密码是指DNA（或其他转录物mRNA）中碱基序列与蛋白质氨基酸顺序之间的关系。三个碱

15、基编码一个氨基酸，此三联碱基组称为一个密码子。遗传密码有下列几个特征：1. 高度简并性。即一个氨基酸是由不止一种密码子编码。仅有色氨酸和甲硫氨酸是由一种三联体编码，其余18种氨基酸均由2种或多种三联体编码。代表同一种氨基酸的不同密码子，称为同义密码子。但每一种密码只代表一种氨基酸，没有双关密码。分析同义密码子发现它们之间仅在三联体的最后一个碱基有差异。2. 通用性。从病毒、细菌到高等动植物一般都共同使用遗传密码子。3. 改变性。在绝大多数情况下各种生物都是使用通用的标准密码，但许多生物的线粒体及一些原核生物的遗传系统中，遗传密码有改变。4.重叠基因和重叠密码。DNA （或Mrna）的密码子是连

16、续的，密码子之间没有间隙，多数生物在阅读密码子时，都只用一个阅读框架，编码出一条多肽链。但在一些病毒中基因是重叠的，因此，同一DNA碱基顺序可以编码出两条或三条不同的多肽链。中心法则的主要内容是：遗传信息可以通过复制一直世代传递下去；也可以从DNA传递到RNA，又从RNA传递到蛋白质。但信息不能离开蛋白质再传递到其他分子。 遗传密码破译的方法（以苯丙氨酸为例）：人工合成一定的RNA作为mRNA，用大肠杆菌的核糖体核其他可溶性提取物，再加一点ATP作细胞外蛋白质合成试验。先用多核苷酸磷酸化酶来合成RNA，这种酶把一种或几种二磷酸核苷酸聚合成多核苷酸，不需要模板，合成的多核苷酸顺序是随机的。如用一

17、种二磷酸核苷酸PPU聚合而成的同质多聚体是多聚U。以此多聚U作为人工mRNA，看哪一种氨基酸能掺入核糖体（离心时随核糖体一起沉降），结果发现只有苯丙氨酸能掺入。因此知道苯丙氨酸的密码是UUU。 2000年招收攻读博士解释下列名词（任选作5题，多选不计分；65=30分）1. ribozyme 2. HGP 3. PCR 4. 别构酶5. 生物酶工程 6. 基因文库 7.限制性内切酶 8. 受体问答题（任选作4题，多选不计分；154=60分）试比较蛋白质。核酸各自结构与其功能的相互关系。试述激素的G蛋白信号转导系统的概念和作用机理。生物膜主要有哪些生物学功能？任举一例阐述膜结构和功能的相互关系。D

18、NA半保留复制的机理是通过哪些重要的实验证明的？该复制方式的揭示有何重要意义？为什么分子筛层析和SDS-PAGE都可用于蛋白质分子量的测定，其原理和操作上有何不同？核酸杂交技术的理论基础是什么？举例说明其在声明科学研究中的应用。2001年招收攻读博士解释下列名词（任选作5题，多选不计分；65=30分）1. 蛋白质四级结构 2. 抗原与抗体 3. 分子伴侣 4. 竞争性抑制5. 原级同工酶 6. PAGE 7.Tm 8. 主动运输问答题（任选作4题，多选不计分；154=60分）试从tRNA在蛋白质合成中的作用来讨论其结构和功能的统一性。试述激素的G蛋白与磷脂酶C偶联的双信使信号转导系统的概念和作

19、用机理。简述人类基因组计划（HGP）的概况，结合自己的专业阐述其对生命科学带来的影响。画出肌红蛋白（Mb）和血红蛋白（Hb）的氧合曲线，并讨论其氧和曲线与功能的相关性。分离纯化酶时应收集哪些数据才能对方法的合理性进行评价？试举例加以说明。试述核酸分离纯化的基本原理和方法。假如你从一新发现的病毒中提取了核酸，请用最简单的方法确定：（1）它是DNA还是RNA（2）它是单链还是双链？2002年招收攻读博士比较下列名词概念（任选作5题，多选不计分；85=40分）1、肽单位和肽平面 2、正协同效应和负协同效应 3、DNA的杂交和重组 4、增色效应和减色效应 5、主动运输和被动运输 6、酶活力的国际单位和

20、习惯单位7、分子筛层析和亲和层析 8、基因工程和蛋白质工程问答题（任选作4题，多选不计分；124=48分）试阐述为什麽只有DNA适合作为遗传物质? 举例说明DNA分子结构和功能的深入研究对生命科学带来的划时代的影响.简述胞间信号跨膜转导各种方式及其机理。阐述1963年Michell提出的化学渗透假说的主要内容，该领域的研究近年来有什麽进展？画出肌红蛋白（Mb）和血红蛋白（Hb）的氧合曲线，并讨论其氧合曲线与功能的相关性。和非酶催化剂相比，酶在结构上和催化机理上有什麽特点？请介绍一种酶的活性中心的研究方法。试述核酸分离纯化的基本原理和方法。假如你从一新发现的病毒中提取了核酸，请用最简单的方法确定

21、：（1）它是DNA还是RNA（2）它是单链还是双链？2003年招收攻读博士解释下列名词（任选作6题，多选不计分；66=36分）1.亲和层析 2. Tm 3.蛋白质结构域 4.蛋白质组学 5.别构酶 6. GTP-binding protein7. peptide plane 8. isoenzyme 9. Human Genome Project 10.antibody 问答题（任选作4题，多选不计分；124=48分）1.谈谈你对遗传密码的认识和中心法则的主要内容。2.简述蛋白质可逆磷酸化在信号转导中的特点和意义。3.阐明核酸杂交的特点及以此特点为分子生物学研究提供的实验方法及可能解决的问题。

22、4.举例说明蛋白质天然构象的信息存在于氨基酸顺序中。5.如何运用DNA序列分析方法确定DNA序列中与蛋白质结合的区域。6.有一酶的粗提液，其中含有分子量和带电荷状况都不同的几种酶，请设计两种不同的方法将它们分离纯化，并简述各方法的原理。2004生物化学1、亲和层析：又称功能层析和生物专一吸附，它是根据生物大分子能与一些物质进行专一结合的特性而设计的层析方法。如一些酶的底物、辅酶、抑制剂、调节效应物能与相应的酶专一结合，激素和受体、抗原和抗体亦互为配基，能够专一性结合。2、超二级结构：在蛋白质分子中，特别是球状蛋白质中，由若干相邻的二级结构单元（即螺旋、折叠片和转角等）彼此相互作用组合在一起，形

23、成有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件单元，称超二级结构。3、朊病毒：朊病毒就是蛋白质病毒，是只有蛋白质而没有核酸的病毒。是一种具有感染性和自我复制能力的因子，也叫做普列昂或蛋白质侵染因子。朊病毒与常规病毒一样，有可滤过性、传染性、致病性、对宿主范围的特异性，但它比已知的最小的常规病毒还小得多（约3050nm）。电镜下观察不到病毒粒子的结构，且不呈现免疫效应，不诱发干扰素产生，也不受干扰作用。4、别构酶：又称为变构酶，是一类重要的调节酶。别构酶均受代谢终产物的反馈抑制。别构酶多为寡聚酶，含有两个或多个亚基。其分子中包括两个中心：一个是与底物结合、催化底物反应的活性中心；另

24、一个是与调节物结合、从而改变酶的构象以调节反应速度的别构中心。在代谢反应中催化第一步反应的酶或交叉处反应的酶多为别构酶。5、原级同工酶：同工酶是指其催化的化学反应相同，而酶的结构、理化性质乃至免疫性质不同的一组酶。同工酶可分为原级同工酶和次级同工酶。原级同工酶为转录水平上基因的分化，是从不同的遗传位点产生的，分别由不同基因编码，氨基酸组成不同，但具有同一催化作用。6、配体与受体：细胞信号转导中的化学信号分子即为配体，作为信息载体与受体作用启动信号转导过程。受体是存在于细胞膜或细胞内的生物大分子，它们只能识别配体，并将信息转导到细胞膜内或细胞核内，从而启动某些特定的生物反应过程。可分为膜表面受体

25、和胞内受体二类。绝大多数受体的化学结构为蛋白质。也有少数为非蛋白受体，例如霍乱毒素的受体为神经节苷脂。7、Human Genome Project: 即人类基因组计划，是美国科学家于1985年率先提出、1990年正式启动的计划，旨在阐明人类基因组30亿个碱基对的序列，发现所有人类基因并搞清其在染色体上的位置，破译人类全部遗传信息，使人类第一次在分子水平上全面地认识自我。8、active transport: 即主动运输，是物质逆浓度梯度，即从浓度小的到浓度大的区域运进或运出细胞，这种运输需要能量，直接的能量来自于ATP的水解。9、restriction endeonuclease: 即限制性内

26、切酶，是一类能识别双链DNA分子中特定核苷酸序列，限于切割其序列之间的键的核酸内切酶，此酶类主要发现于微生物中，是基因工程中重要的工具酶。三、问答题1、试述为什么只有DNA适合作为遗传物质？举例说明DNA分子结构与功能的深入研究对生命科学带来的划时代的影响。遗传物质必须能够携带遗传信息；自我复制、传递遗传信息；让遗传信息得到表达以控制细胞活动；能够突变并保留突变；这4点缺一不可。蛋白质虽然携带了大量遗传信息，但是按照中心法则，蛋白质不能自我复制，因此不适合作为遗传物质。RNA也携带了大量遗传信息，但是它因为RNA聚合酶缺乏外切核酸校对功能因此其错误率约10-5，远低于DNA聚合酶全酶的精确性，

27、不能精确地传递遗传信息，因此也不适合作为遗传物质。DNA由于4种碱基的不同组合贮存了大量遗传信息；且可以以半保留的方式进行精确的自我复制以传递遗传信息；DNA可转录为RNA并进一步翻译为蛋白质以发挥功能；DNA复制时有10-9-10-10的突变率，并能将突变传递。因此DNA适合作为遗传物质。DNA双螺旋结构的发现开启了分子生物学时代。它使生物大分子的研究进入一个崭新的阶段，使遗传的研究深入到分子层次，“生命之谜”被打开，人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径。50年来，分子遗传学、分子免疫学、细胞生物学等新学科如雨后春笋般出现，一个又一个生命的奥秘从分子角度得到了更清晰的阐明，DNA重组技术

28、更是为利用生物工程手段的研究和应用开辟了广阔的前景。2、简述G蛋白在细胞跨膜信号传导中的作用。G蛋白偶联受体的信号转导途径由四部分组成：G蛋白、细胞膜受体、第二信使、效应物。其中G蛋白的作用很重要。G蛋白：（GTP binding proteins）所有能与GTP结合的蛋白质都可以称为G蛋白，并不是都参与细胞信号传递。所有的GTP结合蛋白都具有水解GTP生成GDP的能力，既具有GTP酶的特性，所以把所有GTP结合蛋白都归属于G蛋白超家族（GTP-binding protein superfamily）。在研究信号传递时特指与细胞表面受体偶联的异三聚体G蛋白（heterotrimeric GTP

29、 binding protein）。 （ G蛋白的基本结构：100kD左右，由、三种亚基组成，在天然电泳中与仍紧密结合在一起。亚基分子量在39-46kD之间，差别最大，被用作G蛋白的分类依据。其共同的特点是，具有一个GTP结合位点，本身具有GTP酶的活性，即可以把GTP水解成GDP和无机磷酸；在某些G蛋白的亚基上，有些特殊的氨基酸（Arg或Cys）残基可被特定的细胞毒素所修饰，从而调节其生理功能。在一级结构中有几个高度保守的结构域，即P区域、G区域和G区域。P与G区域都与GTP结合及GTP酶活力有关；G区域则与GTP结合，并与腺苷酸环化酶相互作用有关。另外，与受体接触的是G的C端的螺旋等。亚基

30、分子量为36kD左右，各种G蛋白的亚基在肽图和免疫化学特性及氨基酸序列方面很相似，亚基分子量在7-8kD之间，各种G蛋白之间亚基也比较相似但个别的也有些区别；它与亚基非共价紧密结合。）G蛋白在结构上没有跨膜蛋白的特点，它们能够固定于细胞膜内侧，主要是通过对起亚基上氨基酸残基的脂化修饰作用，这些修饰作用把G蛋白锚定在细胞膜上。能够激活腺苷酸环化酶的G蛋白称为Gs,对该酶有抑制作用的称为Gi。当Gs处于非活化态时，为异三聚体，亚基上结合着GDP，此时受体及环化酶亦无活性；激素配体与受体结合后导致受体构象改变，其上与Gs结合位点暴露，受体与Gs在膜上扩散导致两者结合，形成受体-Gs复合体后，Gs亚基

31、构象改变，排斥GDP，结合了GTP而活化，亚基从而与亚基解离，同时暴露出与环化酶结合位点；亚基与环化酶结合而使后者活化，利用ATP生成cAMP；一段时间后，亚基上的GTP酶活性使结合的GTP水解为GDP,亚基恢复最初构象，从而与环化酶分离，环化酶活化终止，亚基从新与亚基复合体结合。重复此过程。在上述模型中，Gs穿梭于膜上两个蛋白质-受体与腺苷酸环化酶之间，起了一个信号传递者的作用，而Gs上结合GTP-GDP循环在激活-灭活环化酶中起了关键作用。3、举例说明蛋白质天然构象信息存在于氨基酸序列中。人们曾提出,蛋白质的氨基酸序列包含了其构象的全部信息,即新生肽链在细胞内可在一级结构的基础工业上，自动

32、地折叠成天然构象，而不需要其他分子或能量的支持。如烟草花叶病毒外壳蛋白与核糖核酸在体外生理条件下能自组装成感染活性的病毒；变性牛胰核糖核酸酶在除去变性剂和还原剂后，能自动折叠成天然构象，形成正确的四对二硫键，并恢复几乎全部的生物活性。（但从目前的研究来看，细胞内新生肽的折叠从一般意义上说是需要分子伴侣和酶帮助的，而不是自发进行的。）4、和非酶催化剂相比，酶在结构上和催化机理上有什么特点？请介绍一种酶活性中心的研究方法。（1） 酶具在高度的专一性：一般地说，酶只能作用于一种或一类化学底物，催化一种或一类化学反应；而化学催化剂对于反应物没有这样严格的选择性。（2） 酶具有很高的催化效率：一般地说，

33、酶催化的反应速度比化学催化剂催化的反应速度要高106-1013倍。（3） 化学催化剂催化化学反应，一般需要剧烈的反应条件，但是酶催化反应一般是在常温常压、中性酸碱度等温和的反应条件下进行的。（4） 酶易变性失活：化学催化剂在一定条件下，会因中毒而失去催化能力；而酶比化学催化剂更加脆弱，更易失去活性。（5） 体内酶活性是受调控的。（6） 酶分子的结构特征：酶分子球形结构表面除了与催化有关的区域如活性中心外还有其他一些与催化功能直接或间接相关的功能区域。酶活性中心的研究方法有化学修饰法、动力学分析法、X-射线衍射分析法及蛋白质工程的方法。化学修饰法是应用最广泛的方法。原则上，酶分子侧链上的各种基团

34、，如羧基、羟基、巯基和咪唑基等均可由特定的化学试剂共价修饰，当它被某一化学试剂修饰后，若酶的活性显著下降或丧失，则可初步推断该基团为酶的必需基团。5、DNA聚和酶有修正功能，而RNA酶没有。当核酸复制及转录时核苷酸的变化会出现不同的结果，请作出分子学解释。DNA聚合酶具有3-5外切活性，这种活性专门水解单链DNA或双链DNA的非配对部分，产物是5单核苷酸，水解至正确配对的双链部分为止。该酶在聚合开始时有选择正确碱基的能力，同时起一种校对作用，删去误配的碱基，这就保证了复制的高度忠实性。RNA聚合酶缺乏外切核酸校对功能因此其错误率约105，远低于DNA聚合酶全酶的精确性。这主要是因为RNA不带信

35、息从一代到下一代，因此不必要有超高可信度的模板拷贝能力。6、ELISA的原理及方法。用于检测抗原和抗体。ELISA的原理是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。方法：ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂：（1）固相的抗菌素原或抗体，即免疫吸附剂（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为结合物（conjugate）；（3）酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。在测定时，受检标本（

36、测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。主要有以下几种类型：双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体。2002生物化学1、肽单位：肽链主链骨架上两个碳原

37、子之间的六个原子为肽链主链骨架的重复单位，称为肽单位。 2、肽平面：肽键与相连的四个原子形成刚性的平面结构（羰基氧与酰胺氢呈反式排布）这种结构称肽平面或酰胺平面。3、正协同效应：在变构酶分子上，活性部位与调节部位之间，或者活性部位之间，存在着相互作用。调节物与酶分子的调节部位结合之后，引起酶分子构象发生变化，从而提高活性部位（或一个亚基的活性部位）的酶活性，或对底物的亲和力，这种效应称为正协同效应。4、负协同效应：在变构酶分子上，活性部位与调节部位之间，或者活性部位之间，存在着相互作用。调节物与酶分子的调节部位结合之后，引起酶分子构象发生变化，从而降低活性部位（或一个亚基的活性部位）的酶活性，

38、或对底物的亲和力，这种效应称为正协同效应。5、DNA的杂交：不同来源的多核苷酸链间，经变性分离、退火处理后，若有互补的碱基顺序，就能发生碱基互补形成DNA-DNA杂合体，甚至DNA-RNA杂合体，此即为DNA的杂交。6、重组：运用多种限制性内切酶和DNA连接酶等，把DNA作为组件，在细胞外将一种外源基因DNA和载体DNA重新组合连接形成杂交DNA。7、增色效应：由于核酸组成中的嘌呤、嘧啶碱都具有共轭双键，因此对紫外光有强烈的吸收，核酸溶液在260nm附近有一个最大吸收值。变性后的DNA由于碱基对失去重叠，所以在260nm处的紫外吸收有明显升高，这种现象称为增色效应。8、减色效应：在适当的重要条

39、件下，变性DNA分开的两条链又重新缔合而恢复成双螺旋结构，这个过程为复性，复性DNA在260 nm处的紫外吸收有明显降低，这种现象称为减色效应。9、主动运输：物质逆浓度梯度，即从浓度小的到浓度大的区域运进或运出细胞，这种运输需要能量，直接的能量来自于ATP的水解。10、被动运输：是物质顺浓度梯度进行物质的转运。这种转运的动力是物质的浓度梯度所含的势能，因此不需要消耗能量。细胞膜仅起着被动屏障作用。被动转运包括简单扩散、易化扩散。11、酶活力的国际单位：在指定的反应条件下，1min内，将1微摩尔（mol）的底物转化为产物所需要的酶量，定为一个国际单位（1U=1mol/min）。如果底物分子有一个

40、以上可被作用的化学键，则一个酶活力单位，便是1min使1mol有关基团转化，所需要的酶量。上述反应重要条件是：25，最适PH，饱和底物浓度。12、习惯单位：对于不同的酶或者同一种酶，由于测定方法的不同，常常有不同的规定，根据习惯来衡量酶活力大小的计量单位即为习惯单位。13、分子筛层析：又称分子筛层析，是利用具有一定孔径的多孔凝胶作为固定相，把分子大小不同的物质分离开来的一种层析技术。14、亲和层析：又称功能层析和生物专一吸附，它是根据生物大分子能与一些物质进行专一结合的特性而设计的层析方法。如一些酶的底物、辅酶、抑制剂、调节效应物能与相应的酶专一结合，激素和受体、抗原和抗体亦互为配基，能够专一

41、性结合。15、基因工程：是利用DNA重组技术，将目的基因与载体DNA在体外进行重组，然后把这种重组DNA 分子引入受体细胞，并使之增殖和表达的技术。16、蛋白质工程：就是运用蛋白质结构功能和分子遗传学知识，从改变或合成基因入手，定向地 改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质。三、问答题1、试阐述为什么只有DNA适合作为遗传物质？举例说明DNA分子结构与功能的深入研究对生命科学带来的划时代的影响。遗传物质必须能够携带遗传信息；自我复制、传递遗传信息；让遗传信息得到表达以控制细胞活动；能够突变并保留突变；这4点缺一不可。蛋白质虽然携带了大量遗传信息，但是按照中心法则，蛋白质不能自我复制，因此不适合作为

42、遗传物质。RNA也携带了大量遗传信息，但是它因为RNA聚合酶缺乏外切核酸校对功能因此其错误率约10-5，远低于DNA聚合酶全酶的精确性，不能精确地传递遗传信息，因此也不适合作为遗传物质。DNA由于4种碱基的不同组合贮存了大量遗传信息；且可以以半保留的方式进行精确的自我复制以传递遗传信息；DNA可转录为RNA并进一步翻译为蛋白质以发挥功能；DNA复制时有10-9-10-10的突变率，并能将突变传递。因此DNA适合作为遗传物质。DNA双螺旋结构的发现开启了分子生物学时代。它使生物大分子的研究进入一个崭新的阶段，使遗传的研究深入到分子层次，“生命之谜”被打开，人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径

43、。50年来，分子遗传学、分子免疫学、细胞生物学等新学科如雨后春笋般出现，一个又一个生命的奥秘从分子角度得到了更清晰的阐明，DNA重组技术更是为利用生物工程手段的研究和应用开辟了广阔的前景。2、简述胞间信号跨膜转导各种方式及其机理。cAMP信号转导系统：活化的受体通过G蛋白偶联到腺苷酸环化酶，由G蛋白引起该酶的兴奋或抑制，从而决定cAMP浓度的升高或降低.cAMP的信使作用是通过依赖cAMP的蛋白激酶(PKA)来发挥生理效应的，PKA可促使酶蛋白磷酸化，从而改变酶活性水平或改变酶与周围的蛋白质核酸的相互作用。 GMP信号转导系统：cGMP在不同类细胞中，可分别通过依赖cGMP蛋白激酶（PKG）、

44、cGMP门控的阳离子通道、cGMP调控的环核苷酸磷酸二酯酶（PDE）、ADP-核糖环化酶等介导的途径来调控多种细胞功能。醇磷脂信号转导系统：磷酯酰肌醇在激酶的作用下可转变为磷酯酰肌醇4，5-二磷酸（PIP2）PIP2可降解为二酰甘油（DG）和肌醇1，4，5-三磷酸（IP3），DG单独或与Ca2+一起促使质膜上PKC活化，进而启动多种细胞效应，IP3使细胞内质网内贮存的Ca2+以及细胞外Ca2+通过Ca2+通道进入细胞内使胞浆内Ca2+浓度升高，即具有钙动员作用。Ca2+信号转导系统：Ca2+与Ca2+受体蛋白相互作用而发挥各种生理效应，其中最为重要的是钙调素（CaM）。CaM与Ca2+组成复合

45、物后便被激活，再通过其依赖性蛋白激酶发挥效应。与酪氨酸蛋白激酶（TPK）直接相连的信号转导系统：配体与保密观念体膜外结合部位结合后，其信息传递以及膜内TPK的激活可能是由受体之间寡聚化介导，从而使相邻的膜内结构域之间产生稳定的相互作用，由分子间的这种相互作用最终导致酶的活化。3、阐述1963年Michell提出的化学渗透假说的主要内容，该领域的研究近年来有什么进展？化学渗透假说是解释氧化磷酸化作用（见氧化磷酸化）机理的一种假说，1由英国生物化学家米切尔（P.Mitchell）提出。他认为电子传递链像一个质子泵，电子传递过程中所释放的能量，可促使质子由线粒体基质移位到线粒体内膜外膜间空间形成质子

46、电化学梯度，即线粒体外侧的H+浓度大于内侧并蕴藏了能量。当电子传递被泵出的质子，在H+浓度梯度的驱动下，通过F0-F1ATP酶中的特异的H+通道或“孔道”流动返回线粒体基质时，则由于H+流动返回所释放的自由能提供F0-F1ATP酶催化ADP与Pi偶联生成ATP。此假说假设在电子传递驱动下，H+循环出、进线粒体，同时生成ATP，虽能解释氧化磷酸化过程的许多性质，但仍有许多问题未能完全阐明。进展见参考文献1、24、 画出肌红蛋白（MB）和血红蛋白（HB）的氧合曲线，并讨论其氧合曲线与功能的相关性。肌红蛋白的氧结合曲线呈双曲线，而血红蛋白呈S形曲线。这是因为每个肌红蛋白分子仅有一个O2的结合位置，因

47、此每一肌红蛋白分子和O2的结合均是独立的，和其他肌红蛋白分子无关。而血红蛋白分子是由四个亚基所组成，每一亚基均有一个O2的结合位置，血红蛋白分子对O2的结合是四个亚基的协同作用的结果。这也反映了两种蛋白质的生理功能是不同的。肌红蛋白的功能是储备氧，只有当剧烈活动时血液输氧不足以补偿肌肉消耗而致局部氧分压很低的情况下，才放出氧来应急。而血红蛋白的功能是运输氧，所以它既能在肺筛泡的高氧分压条件下充分结合氧，又能在周围组织的低氧分压条件下将大部分氧释放出来。5、 和非酶催化剂相比，酶在结构上和催化机理上有什么特点？请介绍一种酶的活性中心的研究方法。酶具在高度的专一性：一般地说，酶只能作用于一种或一类

48、化学底物，催化一种或一类化学反应；而化学催化剂对于反应物没有这样严格的选择性。酶具有很高的催化效率：一般地说，酶催化的反应速度比化学催化剂催化的反应速度要高106-1013倍。化学催化剂催化化学反应，一般需要剧烈的反应条件，但是酶催化反应一般是在常温常压、中性酸碱度等温和的反应条件下进行的。 易变性失活：化学催化剂在一定条件下，会因中毒而失去催化能力；而酶比化学催化剂更加脆弱，更易失去活性。 内酶活性是受调控的。 分子的结构特征：酶分子球形结构表面除了与催化有关的区域如活性中心外还有其他一些与催化功能直接或间接相关的功能区域。酶活性中心的研究方法有化学修饰法、动力学分析法、X-射线衍射分析法及

49、蛋白质工程的方法。化学修饰法是应用最广泛的方法。原则上，酶分子侧链上的各种基团，如羧基、羟基、巯基和咪唑基等均可由特定的化学试剂共价修饰，当它被某一化学试剂修饰后，若酶的活性显著下降或丧失，则可初步推断该基团为酶的必需基团。6、试述核酸分离纯化的基本原理和方法。假如你从一新发现的病毒中提取了核酸请用最简单的方法确定：（1）它是DNA还是RNA（2）它是单链还是双链？核酸分为两大类：一类为核糖核酸（RNA），另一类为脱氧核糖核酸（DND）。核酸的分子量极大，数万至亿万。核酸是两性化合物，在一定的等电点溶于水，其水溶液呈酸性，不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱

50、氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别，有一定浓度范围的氯化钠溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度随着氯化钠浓度增加而逐渐下降，当氯化钠浓度为0.14mol/L时，其溶解度仅为水中溶解度的1/100，但当氯化钠浓度再增加时，脱氧核糖核蛋白的溶解度重新增加，氯化钠浓度增加到0.5mol/L时，其溶解度与水中溶解度相似，当氯化钠浓度增加到1mol/L时，它的溶解度比在水中大2倍。核糖核蛋白在0.14mol/L氯化钠溶液中仍有相当大的溶解度，因此常用0.14mol/L氯化钠溶液提取核糖核蛋白，而提取脱氧核糖核蛋白时，则用1mol/L氯化钠溶液。两种核糖核蛋白的溶解度与溶液的pH也有关。当p

51、H为4.2时，脱氧糖核蛋白的溶解度最低，而pH为2.02.5时，核糖核蛋白的溶解度最低。所以调节氯化钠溶液的浓度和pH值，可使核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白分离开来。吖啶橙对DNA和RNA均有很强的亲和力。在0.01 吖啶橙液氩激光激发波488nm，红色荧光为DNA(F600nm),绿色荧光为RNA或单链DNA(F530nm)单链和双链密度和沉降速率不同用Cs-Cl密度梯度离心可以将它们区分开来。2006年招收攻读博士解释下列名词（任选作6题，多选不计分；66=36分）1、竞争性抑制 2、SDS-PAGE3、DNA重组技术 4、Southern blotting 5、旋转催化理论 6、primar

52、y isoenzyme 7. 分子病 8、GTP-binding protein9. 钙调蛋白 10、ribozyme 问答题（任选作4题，多选不计分；124=48分）1、血红蛋白和肌红蛋白都具有氧合功能，但二者的氧合曲线不同，请画出它们的氧合曲线，并解释原因。2、试述RNA的多样性及其研究在生命科学中的意义。3、阐述细胞信号转导的基本规律，列举1-2项近年来在这个领域的重大研究成果。4、举例说明运用抗原-抗体的识别可以开展哪些生物化学与分子生物学研究？ 5、已知某酶的底物结合部位上有一个丙氨酸残基，一次定点突变时丙氨酸被甘氨酸取代，但酶活性没有受到影响；但在另一次突变中丙氨酸变成了谷氨酸，使

53、该酶的活性明显丧失，请分析可能的原因。6、凝胶过滤法（分子筛层析）是分离蛋白质混合物最有效的方法之一，请说明其工作原理并简述用该方法分离纯化蛋白质的实验操作步骤。2007年招收攻读博士名词解释(任选6个，多选不计分，6636分)1. 等电点（pI） 2. HGP 3. 酶的活性中心 4. 别构酶 5. 蛋白质二级结构 6. 氧化磷酸化用 7.限制性内切酶 8. 受体问答题(任选4题，多选不计分，每题10分，共40分)1. 试述遗传中心法则的主要内容,现代生命科学对“中心”的理解赋予了什么样的新内涵？2. 为什么说蛋白质天然构象的信息存在于氨基酸顺序中。蛋白质的结构与功能之间有什么关系？3.和非

54、酶催化剂相比，酶在结构上和催化机理上有什么特点？4. mRNA遗传密码排列顺序翻译成多肽的氨基酸排列顺序时，保证准确翻译的关键是什么？ 5. 何谓操纵子学说？试以大肠杆菌乳糖操纵子为例说明酶合成的诱导和阻遏。6.如果你从动物肝脏中分离提取到了一种物质，猜测它可能是转氨酶，你怎样确定它是蛋白质？又如何判断它是酶？请简述你的方案。2008年招收攻读博士名词解释（任选做6题，多选不计分；46=24分，）1mulecular chaperone：分子伴侣，Lasky于1978年首先提出分子伴侣（mulecular chaperone）的概念，这是一类可以介导蛋白质正确折叠与装配，但其本身并不构成被介导

55、的蛋白质组成部分的一类蛋白因子，在原核生物和真核生物中广泛存在。2Southern blotting：Southern印迹杂交，Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。3noncoding RNA：非编码RNA，指的是不被翻译成蛋白质的RNA，如tRNA, rRNA等，这些RNA不被翻译成蛋白质，但是其中有一些会参与蛋白质翻

56、译过程。4CaM-PK：Ca2+钙调素蛋白依赖性蛋白激酶，所有引起细胞内钙离子浓度升高的激素或神经递质都可通过不同的钙离子钙调素依赖性蛋白激酶达到调节细胞生理功能的作用。钙调素蛋白依赖性蛋白激酶存在于许多动物细胞体内，尤其在神经组织中含量丰富。5生物酶工程：生物酶工程是酶学与以DNA重组技术为核心的生物技术相结合的产物，亦称高级酶工程。6信号肽假说：分泌蛋白新生肽链N端的一段2030氨基酸残基组成的肽段。将分泌蛋白引导进入内质网，同时这个肽段被切除。（补充）特点：N端至少含一个带正电荷基团；信号肽序列在10-40个AA范围，中部有10-15个高度疏水AA组成的肽段； C端有被酶识别位点，其上游

57、常有疏水性强的5肽，切点上游第1、第3多为为Ala。具体内容：编码分泌蛋白的mRNA在翻译时首先合成的是N 末端带有疏水氨基酸残基的信号肽，它被内质网膜上的受体识别并与之相结合。信号肽经由膜中蛋白质形成的孔道到达内质网内腔，随即被位于腔表面的信号肽酶水解，由于它的引导，新生的多肽就能够通过内质网膜进入腔内，最终被分泌到胞外。翻译结束后，核糖体亚基解聚、孔道消失，内质网膜又恢复原先的脂双层结构。7朊病毒：是一种不含核酸的传染性蛋白质分子，能通过自身的构象变化，并传递到其它分子引起同样的变化而致病。8比活力：（specific activity）代表酶制剂的纯度。根据国际酶学委员会规定比活力用每毫

58、克蛋白所含的酶活力单位数表示。对于同一种酶来说，比活力愈大，表示酶的纯度愈高。简答题（任选作5题，多选不计分；85=40分）1有哪些因素会影响血红蛋白与氧的亲和力？1）氧分压(PO2)对血红蛋白与O2结合的影响2）H+离子浓度和二氧化压分压(PCO2)对血红蛋白与O2结合的影响-Bohn效应3）2，3-二磷酸甘油酸(BPG)对Hb与O2结合的影响, 2，3-DPG补充：2，3DPG旁路：红细胞内的糖酵解过程中,1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)经2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)转变为3-磷酸甘油酸的途径,称为2,3-BPG旁路.2简述酶的酸碱催化和共价催化机理。1）酸碱催化：在细胞接

59、近中性的pH条件下，酶的活性部位具有可以给出或接受质子的氨基酸侧链，为反应提供了一个相当于强酸或强碱溶液的生物环境，从而加速反应的进行。2）共价催化：共价催化又称亲核催化或亲电子催化，在催化时，亲核催化剂或亲电子催化剂能分别放出电子或吸取电子并作用于底物的缺电子中心或负电中心，迅速形成不稳定的共价中间复合物，降低反应活化能，使反应加速3用电泳法分离鉴定同工酶时采用的染色方法有什么特点？试举一例。 染色方法常用活性染色技术：常利用酶催化专一性原理，在染色液中加入底物和酶活性所需因子，通过酶促反应生成有色或无色物质，显示酶带。例如：乳酸脱氢酶（LHD）同工酶的分离时是采用氧化型硫酸甲酯吩嗪(PSM

60、)和氮蓝四唑(NBT)的氢传递反应生成还原型氮蓝四唑的蓝紫色化合物而完成的，因此具有催化脱氢活性的酶都可以采用这种活性染色法显色，例如苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶等等。4ddNTP在Sanger核酸测序法中有何作用？简述其机理？ddNTP在Sanger核酸测序法起终止核苷酸延伸的作用，其原理为：每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而

61、定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。5试述核酸变性后产生增色效应的原因及其应用。由于DNA变性引起的光吸收增加称增色效应,也就是变性后 DNA 溶液的紫外吸收作用（即260nm处的OD值）增强的效应。DNA变性后，双螺旋结构解体，两条链分开，使双螺旋内侧的碱基暴露，其碱基上所带的嘌啉或嘧啶中的苯环就能够更为充分的吸收260nm处的紫外光了（苯环的吸收峰就在260nm处）。最常用的就是应用于紫外光谱法鉴别单链和双链DNA。6请用中心法则解释基因克隆技术的工作原理。是阐明遗传信息传递方向的法则，指遗传信息从DNA传递至RNA，再传递至多

62、肽。DNA同RNA之间遗传信息的传递是双向的，而遗传信息只是单向地从核酸流向蛋白质。基因克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接，然后将其转入宿主细胞或受体生物内，在受体细胞内连接有目标片段的载体自我复制并表达出相应的产物，从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。7简述Na+ . K+ - ATPase作用的机理Na+-K+-ATP酶（即钠钾泵），它有大小两个亚基,大亚基催化ATP水解,小亚基是一个糖蛋白.Na+-K+ATP酶通过磷酸化和去磷酸化过程发生构象的变化,导致与Na+,K+的亲和力发生变化.大亚基以亲Na+态结合Na+后,触发水解ATP.每水解一个ATP释放的能量输送3个