从番茄中提取番茄红素实验报告

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1、有机化学创新实验从番茄中提取番茄红素姓名=班级：制药0802合作组员姓名：茅海亚，李慧指导老师：孙培冬实验地点：化工学院从番茄中提取番茄红素一实验目的1、了解番茄红素中的基本成分和结构，以及其各种已被发现的功效2、熟悉从天然植物中提取分离色素的直接方法和操作技能3、掌握天然色素的简单定性和定量测量方法4、通过实验分析比较不同萃取剂对色素提取的影响5、能观察区别番茄红素和B胡萝卜素，了解两种色素的异同点二实验原理1、番茄红素属于类胡萝卜素，是由异戊二烯残基为单元组成的长链共轨双键结构的多烯色素。人多类胡萝卜素可以看作番茄红素的衍生物其分子为C40H56,结构如下：2、根据番茄红素不溶于水，难溶于

2、甲醇、乙醇，可溶于石油醛、己烷、丙酮，易溶于氯仿、苯等有机溶剂的性质，可利用亲油性有机溶剂来提取番茄红素；3、实验采取直接打浆，直接打浆的方法提取量最大，提取速度快，提取次数少，提取效咼；4、柱层析时，当液体流经吸附柱时，各组分同时被吸附在柱的上端，然后从柱顶加入洗脫剂洗脱，当洗脱剂流卞时，由于固定相对各组分吸附能力不同，各组分以不同速度沿柱下移，若是有色物质，则在柱上可以直接看到色带。5、薄层色谱时，当展开剂在吸附剂上展开时，由于吸附剂对各组分吸附能力不同，展开剂对各组分的解吸能力也不同，各组分向前移动的速度会不同。三试剂批号三氯甲烷T20070319石油瞇F20090421环己烷T2009

3、0227二氯甲烷20080521乙醇20080714厂家均为国药集团化学试剂有限公司，规格都为AR石英砂，氧化铝四实验仪器色谱仪分光光度计搅拌机抽滤机电子称圆底烧瓶三11瓶锥形瓶烧杯铁架台玻璃棒滴管2五实验装置图图a搅拌回流装置图b抽滤装置3#图c水浴蒸馆装置六实验步骤及现象实验步骤实验现象1、提取回流搅拌法:称取30g新鲜番茄，捣碎，放入100亳升三角瓶中，加入15亳升无水乙醇，装上搅拌装置和回流冷凝管，搅拌回流5分钟，抽滤。残渣中加入15亳升萃取剂，搅拌回流5分钟，抽滤。合并抽滤所得液，倒入分液漏斗，加入几滴饱和氯化钠，摇震，静置分层。分出提取液，用无水硫酸钠干燥，水浴蒸干待用。水浴搅拌过

4、程中，随着搅拌的时间加长，以及水浴的温度升高，加入圆底烧瓶内的无色萃取剂变成橙黄色，并且不断有气泡产生。不同萃取剂抽滤过程所得液颜色呈浅黄色到橙红色，程度不等，所得液经过萃取剂润洗倒入分液漏斗，液面呈现分层，上层为有机层，呈橙色（颜色有差别，有些萃取剂润洗时加入偏多，该颜色仅作参考），下层为水层，静置一段时间后，颜色逐渐变浅，为淡黄色。水浴蒸干加入洗脱液后，三个萃取剂得出色素的橙色由浅入深顺序为，石油醛，乙酸乙酯，环己烷。2、柱层析层析柱中塞好棉花，加入十几亳米洗脱液，边倒入氧化铝边轻叩层析柱，直到得到十厘米高的氧化铝柱。装柱时保持洗脫液面高于氧化铝，需要时可添加洗脱液。装好的柱不能有气泡和裂

5、缝。氧化铝柱表面放上0.5厘米厚的石英砂，放走多余的溶剂直到液面刚刚达到石英砂表面。将提取的色素溶于1亳升洗脱液中，用滴管加入柱顶。打开活塞，让色素流到氧化铝柱上，如此反复几次色素完全移入层析柱。用滴管沿四周加洗脫液，将柱壁上的色素洗F（多次洗脱）当液面降至石英砂表面时，即加环己烷石油瞇1:1洗脱。黄色的胡萝卜素在柱中移动较快，红色的番茄红素则较慢，收集洗脱液至胡萝卜素在柱中完全消失。然后用极性较人的氯仿做洗脱液洗出番茄红素。将收集到的两个部分用水浴蒸干，待用。层析时，随着洗脱液的加入，注重两种颜色，由于之前了解可知，跑得较快的黄色色素为B胡萝卜素，先收集完成，用氯仿洗脫，后跑出的是橙红色的番

6、茄红素。两者收集完成后，水浴蒸干，圆底烧瓶一个底部为黄色，一个底部是红色。3.光谱测定番茄红素用石油醯溶解，定屋转移10亳升容量瓶中，定容。测定在300-600处的吸收光谱，以及在最人吸收波处的吸光度。红外光谱的测定，分析峰与相应官能团的关番茄红素经石油醯溶解定容至101111后，颜色变浅，测其吸光度，由于分光光度计的量程要求，如果吸光度不在0.1和0.8之间，小于0.1的增加浓度，大于0.8的桥释一定倍数。B胡萝卜素可直接测其吸光度。4薄层色谱将10克硅胶G加20亳升0.3%竣甲基纤维素溶液，调成浆糊状，平铺于波片上，自然干燥。在烘箱105-110摄氏度中活化1小时取出，保存在干燥器皿中备用

7、。分别柱层析分离得到的胡萝卜素和番茄红素三个样品在薄板上点样。放入装有环己烷-石油瞇展开剂或其他展开剂的层析缸中，测出值，比较三点样品的关系。铺胶的过程胶需铺的均匀光滑，在完成的玻片上用铅笔在距一端1cm处画一条直线，距另一端0.5cm处画一条直线，点样的时候，毛细管头加热用蹑子拉长取样，点样在1cm直线处。经过浓缩的B胡萝卜素与两色素混合物点样进行对比，番茄红素与两色素混合物点样进行对比，前者有一条浅黄色条带与两个色素的红黄混合条带，后者有一条红色条带与两个色素的红黄混合条带。七数据记录及处理时间：7月6号萃取剂：乙酸乙酯水分测定：样品a样品b烘干前质量（g）5.105.17烘干后质量（g）

8、0.450.47水分（g）4.654.70水分百分比（）91.290.9水分平均值（）91.1注：记录数据已去除烧杯的质量其余所测数据及处理用于提取的番茄质量（g）30.10吸光度0.168稀释倍数10水分（）91.1M=（吸光度*倍数）/（质量*（1水分）0.627时间：7月7号萃取剂：石油瞇水分测定：样品a样品b烘干前质量（g）4.985.06烘干后质量（g）0.490.49水分（g）4.494.57水分百分比（）90.290.3水分平均值（）90.3注：记录数据已去除烧杯的质量其余所测数据及处理用于提取的番茄质量（g）30.80吸光度0.260稀释倍数5水分（）90.3M=（吸光度*倍数

9、）/（质量*（1-水分）0.435番茄红素红外光谱测定光洁扫描曲翁注任GvTi)序号峰/谷波长（am）Abs1峰498.000.4362峰467.000.5503峰359.00-0.003时间：7月8号萃取剂：坏己烷水分测定：样品a样品b烘干前质量（g）5.135.07烘干后质量（g）0.540.39水分（g）4.594.68水分百分比（）89.592.3水分平均值（）90.9注：记录数据已去除烧杯的质量其余所测数据及处理用于提取的番茄质量（g）31.1吸光度0.231稀释倍数10水分（）90.9M=（吸光度*倍数）/（质量*（1-水分）0.816薄层色谱展开剂（环己烷：石油醯：氯仿=4:4:

10、1.5）3=两线间距b=番茄红素跑出的距离bB胡萝卜素跑出的距离第一组a=5.90cmb=2.82cm番茄红素的Rf=b/a=0.478第二组a=5.75cmb=2.65cmb,=4.58cmB胡萝卜素的Rf=b7a=0.776b=470cmB胡萝卜素的Rf=b7a=0.817综合求平均：番茄红素的Rf=0.470B胡萝卜素的Rf=0.797番茄红素的Rf=b/a=0.461八结果分析及讨论1三种萃取剂最后得到的M值人小是环己烷乙酸乙酯石油醛，与实际应得结果乙酸乙醛石油醛环己烷有所出入。分析原因一：长时间没有进行实验操作，生手操作中产生的误差二：温度的影响三：一组第二天借用了搅拌器，搅拌器转速

11、被改变，第三天的转速有所增加，未加以注意，搅拌器速率增加对色素提取有促进作用，可能也对实验结果产生了一定程度上的影响。2番茄红素红外光谱测定，番茄红素的红外光谱最高值比理想的502小了点，可能原因是其中掺杂了胡萝卜素，导致最高峰值变小。3薄层色谱两组实验测得值，可进一步了解两个色素的性质不同导致的差异九整体实验的进程及思考在做这个实验之前，我只是人体的看了一下做的是什么实验，可能是短学期的前两周过的比较松散，没有对这个实验引起足够的重视，未做任何准备。所以老师第一天讲解时理解起来有点困难。实验前一天粗略看了一下实验操作，以为可以临阵磨枪，不料第二天刚开始做第一个抽滤时就因为润洗不干净，使颜色出

12、现偏差，重做。后面的过程也做得磕磕绊绊，由于对实验的不理解，很多地方出现疏漏，实验操作也经常错误，比如蒸馆时不加沸石之类的。实验做到第二天的时候操作已经基本上熟练，但是将抽滤液分液时发现色素很少，没有追究原因欲以重做，老师指出色素残留在抽滤瓶中，经过润洗得到少量色素，得以进行接卞去的实验操作，柱层析时色素卞去太慢，经过指导，在洗脱液中加入少量氯仿，色素下去速度明显加快。实验的第三天，基本上所有的流程都能很顺利的进行了，实验进程加快，能够更好的合作了。整个实验坐下来最人的感受就是，技能不用就会很快退化，对有机实验的操作实在太生疏，做什么事情，如果想要做好，就要事先做好足够的了解和准备。最人的收获就是可以练习到了各种实验操作，增强了自己做事动脑的意识，学会了如何与他人合作。参考文猷：1、杨春文番茄红素的提収及纯化条件的研究甘肃联合大学学报（H然科学版）第23卷第1期2、侯纯明，刘德志，谢颍，李文泽番茄红素提取及优化研究辽宁化工第33卷第8期9