乙型肝炎的实验室诊断

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1、乙型肝炎的实验室诊断血清标志物对于乙肝的病原学诊断最初、也是最常用的是乙肝病毒血清标志物（HBVM）检测。HBVM主要包括：两对半（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）、HBxAg、HBxAb、前S抗原及抗体、DNA多聚酶（DNAP）及抗体等。通过检测HBVM可以间接的多角度了解患者HBV感染、复制以及病情恢复情况。常用血清标志物是两对半，临床意义如下： 1.表面抗原（HBsAg）：位于病毒外壳表面，由HBV基因组S区和前S区基因编码，完整的大分子HBsAg是完整病毒的必需条件。血清HBsAg的出现，意味着HBV的现症感染，是乙肝血清学检查最重要的指标。HBsAg虽然只

2、是HBV存在的间接指标，但诊断乙肝的最常用也是最重要的指标，主要因它出现最早，一般在感染后3周出现，有利于早期诊断。第二，它持续时间长，急性患者至少持续5周，最长可持续5个月，并且在血液中的释放量大，非常容易检测。前S1和前S2紧随HBsAg而出现在血流中，并与HBeAg和HBVDNA相关。2.表面抗体（HBsAb）:由于病毒HBsAg抗原性诱发机体产生的保护性抗体，HBsAb是一种保护系抗体，在HBsAg消失后数周后出现，并可持续多年存在。HBsAb是所有乙肝要关抗体中出现最晚的。常与HBcAb同时存在，而很难与HBsAg同时被检出来。抗前S1抗体出现于潜伏期，是所有抗体中出现最早的。抗S3

3、抗体出现在急性期，处于HBV复制终止前后，提示有清除病毒的作用。 3. e抗原（HBeAg）:HBeAg是一种可溶性蛋白抗原，一般仅见于HBsAg阳性血清中，阴性中偶见。HBeAg出现在血中稍后于HBsAg，同时消失很快，所以窗口期也不能出现。HBeAg是由HBVDNA开放读码框前C区编码，与HBV的活动性复制密切相关，是HBV传染性的重要指标。HBcAg是HBV复制的标记，而HBeAg是HBV正在复制的标记。 4. e抗体（HBeAb）:在病毒复制过程中，e抗原暴露诱发机体产生。有一定保护作用。HBeAb紧接着HBeAg消失而出现，表示HBV复制已经减少，传染性降低。HBeAb持续时间不长，

4、几月后逐渐消退。血清中HBeAb的检出意味着病毒复制中止或减少。 5. 核心抗体（HBcAb）:由病毒C区编码的HBcAg诱导产生，没有保护作用。由于HbcAg位于病毒内部，一般方法不能检出，在血清中只能检测到HbcAb。HbcAb可以作为HBV感染的标志。血清中的检出HBcAb表明病毒正在或曾经进行复制。常说的HBcAb一般是指HBcAbIgG，是最用的两对半中最先出现的抗体，一般在HBsAg出现后24周出现。当HBsAg消失，而HBsAb还没有出现时，常只能检出HBcAb，因此临床将此阶段称为窗口期。HBcAb和HBsAb一样也可以持续多年存在。HBcAbIgM仅出现在急性期，具有鉴别诊断

5、意义。.乙型肝炎病毒DNA聚合酶（DNAP）DNAP位于HBV核心部分，有逆转录酶活性，是HBV复制的直接指标。基因诊断随着分子生物学技主的发展，应用DNA分子杂交和PCR技术可以检测出血清、体液和组织中HBV DNA的存在情况，是直接、准确的病原学诊断证据。使用PCR及定量PCR技术检测HBV DNA，是乙肝诊断的重大进步。1HBV DNA检测或定量检测（病毒载量）：（1） 灵敏度提高：WANG等对206名HBsAg阴性、ALT阴性的健康供血者用PCR方法检测HBV DNA，检出阳性9例，占4%。这说明HBsAg虽然是HBV的感染的标志，但由于S基因的变异或低水平表达，而常规方法难以检出，会

6、导致漏检。而使用PCR能较好的弥补。（2） 与HBVM结合使用，可以对临床提供更为有效、更有价值的信息：基因学诊断与HBVM并不是矛盾的，各有优势，在乙肝的诊治过程结合使用更具临床价值。如：临床有资料显示，对于HBV DNA阳性、HBeAg阳性的慢性乙肝病人病情较HBV DNA阳性、HbeAb阴性的病人重，自然缓解率也较低。（3） 动态监测病毒的载量是疗效监测的重要指标：乙肝疗效监测以前用的是指标血清学“两对半”检测，但由于血清学指标反应相对滞后、灵敏度较差，并不是理想的疗效监测指标。近年随着定量PCR在临床上的应用，连续监测HBV DNA血清载量已经成为疗效监测的理想指标。临床上一般认为用药后HBV DNA下降到105拷贝ml以下为对药物完全应答；定量下降大于2个数量级为对药物部分应答；未达上述标准为无应答。 常见的两对半结果HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb病程-未感染+-感染早期+-+-感染初期+-+-+急性或慢性乙型肝炎，高传染性+-+急性、慢性乙型肝炎或HbsAg携带者+-+急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝，弱传染性-+急性HBV感染“核心窗口期”或既往曾感染过乙肝，有流行病学意义-+乙肝恢复期，弱传染性-+-+急性乙肝康复期，开始产生免疫力疫苗接种后或HBV感染后康复-+-+急性HBV感染康复期或有既往感染史，目前保持免疫力