小鼠缺氧实验实验报告

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1、篇二：缺氧缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响【摘要】目的：本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法：通过复制缺氧动物模型，观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。通过测定耗氧量和小鼠的存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。结果：中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响与对照组相比，存活时间和总耗氧率有显著性差异；复制不同原因造成的不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。结

2、论：给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率，延长其存活时间(p<0.01)。co中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间，降低呼吸频率。美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠的作用，已定程度延长小鼠存活时间，延缓呼吸频率的下降。【关键词】缺氧氯丙嗪总耗氧率co亚硝酸盐美兰存活时间当供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型，不同类型的缺氧，机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。1. 材料和方法1.1 实验动物：小白鼠(雌性)。药品：氯丙嗪(chlorproma

3、zine)、钠石灰(sodalime)，亚硝酸钠(sodiumnitrite)、亚甲基蓝(美蓝)(methyleneblue，mb)、0.9nacl(physiologicalsalinesolution)、co(carbonmonoxide)。1.2 器材：100、500ml广口瓶和测耗氧装置。1.4方法1.4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响取2只性别相同体重相近的小鼠，准确称取体重，并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组。氯丙嗪组按0.1ml/10g体重腹腔注射0.25氯丙嗪，随即安放在冰浴的纱布上1015min，使呼吸频率降至7080次/min;生理盐水组按0.1ml/10g体重腹腔

4、注射生理盐水，室温放置1015min，作为对照。之后将2只小鼠分别放入100ml的广口瓶内，连接好测耗氧装置。如右图。1.4.2 不同原因造成的缺氧取2只性别相同体重相近的小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有5g钠石灰的100ml密闭瓶中;一氧化碳中毒组小鼠放入500ml密闭瓶，注入10mlco气体。另取2只性别相同体重相近的小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射50g/l亚硝酸纳0.2ml，并随即腹腔注射生理盐水0.2ml;亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射50g/l亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射10g/l亚甲基蓝0.2ml。2. 观察项目2.

5、1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响记录下小鼠的体重w(g)。从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡，分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠的存活时间t(min)、总耗氧量a(ml)。按以下公式计算出总耗氧率rml/(gmin):rml/(gmin)=a(ml)+w(g)+t(min)2.2 不同原因造成的缺氧乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组：处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率(次/min)。待塞紧瓶塞开始记时后，每隔5min测一次呼吸频率（次/min），并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组：处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率（次/min）。

6、待注射药品后，每隔5min测一次呼吸频率（次/min），并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。将4只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色的不同。3. 实验结果3.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响氯丙嗪组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重无显著性差异（p>0.05）；氯丙嗪组小鼠的耗氧量为12.75.02ml，生理盐水组小鼠的耗氧量为16.03.01ml，两者无明显差异（p>0.05）；氯丙嗪组小鼠耐缺氧存活时间为44.717.21min，生理盐水组小鼠耐缺氧时间为21.03.61，两者相比有高度显著性差异（p<0.01）；氯丙嗪

7、组小鼠的耗氧率为0.0130.005（ml/g/min），生理盐水组小鼠的耗氧率0.030.002（ml/g/min），两者相比有高度显著性差异（p<0.01）。见表1。表1.氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响实验结果统计表小鼠体重（g）样本123456789对照2319实验22252225242223222223.01.32&总耗氧量（ml）对照19.514.016.014.017.417.011.521.013.516.03.01实验存活时间（min）总耗氧率（(ml/g/min)对照实验47523523245931607144.717.21*对照0.0340.0350.03

8、30.0350.0330.0340.0310.0370.0290.030.002实验0.010.0110.0130.0140.0160.0150.0240.0050.0120.0130.005#10.52514.32110.08.09.519.917.06.019.012.75.02$2216212215262121.03.612225252325222222.9x?s1.96注：*p<0.01vs对照组；p<0.01vs对照组；&p>0.05vs对照组,$p>0.05vs对照组3.2不同原因造成的缺氧由表2可知，亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间最短，其次为co中毒组

9、。存活时间最长的是亚硝酸钠美兰组，可见美兰具有抗亚硝酸钠中毒的作用。表2.乏氧、co中毒、亚硝酸钠中毒小鼠的呼吸频率（次/10秒）缺氧类型乏氧co中毒亚硝酸钠亚硝酸钠美兰0min29.74.9029.75.9029.73.5429.75.685min31.26.9624.78.7226.17.1325.94.9910min30.47.5226.89.3128.78.3815min25.08.9728.56.0220min30.16.8325min29.56.0730min28.96.243.3亚硝酸钠中毒与亚硝酸钠+美兰的两组小鼠的存活时间有显著性差异，美兰组存活时间显著延长(p<0.0

10、1)。见表3。表3.亚硝酸盐中毒及其美兰的治疗效果缺氧类型亚硝酸盐中毒性缺氧亚硝酸盐中毒性+美兰存活时间9.561.5948.6714.23*注：p<0.013.4 分别观察乏氧性缺氧组、一氧化碳中毒组、亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组的小鼠肝脏组织颜色，如表3。表4.乏氧、co中毒、亚硝酸钠中毒的小鼠存活时间和肝血、耳尾唇颜色比较类别乏氧体重(g)19存活时间(min)18肝血颜色暗红色耳尾唇颜色青紫色(紫绀)conano2nano2+mb221818.571230樱桃红色深咖啡色浅咖啡色樱桃红色青石板色青石板色，稍浅4. 讨论实验结果显示氯丙嗪组的存活时间显著长于生理盐水组，耗氧率也显著低

11、于生理盐水组。氯丙嗪为吩噻嗪类抗精神病药物，主要阻断脑内多巴胺受体和a肾上腺素受体和m胆碱受体，具有神经安定作用，它对中枢神经系统有较强的抑制作用。小鼠注射氯丙嗪后，置于低温使其进入假冬眠状态。小鼠外界活动停止，新陈代谢率降至最低，因此能量利用减少，单位时间的耗氧量减少，即耗氧率减小。在氧总量相等的情况下，存活时间就比生理盐水组长。乏氧性缺氧，主要表现为动脉血氧分压降低，氧含量减少，组织供养不足。正常毛细血管的血液中氧离血红蛋白浓度约为26g/l。乏氧性缺氧时，动静脉血中的氧离血红蛋白浓度增高。当毛细血管血液中氧离血红蛋白浓度达到或超过50g/l时，可使皮肤和粘膜呈青紫色。co与hb的亲和力比

12、o2大210倍，hb与co结合形成碳氢hb，从而失去运氧功能。co同时还能抑制红细胞内糖酵解，使其2,3-dpg生成减少，氧离曲线左移，妨碍hbo2中的氧解离，从而造成组织严重缺氧。此时外呼吸功能正常，故动脉血氧分压及血氧饱和度正常，但hb数量减少或性质改变，使血氧容量降低。组织中hbco增多，故皮肤、粘膜呈樱桃红色。亚硝酸盐可使hb中二价铁氧化成三价铁，形成高铁hb(hbfe3+oh)，三价铁因与羟基牢固结合而丧失携氧能力，加上hb四个二价铁中有一部分氧化为三价铁后使剩余的fe2+与氧亲和力增高，导致氧离曲线左移，使组织缺氧。高铁hb呈咖啡色或青石板色，因而使皮肤和粘膜呈现相同颜色2。低浓度

13、美兰为还原剂，抑制了氧化剂(亚硝酸钠)的中毒反应，中毒后即刻肌注可有效使小鼠存活时间延长2倍以上。本实验结果也显示，亚硝酸钠+美兰组小鼠的存活时间明显长于亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间（表3），说明美兰具有较好的拮抗作用。4.1 钠石灰的作用：钠石灰在两个实验中的用途也有很大区别：实验一中缺氧瓶内钠石灰吸收小鼠呼吸产生的co2造成负压，利于正确地测出耗氧量；实验二中加入钠石灰是为了排除高碳酸血症对缺氧实验的影响。参考资料：1.陆源,夏强.生理科学实验教程.杭州：浙江大学出版社,2004：240.2.陈季强.基础医学各论（上册）.北京：科学出版社，2004：492，495496.篇三：小鼠缺氧模型及

14、其分析缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素高伟飞（浙江中医药大学滨江学院10级临床专业临滨1班4组20102090114）一、实验目的：1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用2.复制几种类型缺氧的模型，观察血液颜色的特点，分析其机制根据大纲要求：掌握概念：缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧，紫绀、肠源性紫绀。熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。熟悉反映血氧情况的一些指标（氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度，动静脉血氧含量差）。掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制，掌握各型缺氧的特征（血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化）。二、实验原理：当组织供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍

15、时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。不同类型的缺氧，其机体的代偿适应性反应和症状也不同。根据缺氧原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。影响机体对缺氧耐受性的因素很多，如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。本实验才缺氧的不同环节入手观察呼吸变化及皮肤黏膜的颜色改变。实验通过动物的不同代谢状况、中枢神经系统功能和动物所处环境温度，观察动物的缺氧耐受性。三、实验对象：小鼠四、实验材料：电子秤、注射器、钠石灰、广口瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸；生理盐水、美兰亚硝酸钠、氯丙嗪、冰块、量筒等五、实验方法：1 、取2只小鼠，注射及处

16、理：1号：亚硝酸钠及美兰0.2ml，左下腹注射2 号：亚硝酸钠及生理盐水各0.2ml，左下腹注射注射完，观察，2号小鼠立即死亡，1号小鼠仍存活；然后处死解剖，剪下一片肝脏组织放于滤纸上，观察肝的颜色。2、取2只小鼠称重，编号3、4注射及处理：3 号：氯丙嗪0.2ml，左下腹注射4 号：生理盐水0.2ml左下腹注射将3、4号小鼠分别分别放入钠石灰的广口瓶，塞上塞子，记录下量筒的液面，连通耗氧装置，开始计时，直至小鼠死亡，记录下时间和量筒下降的液面刻度计算两只小鼠的耗氧量小鼠耗氧率r（ml/min/g）=a/（w*t.）六、实验结果：1、几种类型的缺氧序号1注射及处理nano2+美兰0.2ml2n

17、ano2+生理盐水0.2ml2、不同条件下小鼠缺氧耐受性序体重注射及处理存活时间氯丙嗪0.2ml（冰浴）420.6生理盐水（常温）27分180.03227分总耗氧量（ml）8耗氧率（ml/min/g）0.016血液性缺氧青石板色缺氧类型血液性缺氧肝脏颜色暗红色号（g）318.8七、实验分析：1、血液性缺氧：由于血红蛋白的质或量的改变引起的缺氧。亚硝酸盐可使血红素中二价铁氧化成三价铁，形成高铁血红蛋白，导致高铁血红蛋白血症。美兰为还原剂，可抑制氧化剂的中毒反应。因此1号小鼠存活，2号小鼠死亡。2、不同条件下小鼠缺氧耐受性氯丙嗪是中枢多巴胺受体的阻断剂，具有镇静、抗精神病、镇吐、降低体温及基础代谢

18、、a-肾上腺素能受体及m-胆碱能受体阻断、抗组织胺、影响内分泌等作用，再加上冰浴，制造低温环境，使得3号小鼠的基础代谢率将为最低，可延长其死亡时间。八、实验结论：1 、缺氧是这2小鼠死亡的共同原因，不同的药物是小鼠死亡的条件，氯丙嗪加上低温可延长小鼠的死亡时间。2 、高铁蛋白血症（亚硝酸盐中毒）属于血液性缺氧，原因：二价铁离子被氧化为三价铁离子，肝脏呈青石板色。篇四：抗缺氧实验中药药理学实验教学大纲（供四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用）i前言本大纲适用于四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用。编写本大纲的目的是要求学生在学习中药药理学基础课的过程中，通过实验课的学习使学生掌握必要的中

19、药药理实验原理、方法和技能，能正确、合理地使用仪器，为学习中医学基础课、中药学专业课打下牢固的基础；培养学生严肃认真的工作作风、实事求是的科学态度和独立分析问题、解决问题的能力；培养学生观察和分析实验现象的能力，巩固和加深对中药药理现象和规律的理解。现将大纲使用中有关问题说明如下：一 为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与教学要求级别对应，并统一标示（核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一边内容不标示）便于学生重点学习。教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据不同教学

20、手段，讲授重点内容和介绍一般内容。三总教学参考学时为12学时。四使用教材：中药药理学实验指导，由中药药剂教研室自编。ii正文一 实验一柴胡对发热家兔的解热作用教学目的观察柴胡对发热家兔及正常兔体温的影响,了解柴胡解热作用的特点二 教学要求（一）掌握发热动物模型的制作方法。（四）掌握肛温计测定家兔体温的方法。（五）掌握动物模型分组方法。（六）熟悉实验结果的统计处理方法。（七）了解实验数据座标图示法。三 教学内容（一）动物选择原则。（二）测量正常体温值。（三）分组。（四）家兔发热模型的制作。（五）给药。（六）测量不同时段的体温值。（七）实验数据的处理与图示法。（八）实验报告的书写要求。实验二生大黄

21、、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响（炭末法）一教学目的了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄、芒硝配伍的药理意义二 教学要求（一）掌握泻下药推进小肠运动的实验方法。（二）熟悉炭末法。（三）掌握炭末推进率测量与计算方法。（四）了解小白鼠幽门与回盲部解剖部位。三 教学内容（一）动物选择原则。（二）称重,标记。（三）分组。（四）灌胃给药。（五）处死动物,解剖。（六）测量尺寸。（七）计算,实验数据处理。（八）实验报告的书写要求。一 实验三延胡索及金铃子散镇痛作用教学目的了解用热板法和扭体法筛选镇痛药的实验方法;观察延胡索及金铃子散的镇痛作用。二 教学要求（一）掌握热板法与扭体法。（二）

22、掌握痛阈值的测定方法。（三）掌握合格小鼠筛选方法。（四）熟悉实验结果的统计处理方法。（五）了解实验数据座标图示法。（六）掌握判定扭体反应的方法。三 教学内容（一）动物选择原则。（二）测量正常痛阈值。（三）筛选,分组。（四）给药。（五）测量不同时段的痛阈值。（六）实验数据的处理与图示法。（七）实验报告的书写要求。实验四人参抗应激作用一 教学目的,研究人参抗应激作用。学习小白鼠游泳和耐常压缺氧的实验方法二 教学要求（一）掌握小白鼠游泳实验方法。（二）掌握小白鼠耐常压缺氧的实验方法。（三）熟悉实验结果的统计处理方法。三 教学内容（一）动物选择原则。（二）测量水温。（三）筛选,分组。（四）给药,记时。

23、（五）测量小鼠游泳时间和耐缺氧时间。（六）实验数据的处理。（七）实验报告的书写要求。iii教学组织与考核方法一 实施机构：由中药药剂教研室执行。二 组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。三 教学方法：（一）实验教学：采用启发式、讨论式、交互式课堂教学方式，辅助现代教育技术和传统教学手段。重点内容以介绍为主，一般内容以自学为主。（二）教学点：在中药药剂实验室教学，承担教师由中药药剂教研室委派。（三）辅导形式：课堂答疑、讨论、复习等结合。考核办法：每次实验后批改实验报告，学生的实验操作及报告成绩占课程总评成绩的20%；实验要点考核占课程期末考试卷面成绩的10%左右。实验

24、类型验证型验证型实验验证型实验四验证型iv教学时数分配表实验内容教学时数实验一柴胡对发热家兔的解热作用3实验二大黄对小白鼠小肠运动的影响3三元胡及金铃子散对小白鼠的镇痛作用3人参抗应激作用合计12篇五：小白鼠的缺氧实验缺氧对小白鼠体征的影响(潍坊医学院2009级临床26班山东潍坊261053)摘要目的：观察缺氧对小白鼠体征的影响。方法：取五只小白鼠，通过制作小白鼠的乏氧性缺氧、一氧化碳中毒性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧三种模型并与正常状态的小白鼠作对比，观察小白鼠的行为及皮肤、黏膜、肝脏的变化。结果：小白鼠的乏氧性缺氧模型肝脏为青紫色，一氧化碳中毒性缺氧模型为樱桃红色，亚硝酸钠中毒性缺氧模型肝脏青

25、石板颜色，正常小白鼠肝脏为红色。结论：不同的缺氧因素对小白鼠肝脏颜色有不同影响。关键词乏氧性缺氧，一氧化碳中毒性缺氧，亚硝酸钠中毒性缺氧，青石板颜色前言缺氧是由于机体供氧不足或组织利用氧障碍引起的机体代谢、功能和形态结构改变的病理过程1。理论上由于不同机制的缺氧通过对血红蛋白的影响改变了血红蛋白的颜色从而我们可以复制相应模型以观察其血液的变化。至于类似的实验，前人已经将其机制研究清楚了，做本次实验只是加以验证，观察是否与理论相符合，有时也许会有新的发现，但主要是为以后的临床学习打下基础。材料与方法1实验材料器材：小白鼠缺氧瓶、co发生装置、1ml注射器、酒精灯、剪刀、镊子。药品：钠石灰、甲酸、

26、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%亚硝酸钠、1%美兰、生理盐水。动物：小白鼠2缺氧模型的制备21乏氧性缺氧模型的制备取钠石灰约5g及小白鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般情况，呼吸频率(次/10s)，深度，皮肤和口唇粘膜颜色，然后紧塞瓶塞，记录时间，以后每3min重复观察上述指标1次(如有其他变化则随时记录)直到动物死亡为止。(1) 动物尸体留待2.2、2.3、2.4实验做完后，再依次打开其腹腔，比较血液或肝脏颜色。2.2一氧化碳中毒性缺氧模型的制备(1) 装好co发生装置。(2) 将小白鼠放入广口瓶中，观察其正常表现，然后与co发生装置连接。(3) 取甲酸3ml放入试管中，加入浓硫酸2ml，塞紧。(

27、可用酒精灯加热，加速co产生，但不可过热以至液体沸腾，因co产生过多过快动物迅速死亡，血液颜色改变不明显。)(4)观察指标与方法同上。2.3亚硝酸钠中毒性缺氧模型的制备(1)取体重相近的两只小鼠，观察正常表现后，向腹腔注入5%亚硝酸钠0.3ml，其中一只注入亚硝酸钠后，立即再向腹腔注入1%美兰溶液0.3ml，另一只再注入生理盐水0.3ml。(2)观察指标与方法同2.1，比较两鼠表现及死亡时间有无差异。2.4解剖正常小白鼠取一只未做处理正常的小鼠，观察体表特征，后处死，观察其肝脏颜色。实验结果类型呼吸频率、幅度肝脏颜色皮肤粘膜颜色先加深加快低张性缺氧后变浅变慢暗红色青紫色一氧化碳中毒无改变樱桃红

28、色樱桃红色亚硝酸钠中毒无改变青石板颜色青石板颜色正常小白鼠无改变红色红色讨论乏氧性缺氧：轻度缺氧使呼吸中枢兴奋，呼吸先加深加快，重度缺氧抑制呼吸中枢使呼吸变浅变慢，皮肤黏膜呈暗红色则是由于hb结合的氧气过少引起，钠石灰用于吸于甁中co2以排除co2的干扰，po2降低里，也因肺通气量的增加，呼出较多的co2,使体内pco2和h+浓度降低，从而减弱低氧的刺激作用2。co中毒：呼吸无改变，主要与pao2正常有关，皮肤黏膜、肝脏呈樱桃红色。是由于cohb引起，co中毒性缺氧属等张性缺氧，呼吸系统的代偿不明显，故观察到小白鼠的呼吸逐渐减弱直至停止死亡因此加热时不能过猛，以免co产生过多、过快，使小白鼠迅速死亡，来不及观察。亚硝酸钠中毒：呼吸无改变，主要与pao2正常有关，皮肤黏膜、肝脏呈青石板颜色，是由于高铁hb引起，美兰是一种还原剂，可将fe3+还原为fe2+，具有解毒作用，可使亚硝酸钠中毒的小白鼠解救且皮肤黏膜颜色逐渐接近正常。