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1、速溶茶中茶多酚含量测定操作规程1 目的为了规范检测的操作过程，确保检测结果的正确与可靠性，特制定此操作规程。2 范围本规程适用于速溶茶中茶多酚含量的测定，本规程等效采用中华人民共和国国家标准。3 原理速溶茶是茶叶高浓缩生产的一种饮料制品，因此速溶茶中的多酚类物质同茶叶多酚类物质一样也能与亚铁离子形成紫蓝色络合物，从而用分光光度法测定其含量。4 仪器和用具4.1分析天平：感量0.0001g4.2分光光度仪4.3 25 mL的容量瓶4.4 1mL 的移液管4.5 250mL 的烧杯4.6电子天平：感量0.1g5 试剂和溶液 所用试剂应为分析纯 (AR) ，水为蒸馏水。5.1酒石酸亚铁溶液:称取 1
2、g ( 准确至 0.0001g)硫酸亚铁和 5g( 准确至0.0001g)酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L( 溶液应避光，低温保存，有效期一个月) 。5.2 pH7.5磷酸盐缓冲液 :磷酸氢二钠：称取23.9 g磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。磷酸二氢钾：称取经110烘干2 小时的磷酸二氢钾9.08g ，加水溶解后定容至1L。取上述1/15 mol/L的磷酸氢二钠溶液85 mL 和 1/15mol/L 的磷酸二氢钾溶液15 mL 混合均匀。6 操作方法称取 0.5g 的速溶茶粉试样，于 250mL烧杯中，加入少量水（本实验水均为纯净水或蒸馏水，根据试样的特性，溶解时加入 25的水或热水） ，
3、待试样充分溶解后， 定溶至 250mL，充分混合均匀。准确吸取上述试液1mL，注入 25mL的容量瓶中， 加水 4mL和酒石酸亚铁溶液5mL，待充分混合后，再加pH7.5 的缓冲液(4.2) 至刻度，用 10mm比色杯，在波长 540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度 (A) 。7 结果计算计算方法和公式速溶茶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表示，按下式计算 :A1.957 2L1茶多酚 ( ) 100100L2Mm式中 : L 1- 试液的总量（ mL）L2-测定时的用液量（mL）M-试样的质量（ g）m-试样干物质含量百分率（）A-试样的吸光度8结果报告试验报告应包括下列内容：8.1
4、使用的方法8.2测定的结果 ( 取小数点后一位)8.3 本规程中未规定的或另加的操作8.4 试样的产品名称、规格、批号。8.5试验日期，操作人员9 为了检测结果更加精确，应注意以下事项：9.1酒石酸亚铁溶液在配制时，应用室温下的蒸馏水进行溶解，不能用沸水或高于室温的蒸馏水。9.2配制好的酒石酸亚铁溶液尽量放在低温、避光的下保存，并在该溶液瓶上标明配制时间和溶液名称。9.3磷酸二氢钾必须是经110烘干 2 小时后，放在干燥器中冷却至室温，再称取9.08g 。磷酸氢二钠溶液瓶与磷酸二氢钾溶液瓶上也要标明配制时间和溶液名称。9.4在吸取 试液时，移液管垂直向下，其刻度应与人的视线保持在同一水平面上，
5、试液的凹液面与移液管刻度相切，让试液自然滴入容量瓶中，直到试液不再自然滴入为止。切勿用口或吸液球将移液管中的试液全部吹入容量瓶中，以免造成结果偏差。9.5加水和酒石酸亚铁溶液，一定待试剂充分混合后，才加pH7.5 的缓冲液，当试液面临近刻度时，用胶头滴管准确定溶至刻度，使试液的凹液面与容量瓶刻度相切。9.6对于多个并已经定溶好的容量瓶，尽量使用每个容量瓶配套的玻璃塞，进行震荡，摇匀。摇匀后，大约静置1分钟左右，进行检测。若只有一个玻璃塞，当摇匀一个容量瓶后，必须洗干净且用干燥的纸巾将玻璃塞擦拭干净才能摇匀另一个容量瓶中的试剂，以免交叉混合，造成结果偏差。9.7在进行测定时，分光光度仪需大约30
6、 分钟提前预热，使分光光度仪运行稳定，再根据分光光度仪使用方法进行检测。9.8在以试剂空白溶液作参比时，用干净并且干燥的纸巾将比色杯四边擦拭干净，再做以试剂空白溶液的两个比色杯不得有相差。若有相差，用六偏磷酸钠试剂进行比色杯清洗，直至无相差为止。当测定完同一组样品后，再测定另一组样品时，仍需用装有空白溶液比色杯，进行仪器调整。9.9测定完后，比色杯应立即清洗，并浸泡与干净的蒸馏水中，以待下次检测时用。9.10 检测采用对比实验，取已确认的样品做比对，来确定结果的准确性。9.11 同一个样品的不同的时间检测，检测结果相差大于0.5%时，应检查试剂的有效性，所用来作对比的以前样品的溶解性，水分含量，分光光度仪的稳定性及试液的取量等方面的影响因素，综合评定检测结果的正确性，若存在某方面的缺陷，应重新检测。
速溶茶中茶多酚含量测定操作规程
