《兰索拉唑脂质体的制备及影响因素考察》由会员分享，可在线阅读，更多相关《兰索拉唑脂质体的制备及影响因素考察（6页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、兰索拉唑脂质体的制备及影响因素考察 摘要目的：进行新型药物兰索拉唑的脂质体制备研究，以期得到具有较高包封率的制备方法。方法：考查了不同方法制备脂质体，筛选出最佳的制备兰索拉唑脂质体的方法，并考察了不同的影响因素对制备过程的影响。结果：采用乙醇注入法制备兰索拉唑脂质体，采用正交设计筛选处方，可以获得具有较高包封率的脂质体。结论：采用乙醇注入法可制得具有较高包封率的兰索拉唑脂质体，其中磷脂的组成和浓度、药脂比、胆固醇的量是影响包封率的主要因素。 关键词兰索拉唑；脂质体；包封率；乙醇注入法 中图分类号R94 文献标识码A 文章编号1673-7210（2007）07（a）-144-02 兰索拉唑（la
2、nsoprazole，LAP）是一种新型的抑制胃酸分泌的药物，对幽门螺杆菌也有抑制作用，在保护和促进胃黏膜溃疡愈合，降低溃疡复发率等方面具有良好作用1,2，临床上广泛用于十二指肠溃疡、胃溃疡、返流性食管炎等的治疗，疗效显著。脂质体作为一种新的药物载体，能减少药物在体内与血浆蛋白的结合，使药物靶向于特定组织，提高药物治疗指数，减少药物不良反应。把兰索拉唑做成注射用脂质体后，既可满足不能口服给药的患者，又能提高疗效，减少不良反应。本实验通过乙醇注入法制备了兰索拉唑脂质体，通过正交设计筛选了最佳处方，制得了包封率较高的兰索拉唑脂质体。 1 仪器与试药 集热式恒温磁力搅拌器（浙江省乐成电器厂），HPL
3、C泵（LC-10AT），HPLC检测器(SPD-10A，日本岛津公司），SHZ-D型循环水真空泵（河南巩义市英峪仪器厂），Amicon 8010 搅拌超滤器（美国Millipore公司），超滤膜（上海亚东核极树脂有限公司）。 兰索拉唑（汕头经济特区滨制药厂），注射用大豆磷脂（Epikuron 200，170，145，德国Degussa公司），胆固醇（天津博迪化工有限公司），维生素E（浙江医药股份有限公司新昌制药厂），曲拉通X-100（北京化学试剂公司），其他试剂均为市售分析纯。 2 方法与结果 2.1 制备方法的选择 尝试了多种制备方法，如薄膜分散法、反相蒸发法、乙醇注入法等，由于薄膜分散法和
4、反相蒸发法都需要使用氯仿，且制备时间都较长，制备出的兰索拉唑脂质体包封率与乙醇注入法没有显著差别（图1）。乙醇注入法简单快速，无不良溶剂的加入，因此选择乙醇注入法制备兰索拉唑脂质体。 2.2 包封率的测定 取兰索拉唑脂质体混悬液6.0 ml至超滤器内，用超滤膜氮气加压超滤，收集续滤液。精密量取该滤液适量，用流动相稀释定容至适当浓度进样分析，计算游离药物含量Wfree；精密量取兰索拉唑脂质体溶液0.1 ml，用Triton X-100破坏后，用流动相稀释定容至适当浓度进样分析，计算脂质体中药物总含量Wtot，并计算包封率En(%)，其中En(%)=(Wtot-Wfree)/Wtot100%。 2
5、.3 处方筛选 2.3.1 单因素考察本文采用乙醇注入法制备兰索拉唑脂质体，以脂质体包封率为主要指标考察了磷脂种类、磷脂浓度、药脂比、胆固醇与磷脂的比、VE用量的影响。 2.3.1.1 磷脂种类对包封率的影响：考察了不同种类的磷脂，如大豆磷脂SPC(Epikuron200)、PC170、PC145，使其浓度都为20 mg/ml，固定其他因素不变，考察磷脂种类对包封率的影响，结果见图2。结果显示，PC145制备的脂质体包封率较低，而PC200与PC170两者制备的脂拉唑的包封率无显著差别。 2.3.1.2 磷脂浓度对包封率的影响：固定其他因素不变，只改变磷脂浓度，使所得脂质体磷脂的浓度分别为20
6、、30、40、50 mg/ml，考察磷脂浓度对药物包封率的影响。结果见图3。磷脂浓度对药物的包封率影响较大。磷脂浓度增加，包封率上升，当磷脂浓度达到40 mg/ml时，包封率变化不多，因此，选择40 mg/ml的磷脂浓度进行其他单因素考察。 2.3.1.3 药脂比对包封率的影响：固定磷脂与胆固醇的比例为4:1，其他因素不变，变化药物的浓度，使处方中药物与磷脂的质量比为1:20，1:30，1:40，结果见图4。结果显示随着药脂比的增加，包封率略有增加，但增幅不大。 2.3.1.4 胆固醇与磷脂的比例对包封率的影响：固定处方中药脂比为1:30，改变胆固醇的浓度，使胆固醇与磷脂的比例为1:2，1:4
7、，1:8，结果见图5。结果显示随着胆固醇浓度的增加，包封率也相应的增加，但增幅不大。 2.3.1.5 抗氧化剂的加入对包封率的影响：固定药脂比1:30,胆固醇与磷脂比1:2，其他因素不变，加入0.5，1.0，1.5的维生素E，与未加抗氧化剂的包封率进行比较，结果见图6。结果表明，抗氧化剂的加入使药物的包封率略有增加，但随着抗氧化剂的增加，包封率并没有相应增加，说明抗氧化剂的量对药物包封率影响不大，最后选择0.5的维生素E。 2.4 正交设计优化处方 在以上单因素考察的基础上，为了综合考察一些因素对乙醇注入法制备兰索拉唑脂质体包封率的影响，采用正交试验筛选和优化处方。选用4因素、3水平进行试验。
8、4个因素分别为磷脂种类（A）、磷脂浓度（B）、药脂比（C）、胆固醇与磷脂比（D），以4个主要因素为变量，每个因素又设定3个水平，进行正交设计，以包封率为考察指标来筛选处方。结果见表1。 通过直观分析可以看出，各因素重要程度依次为：ABCD。其中磷脂种类对包封率的影响最大，其次是磷脂的浓度，而胆固醇与磷脂比对包封率影响不大。综合以上结果，可以确定乙醇注入法制备兰索拉唑脂质体的处方为：磷脂PC200浓度为45 mg/ml，磷脂与胆固醇比为2:1，药脂比为1:30。 用以上处方制备兰索拉唑脂质体，重复实验3次，所得兰索拉唑脂质体的平均包封率为83.20%。 3 讨论 含药脂质体的制备方法有主动载药和
9、被动载药两种，本文制备的兰索拉唑脂质体的乙醇注入法属于被动载药法。对于被动载药法，一般来说，药物的包封率与脂溶性有关，脂溶性高的药物可以获得较高的包封率。而兰索拉唑属于脂溶性药物，通过处方的优化，得到了包封率较高的兰索拉唑脂质体。本文采用的乙醇注入法3,4是目前可应用于工业化大生产的脂质体制备方法，相较于其他多种制备方法，乙醇注入法制备过程快速，操作简单，易于放大。 由正交试验结果可以看出，磷脂种类对最后药物的包封率影响最大，其次是磷脂的浓度，而胆固醇与磷脂的比例对包封率的影响最小。由试验结果可知，磷脂浓度越大，脂质体包封率越高，但这个趋势不是很明显，在单因素考察中，当磷脂浓度增加到一定量时，
10、制备的脂质体包封率并不显著增加。 胆固醇属于两亲性物质，其亲油性较亲水性强。磷脂与胆固醇相互间隔定向排列，形成双分子层，当温度在磷脂的相变温度以上时，可以增加磷脂的流动性，当温度在磷脂的相变温度以下时，胆固醇又可以增加双分子层的稳定性，使其更加牢固。因此，胆固醇与磷脂是共同构成细胞膜和脂质体的基础物质，亦称为“流动性缓冲剂”（fluidity buffer）。本文经过处方筛选，最佳处方中磷脂与胆固醇的比例为21。 参考文献 1许华,俞励平,文洁,等.兰索拉唑抗实验性胃溃疡作用的研究J.中国病理生理杂志,2002,18(6):698-700. 2张蕾萍,白雪姣,翟燕琴.雷尼替丁、兰索拉唑和氢氧化
11、镁铝抗实验性胃溃疡的比较研究 J. 临床医药实践杂志,2004,13(4):257-258. 3Naeff R.Feasibility of topical liposome drugs produced on an industrial scaleJ.Adv Deliv Rev,1996,18:343-347. 4Wagner A, Vorauer-Uhl K, Kreismayr G, et al.The crossflow injection technique:improvement of the ethanol injection methodJ.J Liposome Res,2002,12: 259-270. （收稿日期：2007-04-25） “本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文”第 6 页 共 6 页
兰索拉唑脂质体的制备及影响因素考察
