荧光吉姆萨染色PPT学习教案

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1、会计学1第1页/共11页第2页/共11页步骤步骤 1.单层培养细胞，用单层培养细胞，用PBS洗洗2次；次； 2. 4%福尔马林固定福尔马林固定10分钟后；用分钟后；用PBS洗洗1次次 3.以以510ug/mI Hoechst33258染色染色510分钟分钟 水冲洗水冲洗 4.荧光显微镜观察。荧光显微镜观察。结果结果 凋亡细胞核呈强亮的兰色荧光及明显核形态，凋亡细胞核呈强亮的兰色荧光及明显核形态， 正常细胞仅呈弱荧光，死细胞不被正常细胞仅呈弱荧光，死细胞不被Hoechst332 染色。染色。第3页/共11页正常细胞 凋亡细胞细胞胞核细胞胞核Hoechst33258荧光染色荧光染色第4页/共11页

2、第5页/共11页第6页/共11页第7页/共11页第8页/共11页用品：用品：原液的配置原液的配置: Giemsa 0.25g 甘油甘油 2 5ml 甲醇甲醇 25ml 缓冲液的配置缓冲液的配置: 1/15mol KH2PO4 1/15mol Na2HPO4 :=4:6 pH=6.9染色液配置染色液配置:1份原液份原液+9份缓冲液份缓冲液 第9页/共11页步骤：步骤： 1.单层培养细胞，单层培养细胞，PBS洗二次；洗二次； 2.甲醇固定甲醇固定 10分钟分钟; 3. 用滴管将配好的染色液布满整孔用滴管将配好的染色液布满整孔; 4.染染10分钟，用自来水冲去染液；分钟，用自来水冲去染液； 5.显微镜计数，统计克隆形成率。显微镜计数，统计克隆形成率。第10页/共11页