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1、会计学1实验血液葡萄糖的测定实验血液葡萄糖的测定第1页/共19页 1.1.兰伯特兰伯特比尔定律比尔定律兰伯特兰伯特(Lambert) (Lambert) 阐明了透过光线的强度阐明了透过光线的强度(I)(I)和吸收层厚和吸收层厚度度(L)(L)的关系。的关系。I=I010-KLI=I010-KC比尔比尔(Beer)(Beer)又提出了又提出了透过光线的强度透过光线的强度(I)和吸收物浓度和吸收物浓度(C)(C)之间也具有类似的关系。之间也具有类似的关系。 二者的结合称为兰伯特二者的结合称为兰伯特比尔定律，其数学表达式比尔定律，其数学表达式为：为： I=I010-KCL log（I0/I)= KC
2、L L第2页/共19页 ODlg（I0/I)= KCL 式中式中OD：光密度；描述溶液对光的吸收程度；：光密度；描述溶液对光的吸收程度； L：液层厚度：液层厚度(光程长度光程长度)，通常以，通常以cm为单位；为单位； c：溶液的浓度，单位：溶液的浓度，单位gL K: 吸光系数，单位吸光系数，单位Lgcm ； 或或: OD lg（I0/I)= CL L：液层厚度：液层厚度(光程长度光程长度)，为，为1cm； c：溶液的摩尔浓度，单位：溶液的摩尔浓度，单位molL； ：摩尔吸光系数，单位：摩尔吸光系数，单位Lmolcm K与与的关系为：的关系为： K =/M （M为摩尔质量）为摩尔质量） 第3页/
3、共19页（1 1）在数值上等于浓度为在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为、液层厚度为1cm时该时该溶液在某一波长下的吸光度。溶液在某一波长下的吸光度。（2 2）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数特征常数；不随；不随浓度浓度c c和光程长度和光程长度L L的改变而改变。在温度和波长等条件一定的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，时，仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；（3 3）可作为定性鉴定的参数；）可作为定性鉴定的参数；第4页/共19页OD标标KC标标LOD测测 KC测测L(1) 计算法（计
4、算法（标准品法测定未知样品含量标准品法测定未知样品含量）（2) 标准曲线法标准曲线法C测=OD测OD标C标第5页/共19页0.575光源单色器吸收池检测器显示第6页/共19页分光光度计的使用分光光度计的使用第7页/共19页第8页/共19页第9页/共19页第10页/共19页第11页/共19页葡萄糖酸葡萄糖酸Cu2O磷钼酸磷钼酸钼蓝钼蓝 Cu2+全血无蛋白滤液全血无蛋白滤液 葡萄糖葡萄糖 碱性铜试剂碱性铜试剂 Cu(OH) 2磷钼酸试剂磷钼酸试剂 磷钼酸磷钼酸第12页/共19页第13页/共19页空白管空白管低浓度标准管低浓度标准管测定管测定管无蛋白血滤液无蛋白血滤液 1.0蒸馏水蒸馏水2.01.01.0标准葡萄糖应标准葡萄糖应用液用液1.0碱性铜试剂碱性铜试剂2.02.02.0混匀混匀，沸水浴沸水浴中煮中煮8分钟分钟，用流动自来水冷却，用流动自来水冷却3分钟分钟（勿摇动血糖管）（勿摇动血糖管）磷钼酸磷钼酸试剂试剂2.02.02.0混匀混匀后放置后放置2分钟分钟1:4磷钼酸磷钼酸溶溶液加至液加至252525第14页/共19页第15页/共19页 测定管光密度值测定管光密度值 标准管光密度值标准管光密度值0.1 100 = 测定管光密度测定管光密度值值 标准管光密度值标准管光密度值 100 = 葡萄糖葡萄糖 mg/100ml第16页/共19页第17页/共19页第18页/共19页
实验血液葡萄糖的测定PPT学习教案
