基因重组与基因工程

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1、基因重组与基因工程一、选择题1F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为：A转化B转导C转染D转座E接合2通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型，称为：A转化B转导C转染D转座E接合3溶原菌是指： A整合了噬菌体基因组的细菌 B整合了质粒基因组的细菌 C含有独立噬菌体基因组的细菌 D含有独立质粒基因组的细菌 E含有独立噬菌体和质粒基因组的细菌4由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为：A转化B转导C转染D转座E接合5由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称为：A位点特异的重组B同源重组C基本重组D随机重组E人工重组6发生在同源序列间的重组称为：A位

2、点特异的重组 B非位点特异的重组 C基本重组 D随机重组 E人工重组7限制性核酸内切酶切割DNA后产生： A5 磷酸基和3 羟基基团的末端 B3 磷酸基和5 羟基基团的末端 C5 磷酸基和3 磷酸基团韵末端 D5 羟基和3 羟基基团的末端 E以上都不是8可识别并切割特异DNA序列的称： A限制性核酸外切酶 B限制性核酸内切酶 C非限制性核酸外切酶 D非限制性核酸内切酶 EDNA酶9限制酶的识别顺序通常是：A聚腺苷酸 B聚胞苷酸CRNA聚合酶附着点D回文对称序列E甲基化“帽”结构10限制酶： A从噬菌体中提取而得B可将单链DNA任意切开 C可将双链DNA任意切开 D可将双链DNA特异切开 E不受

3、DNA甲基化影响11限制酶的作用特性不包括： A在对称序列处切开DNA B同时切开双链DNA CDNA两链的切点常在同一位点 D酶切后的DNA片段多具有粘性互补末端 E酶辨认的碱基一般为46个12限制酶的特点不包括： A只识别一种核苷酸序列 B其识别不受DNA来源的限制 C不同生物的DNA经相同限制酶切割后产生相同末端 D对双链和单链DNA同样切割 E同一限制酶在一DNA分子上可有数个切点 13关于限制酶的叙述错误的是： A能识别DNA特定的碱基顺序并在特定的位点切开DNA B切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构 C它能专一降解经甲基化修饰的DNA D是重组DNA的主要工具酶 E主要从细菌中获得

4、14在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA的：A聚合酶B解链酶C连接酶 D拓扑酶 E内切酶15在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指： A建立单克隆抗体 B建立多克隆抗体 C构建重组DNA分子 D无性繁殖DNA- E有性繁殖DNA16无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是： A青霉素抗性 B卡那霉素抗性 C自我复制能力 D自我转录能力 E自我表达能力17重组DNA技术领域常用的质粒DNA是：A细菌染色体DNA的一部分 B细菌染色体外的独立遗传单位 C病毒基因组DNA的一部分 D真核细胞染色体DNA的一部分 E真核细胞染色体外的独立遗传单位18pBR322是： A天然的酵母质粒 B经人

5、工改造的酵母质粒 C天然的大肠杆菌质粒 D经人工改造的大肠杆菌质粒 E经人工改造的噬菌体19基因工程的操作程序可简单地概括为： A载体和目的基因的分离、提纯与鉴定 B分、切、接、转、筛 C将重组体导人宿主细胞，筛出含目的基因的阳性株 D将载体和目的基因接合成重组体 E限制酶的应用20基因工程的基本过程不包括： A载体和目的基因的分离 B限制酶的切割 CDNA重组体的形成及转化 D重组体的筛选与鉴定 E重组体的序列分析21理想的基因工程载体应： A分子尽可能大 B有适宜的限制酶切割位点 C含有多个耐药性基因 D不易在宿主细胞间转移E能整合于宿主细胞DNA，并随其复制22下列哪一种物质不能作为基因

6、（克隆）载体： A质粒 B噬菌体 CM13噬菌体 D病毒RNAE逆转录病毒DNA23用于转化哺乳类动物细胞的常用载体是： A质粒 B噬菌体 CM13噬菌体 D逆转录病毒DNA E大肠杆菌基因组24关于建立cDNA文库的叙述，错误的是：A从特定组织中提出mRNAB将特定细胞的DNA用限制酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA E加SAM，以使新生的DNA双链甲基化25cDNA文库包括该种生物：A某些蛋白质的结构基因B所有蛋白质的结构基因C所有结构基因D结构基因与不表达的调控区E内含子和调控区26某限制性内切核酸酶切

7、割5 GGGGGG AATTCC3 序列后产生：A5 突出末端 B3 突出末端C5 及3 突出末端D5 或3 突出末端E平头末端 27目的基因与载体连接不涉及：A限制酶B单链核酸酶C末端脱氧核苷酸转移酶DDNA连接酶E核酸外切酶28理想的宿主细胞不应有下列哪种特点：A易接纳重组子B对载体的复制扩增无严格限制C不存在特异的限制酶体系以降解外源DNAD不对外源DNA进行修饰 E含有载体的筛选标记基因29基因工程中不需要： A限制酶 B基因载体 CDNA连接酶 D末端脱氧核苷酸转移酶 E核酶30重组噬菌体DNA转入宿主细胞的过程属于： A转化 B转导 C转位 D转染 E转录 31有关重组体转化及表达

8、的叙述，错误的是： A宿主细胞经CaCl2处理后对重组体的通透性增加B电击法也可增加宿主细胞的通透性 C噬菌体为载体的重组体必须以体外包装的方式转化宿主细胞 D真核基因难于在原核细胞中表达E转化生殖细胞可采用直接导入的方法32连接目的基因与载体不能采用： A粘端连接 B平端连接 C尾接法 D人工连接器 E非共价键连接33直接针对目的DNA进行筛选的方法是：A青霉素抗药性 B氨卞青霉素抗药性C分子杂交D分子筛E电泳34“克隆”某一目的DNA的过程不包括： A基因载体的选择与构建 B外源基因与载体的拼接 C重组DNA分子导入受体细胞 D筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞 E表达目的基因编码的蛋白质

9、35表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：AEcoli表达体系B原核表达体系C酵母表达体系D昆虫表达体系E哺乳类细胞表达体系36不能用作克隆载体的DNA是：A质粒DNAB噬菌体DNA C细菌基因组DNAD腺病毒DNAE逆转录病毒DNA37克隆的真核黄素基因组DNA可在多种系统表达，例外的是：AEcoli表达体系B酵母表达体系 C昆虫表达体系 DCOS细胞表达体系 ECHO细胞表达体系38原核生物的粘端连接方式不涉及；A质粒B限制性核酸内切酶C核酸外切酶D退火EDNA连接酶二、X型选择题1自然界基因转移可能伴发基因重组的有：A接合作用B转化作用C转导作用D转座2基因组通常是指： A一个病毒所含的全

10、套基因 B几个基因组成的DNA片段 C体细胞或生殖细胞所含的一整套基因 D一条染色体上所含的全部基因3基因工程的特点：A在细胞水平上操作 B在分子水平上操作 C在细胞水平上表达 D在分子水平上表达4基因工程过程涉及： A载体和目的基因的分离 B限制酶切割载体和目的基因 CDNA重组体的转化与表达 DDNA重组体扩增、筛选与鉴定5限制酶：A能识别并切开DNA分子中某些碱基序列B酶辨认的碱基序列具有回文结构C酶辨认的碱基序列不具有倒转的重复顺序D能切断DNA的一条单链6限制酶作用于DNA；A可将单链DNA特异切开B可将双链DNA任意切开C酶切后可产生粘性末端D酶切后可产生平头末端7经限制酶切割的D

11、NA，可产生：A粘性末端B平头末端C带有5 -磷酸基的末端D带有3 -羟基的末端8目的基因的获得，可以： A直接从染色体DNA中分离 B利用已知序列人工合成 C提取mRNA，逆转录合成cDNA D利用探针自基因文库中“钓”取9在分子克隆中，目的DNA的获取途径有： A基因组DNA文库 B真核细胞染色体DNA C真核细胞mRNA反转录获得的cDNA D聚合酶链式反应 10从基因组DNA文库或cDNA文库分离、扩增某一感兴趣基因的过程就是： A基因克隆 B分子克隆C重组DNA技术 D构建基因组DNA文库11可用作克隆基因载体的DNA有：A细菌质粒DNAB噬菌体DNAC病毒DNA D酵母人工染色体（

12、YAC）12基因工程的载体有： ApBR322 B大肠杆菌 CM13噬菌体 D昆虫病毒DNA13多拷贝质粒是指： A细菌中存在多个同种质粒 B质粒中存在多个目的基因 C细菌中存在多种质粒 D在细菌中可自我复制的质粒14具有互补粘性末端的载体与目的基因组连接，需经：A变性B混合C退火DDNA连接酶催化15目的基因与载体连接成的重组体： A有独立的繁殖能力 B无独立的繁殖能力 C两者用DNA连接酶连接 D连接键为非共价键16“尾接法”的连接方式涉及： ApolyG Bpo1yC CTdT DATP 17进行基因工程实验时，常用技术有： A分子杂交技术 BDNA探针技术 C质粒重组技术 D基因调控技

13、术18将重组DNA分子导人受体细菌的方法有： A接合B转座C转化D转染19下述操作可能用于DNA克隆过程的是：ADNA的制备和酶解B不同来源DNA的拼接C核酸分子杂交 D细菌的生长和繁殖20关于质粒DNA的叙述正确的是： A是基因组DNA的组成部分 B具有独立复制功能 C具有编码蛋白质的功能 D含有感兴趣的目的DNA 三、填空题1自然界基因转移伴发重组有几种形式分别为_、_、_及_。2通过自动获取或人为地供给外源_，使细胞或培养的受体细胞获得新的_，这就是转化作用。3噬菌体感染宿主菌其核酸进入菌体的过程称为_，是_的一种形式。4由_和_介导的基因移位或重排，称为转座。5转座子是可从一个_位点转

14、移至另一位点的分散的_序列。6基因重组有两种类型，即_和_。7依赖整合酶，在两个DNA序列的_发生的整合称_重组。8发生在同源序列间的重组称为_，又称为_。9 一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，_的选择与改造，_的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出_。10限制性核酸内切酶是一类识别_的_核酸酶。11DNA经限制性内切酶切割后可产生两种切口：_和_。12科学家感兴趣的外源基因又称_，有两种类型：_和_。其来源途径有：化学合成，_，制备的基因组DNA及_技术。 13外源DNA离开染色体是不能复制的，将_与_连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。14根据采用的克隆载体性

15、质不同，将重组DNA分子导人细菌的方法有_、_及感染。15DNA重组体筛选的直接筛选法的特点是：_；其又可分为：_、_和_。四、名词解释1 基因重组2 接合作用3 转化作用4 转座5 限制性核酸内切酶6 DNA克隆（基因工程）7 cDNA文库8 基因组DNA文库五、问答题1 何谓基因克隆？简述基因克隆的基本过程。2 目的基因有哪些主要来源（或途径）？3 常用的限制性内切酶有哪些特点？4 连接目的基因与载体的方式主要有哪些？参考答案1E 2. A 3. A 4. D 5. A 6. C 7. A 8. B 9. D 10. D 11. C 12. D 13. C 14. C 15. D 16.

16、C 17. B 18. D 19. B 20. E 21. B 22. D 23. D 24. B 25. C 26. C 27. E 28. E 29. E 30. D 31. C 32. E 33. C 34. E 35. E 36. C 37. A 38. C 二、X型选择题1ABCD 2. AC 3. BC 4. ABCD 5. AB 6. CD 7. ABCD 8. ABCD 9. ABCD 10. ABC 11. ABCD 12. ACD 13. AD 14. BCD 15. BC 16. ABC 17. ABC 18. CD 19. ABCD 20. BC 三、填空题1接合作用，

17、转化作用，转导作用，转座 2DNA，遗传表型 3感染，转化 4插入序列，转座子 5染色体，重复 6位点特异的重组，同源重组 7特异位点间，位点特异的 8同源重组，基本重组 9克隆基因载体，目的基因与载体, 含感兴趣基因的重组DNA转化细胞 10DNA特异序列，内切 11粘性末端，平头（或钝性）末端 12目的基因，cDNA，基因组DNA，酶促合成cDNA，PCR 13外源基因，载体 14转化，转染 15直接测定基因或基因表型，抗药性标志选择，标志补救选择，分子杂交法四、名词解释1 基因重组指整段DNA在细胞内或细胞间，甚至在不同物种之间进行交换，并能在新的位置上复制、转录和翻译。2 接合作用指当

18、细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA就可从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌），这种类型的DNA转移称为接合作用。3 转化作用指通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，这就是转化作用。4 转座指在基因组内由可移动的DNA序列包括插入序列和转座子介导的基因移位或重排现象称为转座。5 限制性核酸内切酶，就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰体系，限制外源DNA、保护自身DNA，对细菌遗传性状的稳定遗传具有重要意义。限制性核酸内切酶分为

19、三类，重组DNA技术中常用的限制性内切核酸酶为II类酶。6 DNA克隆（基因工程），就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质：同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA，与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子（即复制子），继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子，即DNA克隆，又称基因克隆、重组DNA或基因工程。7 cDNA文库指以mRNA为模板，利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA，即cDNA；再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌。不同细菌包含了不同mRNA为模板的cDNA分子或片段，这样生长

20、的全部细菌所携带的cDNA分子或片段就代表了整个组织工细胞表达的各种mRNA信息，即cDNA文库。8 基因组DNA文库指利用限制性核酸内切酶和克隆载体技术，将人们感兴趣的基因片段转入不同的受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。这样存在于不同转化细菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组全部基因信息。五、问答题1 （1）基因克隆就是指应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质：同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA，与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子（即复制子），继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目

21、的基因的转化细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子，即基因克隆，又称DNA克隆、重组DNA或基因工程。（2）一个完整的DNA克隆过程应包括；目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞（转化子）。2 目前获取目的基因大致有以下几种途径工来源：（1）人工合成 对已知某种基因的核苷酸序列，或根据已知多肽链的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，再利用DNA合成仪通过化学合成原理合成目的基因。（2）从染色体DNA中直接分离 主要针对原核生物，由于真核生物染色体DNA庞大繁杂，难以用此法。（3）cDNA 从mRN

22、A合成，在反转录酶作用下生成mRNAcDNA杂合分子，用碱降解mRNA，剩下的cDNA在DNA聚合酶催化下合成互补双链DNA，然后用单链核酸酶S1，将双链连接处切开，即得到cDNA。（4）基因组DNA 用核酸探针将所需目的基因自基因组DNA文库中“钓”取出来。（5）PCR PCR是一种在体外利用酶促反应获得特异序列的基因组DNA或cDNA的专门技术。目前，采用聚合酶链反应获取目的DNA十分广泛。3 限制性核酸内切酶(限制酶)是基因工程中重要的工具酶，是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。常用限制酶主要有以下特点：（1）均来自于细菌，并以其来

23、源的微生物学名进行命名；（2）其与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰体系，限制外源DNA、保护自身DNA，对自身细菌遗传性状的稳定遗传具有重要意义；（3）识别序列多有回文结构；（4）经其切割后的双链DNA可以有两种切口：平端切口或粘端切口；（5）不同限制性内切核酸酶识别DNA中核苷酸序列长短不一，识别序列有：四、六或八核苷酸序列。4 与自然界发生的基因重组不同，这种人工DNA重组是靠目的DNA与载体共价连接的。连接方式主要有：（1）粘性末端连接，其以下方式同一限制酶切割位点连接及不同限制性内切酶位点连接；（2）平端连接；（3）同聚物加尾连接，是利用同聚物序列，如多聚物A与多聚T之间的退火作用完成连接；（4）人工接头连接，对平端DNA片段或载体DNA，可在连接前将磷酸化的接头或适当分子连到平末端，使产生新的限制性内切酶位点，再用识别新位点的限制性内切核酸酶切除接头的远端，产生粘性末端。