益生菌的发展历程

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1、益生菌的发展历程1857#法国微生物学家巴斯德研究了牛奶的变酸过程.他把鲜牛奶和酸牛奶分别放在显微镜下观察以发现它们都含有同样的r些极小的生物乳酸菌，.而酸牛奶中的乳酸菌的数量远比J . 24。 e c ， .。鲜牛奶中的多,这L发现说明,牛奶变酸与这些乳酸菌的活动密切相关。1878 年 李斯特（Lister首次从酸败的牛奶中分离出乳酸乳球菌。1892 年 裾国妇存科医工Doderlein在研究*喇提出ML酸的微性物对覆至-人清面。1899 年法国巴黎儿童医院的蒂赛（Henry Tissier”,蒂赛率先从健康母乳喂养的婴儿粪便中分离了第一株菌种双歧杆菌（当时称为分叉杆菌）、他发现双岐杆菌与婴

2、儿患腹泻的频率及营养都有关系0.1900-1901 年Moro, Beijerinck和Cahn各自研究了肠道中的乳酸菌。丹麦人奥拉一严森（OrlaJerlSe首次用乳酸菌进行了分类 1905 年 保加利亚科学家斯塔门戈里戈罗夫第一次发现并从酸奶中分离了“保加利亚乳酸杆 同时向世界宣传保加利亚酸奶1908 年 俄国科里螂赚奖获稼者伊力亚梅契尼科夫（ElieMetchnikofD正式提出甘酸物长寿”理论.通过对保加利亚人的饮食*惯进行研究一他发现长寿人胖有着经常饮用含有益生菌的发粗砌的传统,他在其著律施年益寿（Prolongation of Life）中系统的阐述了直己 的观点和发现。191S

3、年Daviel Newman首次利用乳酸菌临床治疗膀胱感染1917 年德国Alfred Nissle教授从第一次世界大战士兵的粪便中一株大肠杆6这名士兵在一次严重的志贺氏菌大爆发中没有发生小肠炎在抗生素还没有被发现的那个时代,Nissle利 . d.f * ft* 0 . co. 、 0 *0 用这株菌在治疗肠道感染疾病（由沙门氏菌和志贺氏菌）取得可观成果。这株大肠杆菌现仍然.使用，它是为数不多的小乳酸菌蕊生露.1919 年怀着对巴尔干半岛有益酸奶和巴斯德研究所微生物研究成果的极大兴趣，伊萨克卡拉索在西班牙巴塞罗那创立了公司（达能前身）。而且他常常召集许多博士医生到工厂讨论酸奶.M，的益处.1

4、920 年Rettger证明梅契尼利夫所说的保加利亚细菌保加利亚乳杆葡）不能在人体的肠道中存活.发酵食品和梅契尼科夫的学说受到怀疑在那时） 0.1922 年Rettger B CWtn报道了嗜酸乳杆菌酸奶所具有的临床功效”特别是对消化的功能性.1930 年医学博士代田稔博士在日本京都帝国大学现在的京都大学）医学部的微生物学研究室苜次成功地分离出来自人体肠道的乳酸杆99, 0 . 0了 Bi,并经过强化培养，使它能活着到达肠内.这种 V . a O0 ,b ., * ft . ,J菌后来引用代田博士的名字，取名为Lactobacillus casei strain shirota这就是后来被称为

5、养乐多菌的益生菌.1935 年乳酸菌饮料养乐多问世，益生菌开始走向产业化Q1945 年无菌动物模型和悉生动物模型建立而1954 年Vergio W甚与就生素或其强抗菌剂相对的术培JProbiot ika”，侬色素和其蔻抗菊剂对肠道菌群有害而 Probiotika”对肠道菌群有利1957年Gordon等人在柳叶刀(The Lancet)提出了有效的乳杆菌疗法桶以 乳杆菌粒读没有致 病性，能够在肠道中生长，当活菌数量达到107-109时，明显具有有益菌群的作用,同 时谯国柏林自由大学的Haenel教授研究了厌氧菌的培养方法，提出“肠道厌氧菌占绝对优 0、 ， , o vz * ，丹 a，势”的理论

6、日本学者光岗知足(Tomotari Mitsuoka)开始了肠内菌群的研究，最后建立了，肠内菌群分析的经典方法和对肠道菌群作出了全面分析a1962 年Bogdanov以保I.利亚乳杆菌中分离出了 3种具有抗癌活性的糖肽，首次很遒芋乳酸菌的抗肿瘤作用型 。1965 年Lilly D. M,和Stillwell R. H农科的杂患上螃的论文“益生菌一由微生物产生的生长假进因素”中最先使用益生菌Probiotic这个定义来描述一种微生物对其他微生物促进生长的 作用.1970 年 沃斯(Woese)：、.臬森( Olsen )等提出IgrRNA.寡核甘酸序列分析法来对菌进行饕定 构 建了现已被确认的全

7、生命系统进化树，越来越多的细菌依据16SrDNA被正确分类或重分 类,;给乳酸菌的鉴骨肠内菌群分析带来极大方便之1971 年Sperti用益生(Probiotic)描述刺激微生物生长的组织提取物。1974 年Paker将施生菌定义为对肠道微生物平翩f利的菌物。二 X 9 V b s A 1977 年微生态学(Microecology)由德国人Volker Rush首先提出.他在赫尔本建立了微生态学研究所，并从事对双歧杆菌、乳杆、大肠杆菌等活菌作生态疗法的研究与应用仁GiUiland对肠道乳杆菌的降低胆固庠作用进行了研究工提出了乳酸菌在生长过程中通过降解胆盐促进胆固醇的分解代谢九从而降低胆固醇含

8、量的观点, 中国的微生态学研究开始.自中国微生物学会人畜共患病病原学专业委员会下属的正常 群学组的成立4988年2月15日中华敏援手会艇索学分会的成立舒然组球1988年中国微生态学杂志创刊。80年代初大连医科大学康白教授首先研制成功促生(峨杆芽胞杆菌.1983 年由美国如fts大学两名美国教授Sherwood Gorbach和Barry Goldin从健康人体分离出了节种具有活性强耐胃酸的特点,LGG(鼠李糖乳杆菌)，并于1985年兼得专利LGG 能够在肠道中定班长达两周.1988 年 丹麦的汉森中心经验室生产出超浓缩的直投斗螂瓮嘴帐直投或戚发醉剂呼ected VatS喙叫就是指一蹇丽嵩皮艘翻

9、哦瘫彷破曲干城戴嫡机前彘加表到诵而重的原料乳中进行发酵,而无需对其进行活化一扩培等其它预处理工作S直投式酸奶发酵剂的活两数一般为1010 - 1012 CFU/g： 1989 年 英国福勒博士二Roy Fuller)将益生菌定义为；益生菌是额外补充的活性微生物，能改善肠道菌群的平衡而对宿主的健康有益-他所强调的益生菌的功效和益处必须经过临床验证 ，。 的思1989 年1989年美国食品和药品管理局(FDA)以及应国饲料监察协会CAAFCO)公布了 40余种”可直接饲喂且通常认为安全的微生物”菌种名单，共42种：黑曲霉(Aspergillusniger )；米曲霉(Aspergillus ory

10、zae)；凝结牙抱杆菌(Bacillus coagiilans)；迟缓芽抱杆菌 (Bacilluslentils；地衣芽抱杆菌(Bacilluslicheniformis)：短小芽抱杆菌(BacillusB 0， Pumilus；枯草芽和杆菌(Bacillus subtilis)；嗜激粉拟朴 #| (Bacteroides amylophilus)；多adolescentis)；动物双 difidum)；婴儿双岐杆毛拟杆菌( Bacteroides capillosus)：栖瘤胃拟杆菌(Bacteroides ruminicola)；产琥珀酸，enum拟杆诲(Bacteroides succi

11、nogenes；青春双岐杆菌(Bifidobacteri股杆菌(Bifidobacterium animalis；两岐双岐抨菌Bifidobacterium菌(Bifidobacterium infantis)；氏双岐杆菌(Bifidobacterium Longum)；嗜热双岐杆菌 (Bifidobacterium therm ophilum；嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)；短乳杆菌QQ0 q1O(Lactobacillus brevis)：保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)；干酷乳杯广 (Lactobacillus case

12、i)：纤维.糖乳杆菌(Lactobacillus helveticus：看曲乳杆菌 (Lactobacillus curvatus)：德氏乳杆菌(Lactobacillus delbriickii):发酵电杆菌 (Lactobacillus fermenti)；瑞士乳杆菌(Leuconostos mesenteroides)；乳酸乳杆 (Lactobacillus lactis)；胚芽乳杆菌LactobaciHus plant arum)；罗氏乳杆菌(LactobaciUus renterilji 肠膜明申珠菌(Leuconostosmesenteroides)：乳酸片球菌(Pediococc

13、usacidilactici)： ” 3片球菌(Pediococcus cerevisiae)；戊糖片母, (Pediococcus pentosaceus):费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii):谢氏丙酸杆菌(Propionibacterium shermanii)：酿酒酵 (Saccharomyces cerevisiae) ? 乳脂链球菌Streptococcus lactis；双醋酸乳链球菌(Strepttococcus diacetylactis) ；粪链球菌 Q。 7?, * * ：. , O .,(Streptococcus faeca

14、lis)；中链生 (Streptococcus intermendius；乳链球段(Streptococcus lactis).；嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)$f 1992 年我国学者张誉教樱对世界第五长寿区-我国广西巴马地区百岁以上老人体内的双歧杆菌进行了系统的研究，也发现长寿老人体内的双歧杆菌比普通老人要多得多。同时中法药微生态学建立e杨景云等学者开始对我国的传统中药与微生态关系迸行了系统的研究划 7O1992 年Havennar对定义进行了扩展.解释为一种单一的或混合的活的微生物培养物,应用于人或动物，通过改善固有菌群的性质对寄主产生有益的影响:19

15、95 年吉福镰Gibson)把解大期中调整黄群的食品称为建生武?1996-1999 年 欧共体启动益生菌类食品的营养功能示范项目PROBDEMO CT96-1028 (Demonstration ofNutritional functionality of Probiotic Foods, PROBDEMIFAIR CT961028 ).为瞪 4 隼3 1999年藤嘉 是欧头悻第五次梭蹒目的蒯h旨塌蝴厚便据以支懒匣菌券曾 品等微生蠡制剂H业界的要求:微生态制剂作为功能性食品在欧洲地区以至全世界越来越播棺 通过本项目的的翳、苴峪 趟哄体第五就蜀穗目在物屿管晶Health and Food”领域的

16、立项提供基础。PROBDEMOCT96-1028项目和F究结果表明,益生菌产品不仅在临床上对儿童及*具有治疗作用，而且对健康人群及疾病患者也具有预防保健作用,主要对*的胃肠功能平衡及胃 肠道疾病具有治疗作用、对免疫藕具有激活作用,也对儿童的过敏性疾病具有预防作用1998 年Guarner & Schaafsma给出了更通俗的定义: 给予宿主健康作用益生菌是活的微生物，当摄入足够量时，能1999 年Tannock作了总结:细菌是人体(还有高级动物和昆虫中正常居住者。其中胃肠道中发现超过400多种细菌. 亨1999 年1999年6月我国农业部第105号文件发布的允许使用的饲料添加剂品种目录：干酪*

17、纳豆芽胞杆菌,o * Jf 乳杆菌,植物乳杆菌,粪链球菌，屎链球菌-乳酸片球菌,枯草芽抱杆菌 一r . D / = e J 二 o, f 。 S r .嗜酸乳杆菌，乳链球菌，啤酒酵母，产肮假丝酵母，沼泽红假单胞菌共计12种。2001 年2001年10月f日10月4目世界糊侬龈(FAQ)和世界卫知职(WHO)专集咨询堂费食 品中益生菌施康及营靠特性评价问题由标蕨期庞瓦酉并嚏鼠 含妞品有宓羹运I评价食品用益生菌的系统指南、标准和方法以确定其健康声称0FAO/WHO也对益生菌做了如下定义：通过摄取适当的量一对食用者的身体健康能发挥有效作用的活菌,FAO/WHO组成的专家联合顾问团强烈建议用芬壬生物学

18、的手段鉴定维生菌。并推荐益生菌存放于国际性菌物保藏中心.具体的步骤感先像肉型饕蔚惠檄券困翼心、基因喻的方法有DNA/DNA杂势16SRNA序列分析或其它国蹄上认可的方法。泡漏到RDPfribosomal data base project, www.cmemsu.edu/RDP 上验证鉴定结果o2001 年3 H我国首次规定了益生菌的定义.益生菌种必须以体正微曲群的成员，可以利用箕括菌、的益生菌菌种名单两岐双岐杆菌死菌及其代谢产物。就保健品类益生菌生产与管理作出了规范，并列出了可用于保健食品Bifidobacterium bifiduni,婴儿双岐杆菌 B.infantis,保加利亚乳长双岐杆

19、菌比longum,短双岐I菌B. breve ,青春双岐杆菌B.adolescentis杆菌Lactobacillus. Bulgaricus嗜酸乳杆菌L. acidophilus.干酪乳杆菌干酪亚种L. Case!subsp, Casei,嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus 2001 年 诔国完成第L榇乳酸菌即乳酸乳球菌IL1403的全基因组测序。2002 年微生物学教授Savage宣布：正常菌群是人体的第十大系统一一微生态系统。2002 年4月30日4月1日在加拿大安大略省伦敦市FAO/WHO联合专家工作组起草了食品中i生菌的评价指南( Guidelines

20、for the Evaluation of Probiotic in Food ；?)2002 年欧洲食品与饲料菌种协会(EFFCA)定义益生菌为活的微生物，.通过摄入足够数量，对宿 o o o d f r ioon 生产生一种或多种特殊且经论证的功能性健康益处82003年3月我国卫生部84号文件批准罗伊氐乳杆菌(Lactobacillus reuteri )为可用于保健食品的益生菌菌种,使可用于保健食品的益生菌菌种增加到10种口2003 年2003年农业部第318：号公告中允许使用的微生物有：地衣芽抱杆菌，枯草芽泡杆菌,两歧双歧杆菌，.粪肠球菌，屎肠球菌，乳酸肠球菌九嗜酸乳杆菌,干酪乳杆菌,

21、乳酸乳杆菌, 植物乳杆菌九乳酸片球菌，戊糖片球菌，产病假姓*母，酿酒醉母，沼睡红假单胞菌共评14种台(同时殿199%年7月26日公:杳第H号舞话的兖阵用用辆蝌的搞鬲 种且最犷肌曲曲h ) 2005 年 美国北卡罗来纳州立大学Dobrogosz和Versalovic教授提出了免疫益生菌的概念9， a , 9J 。o A。q(Immunoprobiotics) 2006 年 意大利M. Del Pianoa等认为益生菌应该定义为一定程度上6 I 1&胆汁和胰脏分泌物而黏附于肠道上皮细胞并在肠道中定殖的一类活的微生物提出从粪便中分离的益生 r， “ r t r b q 、 . .严 to . i .

22、尸 r * s e %v 菌”有可能多数是浮游菌,而非黏附菌后2007 年继食盐中加碘、酱油中加铁、食用油中加维生素A和面粉中加维生素B1之后*作为公众 在乳制品、婴幼儿食品、饮料、糖果、烘焙食品、；休闲食品等各类食品中添加益生菌.营养改善项从2007年4月1日起,我国家发改委公众营养与发展中心将陆续组织 P ” 2007,年美国科学杂志预测;人类共翎唯物的祗糖可能是国唇科学研触却08年取得突 破的7个重要领域之一眄12月9 210日,英、美、法、中等国科学家在美酝酿成立“人类微生物组国际研究联盟(IHMC)”，计划2008年4月联合启动“人类元基因组计划”，开 始对人类元基因组的全面研究这项

23、被称为“第二人类基因组计划”的项目将对人体内所有 共生的微生物群落进行测序和功能分析,其序列测定工作量至少相置于10个人类基因组 计划,并有可能发现超过100万个新的基因，最终在新药研发、药物毒性控制和个体化 用药等方面实现突破性进展a1 P. A、* - O *2008 年 荷兰乌得勒支大学医学中心研究者在柳叶刀杂志上报道了益生菌可能会引起重症急性胰腺炎患者的肠道致命性局部缺血危险。随后,国际益生菌及益生元科学协会。SAPP)很快发 5 0 . 裳声明指曲 窠1J没有任何直接ii筋做示这些病人的翔亡和益生菌直接相关;第二，试 验组和对照组病人的病情轻重*治疗条件等参数都未知，因此两组数据就目

24、前而言不具可 比性锵荷兰肠道健康与疾病联盟(Gutflora)也声明，试验中所使用的益生菌和在美国、欧 洲销售的食品所使用的益生菌并不一样。长期以来的科学试验都显示，正规的益生菌及其 制品对人体是非常有益的。2008年4月国际益生菌协会(The Intemational Probiotics Association,IPA)于4月11日在美国芝加 哥召开了首届IPA国际大会，IPA为争论不体的益生菌产品标签计划制定标准，这标9 r V tw 31 t O识主要包括:(1)在产品失效时确保有最低数量的菌落形成单位(CFU):(2)有储存指示:(3)：有包装批号或产品代码; 7 ,o a 03 .

25、 a O严 (4对益生菌清楚地识别，其中包括菌株(优先o* o . 1 . . a . / . .望口，F a y 列出或者至少以外界普遍认可的术语列明属种裂如果用商品名称来识别益生菌，那么实际的属种也应该包含在产品标签上；(5生产厂家的所有联系信息,或者在产品标签空间有限的情况下，至少列明厂家的网址; 充剂应该列明其所针对的动物种类)灯C韵 毓用量硼明(供碱使用的益生菌补2008年5月由内蒙古农业大学“乳品生物技术与工程”教育部重点实验室主持进行的的益生菌Lb. casei Zhang的全基因组序列测定和图谱绘制于18日全部完成,并向Genbank提交。这是我国 第：1个完成的乳酸菌基因全序

26、列的测定。2009年5月TNO将建立微生态菌群研究中心(MEC) MEC耨提供处析含看复杂微生物菌群样品的服务。消费者将从代替低通量的传统培养方法和分子检测方法的专门以DNA芯片为基础的 诊断中获益益：MEC将提供高通量、清晰的数据和有竞争的成本分析a*oa%2009年5月继国家“九五，”十五”都将益生菌研究列为重大科研项口后，2009年5月11日科技部再次将益生菌的研究乳酸曲章，隼建设及益生菌发醉剂和制剂产业把示薪重点项目辗8.r， ： 。遇 / * rf a . 9 .fo , .r,O，0 99 J , C国，列入叶一五“科技项昂&2009年11月2009年11月，来自英国,意大利,爱尔

27、於 比利时、法国、西班牙、瑞士 7个欧洲国家的9个胃肠病、微生物、营养学和儿科专家，以英国雷丁大学(University of Reading) * a* * * 8 * * a %* * wc -Ian Rowland教授为*小组成专家委员会，根据益生菌的研究开发、:临床应用和市场消费等现状，达成一致意见,形成了“益生菌科学最新共识”的专题报告该报告在益生菌临床应用效果方面的主要意见是:一、益生菌治疗腹泻被广泛研究”其临床应用效果最为突出0二、临床研究表明，某些益生菌能够缩短呼吸道感染时间,减轻诸如发烧鼻炎、腹泻等症状.三、专家普遍认为，益生菌可全面改善IBS症状，缓解胃肠道功能性紊乱，例如

28、缓解胃胀、腹痛也 从而减轻胃肠道的不舒服感觉.四，曲外,专家们共同赞成的益生菌有益健康的作用包括：在幽门螺杆菌感染的治疗中.益生菌作为辅助治疗显示出令人鼓舞的效果；从生物学浦度考虑，益生菌可改预防*和*感|即 不过后者的效果不如前者的好; 益生菌可能有利于减少结弱癌风险,2010年3月2010年3月4日力世界权威科学期刊自然发表文章指出在多国科学家的通力合作 和艰辛努力下,人类已经测定出入肠道微生物的基因U录，这对人类来说，无论是对微生 % V 。9./ 1。,. . 5、。 g .4 , *.) 。.。,=小. . * . ,:物和疾病的认识上，还是对人体健康和保健的认识上都具有里程碑式的意

29、义力Nature.2010 Mar 4;464(7285):59-65.%一2010年4月继国家2001,2003年发布保健品中益生菌名单后.4月28：日卫生部办公厅发布可用于食品的菌种名单，共计21种。双歧杆菌青春双歧杆Bifidobacterium adolescentis动物双歧杆菌(乳双歧杆菌Bifidobacterium animalis (Bifidobacterium lactis )两歧双歧杆菌Bifidobacterium bifidum短双歧杆菌Bifidobacterium breve婴儿双歧杆菌 g、 q&。，J 。 Bifidobacterium infantis 长

30、双歧杆菌 Bifidobacterium longum 乳杆菌嗜酸乳杆Lactobacillus acidophilus干酪乳杆菌 Lactobacillus caseiEU卷曲乳杆菌Lactobacillus crispatus德氏乳杆菌保加利亚亚种（保加利亚乳杆菌）Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus (Lactobacillus bulgaricus)德氏乳杆菌乳亚种.,J,.，IL.。.，Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis 发酵乳杆菌 Lactobacillus fermentium 格氏乳杆

31、Lactobacillus gasseri ：壮乳杆菌 Lactobacillus helveticus氏乳粹菌 Lactobacillus johnsonii 副干酪乳杆糖 Lactobacillus paracasei 植物乳杆菌 Lactobacillus plantarum 罗伊氏二孔 Lactobacillus reuteri 鼠李型蜉L机 茵 Lactobacillus rhamnosus 口垂、液.乳稻 苗Lactobacillus salivarius 链球菌晴热链球菌 Streptococcus the门nophilus 粪链球菌Streptococcus faecalis芽胞杆菌枯草芽抱杆菌Bacillus subtilis地衣芽抱杆菌Bacillus licheniformis J Vm fC* ,2011年1月2011年1月18 0,卫生部根据中华人民共和国食品安全法和新责源食品管理办法的规 船 卿滩魏果釉和B罢基G甲基丁酸钙作为新资源食品，用匿谶乳球菌赛 18簿机 乳 酸乳球 产二L脂亚种和乳酸乳球产仪乙酰亚种列入我部于2010年4月印发的可用于食品的菌种 名单卫 办监督发（ 2010）65号）%可用于食品的菌种由21种增加到24种.