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1、实验原理第1页/共28页 一、 什么是细胞培养？ 体外培养（In vitro）* 细胞培养 ： 指从体内取出组织、细胞在体外模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，使之生存和生长，并维持其结构和功能特性。 原代培养：直接取材于有机体组织的细胞培养。 传代培养：将培养细胞转移到新的容器中，以1：2的比例继续培养。第2页/共28页制备游离细胞悬液胰蛋白酶、胶原酶、EDTA，破坏细胞间连接分离出不同类型的细胞原代培养传代培养细胞培养细胞分离1、离心2、利用细胞自身的黏附力3、抗体吸附4、流式细胞仪（FCM）5、其他第3页/共28页 贴附生长型细胞 悬浮生长型细胞 二、培养细胞的生长方式
2、及类型第4页/共28页成纤维样细胞上皮样细胞：都可连成单层第5页/共28页悬浮生长型细胞第6页/共28页三、培养细胞的条件132第7页/共28页生 存 环 境温度气相PH第8页/共28页仪器及耗材第9页/共28页细胞培养室第10页/共28页超净工作台第11页/共28页 CO2培养箱 CO2培养箱设定的条件为 37，5CO2 。提供的3个环境： 温度，气体，湿度 第12页/共28页CO2培养箱超净工作台倒置相差显微镜第13页/共28页 倒置显微镜第14页/共28页培养瓶和培养板第15页/共28页培养基及试剂第16页/共28页消化液培养基血清第17页/共28页扫描电镜法显示支原体，附于细胞表面众多
3、的圆形颗粒为支原体污染问题 1.支原体污染第18页/共28页2.细菌污染: 能改变培养液的pH值，使培养液变混浊。 细菌生长迅速，能消耗营养液和产生毒素。 抑制细胞的生长，毒性大的细菌可很快导致细胞崩解死亡。细菌细胞第19页/共28页3.真菌污染第20页/共28页实例第21页/共28页干预因素：药物、毒物、物理因素、生物作用、相互作用、其他直接分离的细胞原代培养的细胞传代培养的细胞可能的结果1、2、3、例如：三氧化二砷对白血病细胞的作用各种实验第22页/共28页第23页/共28页第24页/共28页第25页/共28页报告要求实验目的：实验材料和器材：实验流程（或实验操作）：用到细胞培养实验结果（可能的结果及分析）1、2、3、第26页/共28页第27页/共28页感谢您的观看！第28页/共28页
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