新一代测序技术和其在产前诊断领域的临床应用课件

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1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,,,*,新一代测序技术和其在产前诊断,,领域的临床应用,新一代测序技术和其在产前诊断领域的临床应用,遗传病的分类,染色体病：,,多基因病,,单基因病：孟德尔遗传病,,非典型遗传方式的单基因病,,,,,,,,数目,结构,,常规核型可见,微缺失，微重复,遗传病的分类染色体病：数目结构常规核型可见微缺失，微重复,染色体病,,,数目异常,,,整倍体：,四倍体：,92XXXX,，,92XXXY…,三倍体：,69XXX,，,69XYY,，,69XXY,,非整倍体：,,单体型：,45,X; 45XX,-21,三体型：,21

2、-,三体,, 18-,三体,13-,三体,,47XXY(Klinefelter,综合征,),四体型：,48,XXXX; 48XXXY…..,染色体病整倍体：四倍体：92XXXX，92XXXY…三倍体：,染色体病,,,,,结构异常,,,倒位（,inv,）：,9,号染色体臂间倒位,缺失（,del,）：猫叫综合征（,5p-,重复（,dup,）,易位（,t,）：有无遗传物质的丢失,插入（,ins,）,环形染色体（,r,）,环形染色体（,r,）,双着丝粒染色体：（,dic,）,假双着丝粒染色体,（,psu dic,）,染色体病倒位（inv）：9号染色体臂间倒位缺失（del）：猫,染色体病的筛查与诊断,环

3、形染色体（,r,）,,筛查,血清学的筛查,无创胎儿非整倍体检测,,（,NIPT),诊断,取胎儿细胞进行核型分析,绒毛取样,取羊水,取脐带血,基因芯片（,CMA,）,全基因组测序,染色体病的筛查与诊断环形染色体（r） 筛查诊断,核型分析适用范围,主要针对染色体数目异常、大的结构异常,核型分析是产前诊断的基础。需要对胎儿细胞进行培养（包括绒毛、羊水、脐带血）,,,其是羊水细胞培养有一定的难度。,,优点：价格便宜，直观、可以检查染色体数目异常及大的结构异常（≥,5 Mb,）,,无法判断染色体上微小片段的缺失及重复异常。,,核型分析适用范围 主要针对染色体数目异常、大的结构异常,严重智力低下：,10

4、0%,， 小头畸形,50%,枕骨扁平,53-82%,发际低,80%,颈部皮肤赘生皱褶,80%,无意识做鬼脸,90%,眼距宽，外眼角上斜,80%,伸舌,各种先心病,手短、宽,通贯手（双手）,小耳朵,鼻根低平,,,21,三体,严重智力低下：100%， 小头畸形,21-,三体,NT≥6mm,鼻骨缺失,/,发育不全,长骨短,肾盂积水，,单独不作为穿刺指征,心脏缺陷,肠道强回声：,约,7% 21-,三体患儿,21-三体NT≥6mm,21,三体：,NT,厚，心脏畸形,,301,21三体：NT厚，心脏畸形301,新生婴儿中的发生率为,1∶3500-8000,，,父

5、、母亲高龄,女孩比男孩发生率高，约为,3-4∶1,寿命平均,70,天,,18,三体综合征常为多发畸形,,18-,三体,新生婴儿中的发生率为1∶3500-8000，18-三体,18,三体,-,多发畸形,颜面部：,小下颌畸形、小眼、小嘴、小耳、耳位低,颅脑畸形,：草莓头,45%,，颅后窝池扩大、,Dandy- walker,畸形、小脑小、脉络丛囊肿,肢体畸形：,特殊握拳姿势、挠骨发育不良、挠骨缺如、拇,指发育不良、并指 等,腹部畸形：,小的脐膨出、膈疝,肾脏：,肾囊性发育不良、马蹄肾、肾积水,心脏畸形：,室缺，房室共道畸形、右室双出口,其他：,,羊水过多，胎盘小，单脐动脉、脐带囊肿、 脐 静脉瘤、

6、,,FGR,,,,18三体-多发畸形颜面部： 小下颌畸形、小眼、小嘴、小耳、,18-,三体,301,301,301,18-三体301301301,13,三体综合征（,Pateau,综合征）,发生率,1/5000,多合并重要畸形,颅脑畸形：,小头畸形、前颅无裂畸形、,Dandy-walker,畸形、,颜面部畸形：,独眼、长鼻、正中唇裂、 双侧唇裂,肢体畸形,：,多指（趾）畸形,心脏畸形,：,室缺、房室共道畸形、左心发育不良、,心室内强回声,腹部畸形：,脐疝、肾积水、多囊肾,其他,：,FGR,、,羊水过多、胎儿水肿、,NT,厚,,13三体综合征（Pateau 综合征）发生率 1/5000,,1

7、3-,三体,30,岁,23,周,B,超发现畸形：,,前脑无裂、正中唇裂、心脏畸形（右心大、左心小）、单脐动脉、脐疝、多趾畸形,核型分析,13-,三体,,301,13-三体30岁301,性染色体异常,Turner,综合征,：,45,，,X,,1/2500,，女婴特征,：,FGR,颈部水囊瘤 原发性闭经、不孕，短颈、颈蹼、发迹低、身材矮小、肘外翻，,15-50%,合并心血管畸形,,,性染色体异常Turner综合征：45，X,性染色体异常,克氏征,（,klinefelter syndrome):47,XXY,,男性新生儿发病率为,1/600-800,，与母亲高龄有关,,表现：出生时表现正常，隐睾发生

8、率高，身高较高，青春期中期出现睾丸功能紊乱，高促性腺激素性性腺功能低下，睾酮减少，除极个别情况外,基本不育,。,,,性染色体异常克氏征（klinefelter syndr,超雌,（,47,，,XXX,；,48,，,XXXX,；,49,，,XXXXX,）,,发病率,1/1000,女婴，与母亲高龄相关。,,特征：外表正常，身材较高，智商较同胞稍低，语言能力差，社会适应能力差,超,Y,: 47,，,XYY,，,48,，,XYYY,，,49,，,XYYYY,1/1000,男婴,,特征：出生时无异常，从,2,岁开始发育速度加快，身高比正常人高，智商略低于同胞，但在正常范围。部分脾气暴躁，有对抗性行为，犯

9、罪主要与低智商有关。可生育正常后代,。,,,性染色体异常,超雌（47，XXX；48，XXXX；49，XXXXX）,,微缺失重复的检测,BoBs,基因芯片,全基因组测序,微缺失重复的检测,Wolf-Hirschhorn,综合征,-4p16.3,缺失,具有特殊面容：头小而长．前额突出。中线头皮缺陷。眼距宽．内眦赘皮，鹫形鼻，高眉弓直通眉心，人中深、短．下颌小而后缩。耳大且低，结构简单,掌纹复杂，脚趾不规则,生长发育障碍、智力低下、肌张力减退、癫痫、先心病、骨骼畸形等各种异常,,Wolf-Hirschhorn 综合征 -4p16.3缺失具,Williams-beuren(7q11.23),spann

10、ing 1.5 million to 1.8 million base pairs and containing 26 to 28 genes.,临床表型包括心血管疾病、特殊面容、神经行为异常和一过性婴儿期高钙血症,特征性面容：张嘴凸唇，鼻梁扁平，鼻孔朝天，长人中，小下颌，星状虹膜和斜视，牙齿缺失，牙釉质缺陷，牙齿稀疏，咬合不正。,非凡的音乐才能,Williams-beuren(7q11.23)spanni,Langer-Giedion,（,8q23.2-8q24.1,）,（,毛发,-,鼻,-,指（趾）综合征,）,Langer-Giedion（8q23.2-8q24.1）（,Prader-Wi

11、lli,综合征,隐睾,-,侏儒,-,肥胖,-,智力低下综合征,,①,大部分(70％)有15q11．q13父源缺失,②母源,单亲二倍体（,UPD,）,约占25％,③少数(<5％)存在甲基化过程异常或单一致病的印记基因突变,,特征：临床以多食、肥胖、身材矮小、发育迟缓、出生后低张力、性腺功能低下以及生长激素缺乏为特征 糖尿病,,面容：颌小畸形，耳畸形，牙齿缺损，齿列异常,Prader-Willi综合征隐睾-侏儒-肥胖-智力低下综合,新一代测序技术和其在产前诊断领域的临床应用课件,Angelman,综合征,快乐木偶综合征，天使综合征,母源,15q,11.2-13,缺失,(,约,70,％,),父源单亲

12、二倍体,,Angelman 综合征快乐木偶综合征，天使综合征,Miller-Dieker,综合征（,17p13.3,）,无脑回、巨脑回,胼胝体缺如,面部异常,小头、前额高低不平,小鼻，伴鼻孔前倾，,上唇有细小的朱红边线，,耳位低，或后移,隐睾、藏毛窦、第,5,指弯曲,,Miller-Dieker 综合征（17p13.3）无脑回、,Smith-Magenis,综合征,染色体,17p11,．,2,微缺失或,RAI,基因杂合性突变,自我伤害行为、痛阈低下；褪黑素分泌异常、昼夜睡眠颠倒、生物钟紊乱；喜将外物插入身体有孔部位，易怒。,,Smith-Magenis 综合征染色体17p11．2微缺失,,Ag

13、e progression of female subjects with SMS. Typical SMS infant phenotype with 'tented' upper lip and depressed nasal bridge at birth (,a,), at age 4 months (,b,), and with hand-clasping behavior at age 1 year (,c,) is shown. A white patch on the dorsum of left forearm due to skin picking is illustrat

14、ed in a toddler (also hand clasping) at age 2 years (,d,). The same individual at ages 13 years (,e,) and 20 years (,f,), and photos at 21 years of age illustrating open wounds and scarring on forearms from skin picking (,g,), brachydactyly and nail-yanking lesions on hands (,h,), and feet with brac

15、hydactyly and nails damaged from nail yanking,Age progression of female subj,Digeorge,综合征,22q11.2,缺失,特殊面孔，如眼眶距离增宽，耳廓位置低且有切迹，上唇正中纵沟短颌小和鼻裂。,常存在大血管异常，如法洛四联症和主动脉弓右位,Digeorge 综合征22q11.2缺失,染色体微阵列技术,(CMA),,CMA,在全基因组水平进行扫描,,可检测染色体不平衡的拷贝数变异,(copy number variant,，,CNV),，尤其是对于检测染色体组微小缺失、重复等不平衡性重排等具有突出优势。可检测从几十

16、到上千,kb,的基因组缺失或重复。其检测水平由所用探针序列大小及两种探针序列间的距离决定,,基于比较基因组杂交的微阵列,(array-CGH),,基于单核苷酸多态性的微阵列,(SNP array),。,,可以检出单亲二倍体和三倍体,染色体微阵列技术(CMA) CMA在全基因组水平进行扫描,,产科、产前诊断领域的应用范围．,,对自然流产、胎死宫内、新生儿死亡等妊娠产物的遗传学检测。,对产前诊断中核型分析结果异常，但无法确认异常片段的来源和性质者进行,DNA,水平的更精细分析。,,对产前超声检查异常而染色体核型分析结果正常的胎儿进一步行遗传学检测。,产科、产前诊断领域的应用范围．,,局限性,无法可

17、靠地检出低水平的嵌合体,无法检出平衡性染色体重排和大多数的基因内点突变,aCGH,检测平台无法检出三倍体,CMA,的阳性检出率仍然较低，对于超声检查发现结构异常但胎儿染色体核型正常的病例，目前,CMA,增加检出致病性,CNV,的比例,<10,％,临床意义不明的,CNV,的判读和解释存在困难。对胎儿父母样本进行检测、综合家系分析对,VOUS,结果的判读和解释有一定帮助,,,产前,CMA,检测前和检测后，进行恰当,的遗传咨询,十分重要,局限性无法可靠地检出低水平的嵌合体,SNP-array,1,号染色体,2,号染色体,3,号染色体,SNP-array1号染色体2号染色体3号染色体,SNP-arra

18、y 21-,三体,SNP-array 21-三体,34,,,,,7,号染色体长臂存在缺失,0.18Mb,，,15,号染色体长臂存在重复,2.03Mb,，,X,染色体整体发生缺失,病例 ：,颈部,淋巴囊肿伴全身水肿，胸腔积液，胎死宫内，染色体核型分析失败,,34 7号染色体长臂存在缺失0.18Mb，15号染色体长,病例：,超声提示 平滑脑，双侧腭裂，,NT,厚，双眼球小，左肾缺如，单脐动脉,胎儿全基因组测序，,4,号染色体部分缺失，,13,号部分重复,病例：超声提示 平滑脑，双侧腭裂，NT厚，双眼球小，左肾缺如,单亲来源,单亲来源,流产组织,-69XXY,流产组织-69XXY,显示,

19、1p36,．,33(a),和,1q21,．,3-q22(b),区域均存在重复,显示1p36．33(a)和1q21．3-q22(b)区域均存,目前可以参考国际公共病理性,CNVs,数据库,[the Databaseof Chromosomal Imbalance and Phenotype in Humans using Ensembl Resources(DECIPHER,，,http,：／／,www,．,sanger,．,ac,．,uk,／,PostGenomics,／,decipher)],与国际公共良性,CNVs,数据库,[theDatabase of Genomic Variants(

20、http,：／／,www,．,projeets,．,tcag,．,ca,／,variation,／,),,,,目前可以参考国际公共病理性CNVs数据库[the Datab,NIPT,1997,年发现孕妇血浆中存在游离,DNA,2008,年发明通过生物计算的方法筛查,21,三体,2012,年中国专家共识,NIPT 1997年发现孕妇血浆中存在游离DNA,,开展了无创检测胎儿非整倍体的研究,共检测,5300,余例,发现染色体异常,39,例，其中包括,21,三体,34,例（其中,28,例行羊穿），,18,三体,6,例（其中,5,例行羊穿），均符合,缓解了羊水穿刺的压力，提高了穿刺的阳性率,羊水穿刺,

21、21,三体阳性率约为,3.03%,，,21,三体和,18,三体的总阳性率约为,3.83%,NIPT,开展了无创检测胎儿非整倍体的研究NIPT,单基因病,目前认为人类约有,2,万,5,千个基因,单基因病目前认为人类约有2万5千个基因,单基因病的诊断,第一代测序技术及其应用,,l977,年，第一代测序技术问世（,Sanger,测序法,),,基因测序技术的出现极大地推动了分子生物学的发展。利用该技术，投入几十亿美元，耗时,13,年，完成了人类遗传密码,30,亿对碱基序列的测定,,,单基因病的诊断第一代测序技术及其应用,单基因病分类,常染色体显性遗传：软骨发育不全,常染色体隐性遗传：,PKU,，脊髓性

22、肌萎缩症,SMA,X-,连锁显性遗传：,2,型色素失调症,X-,连锁隐性遗传：假肥大性肌营养不良,DMD,Y-,连锁遗传？,,,单基因病分类常染色体显性遗传：软骨发育不全,单基因病的非典型遗传方式,基因组印迹：,某些遗传病的出现或严重程度取决于这些基因是来自父方还是母方，这种不同亲本来源的某些染色体特异位置上的同源基因在子代中差异表达的现象叫基因组印迹,15q11-q13,缺失,Prader-Willi,综合征,---,父源缺失,Angelman,综合征,-----,母源缺失,单基因病的非典型遗传方式基因组印迹：某些遗传病的出现或严重程,单基因病的非典型遗传方式,单亲二体型：一个个体的两条同源

23、染色体来源于同一亲本，缺乏另一亲本来源的同源染色体，这种个体称为单亲二体。,Prader-Willi,综合征,----,母源单亲二体,Angelman,综合征,-----,父源单亲二体,巨舌,-,脐膨出综合征（,BWS,）,单基因病的非典型遗传方式单亲二体型：一个个体的两条同源染色体,单基因病的非典型遗传方式,嵌合体：,三核苷酸重复,—,脆,X,综合征,，男性发病率,1/1200,，,FMR-1 CpG,岛内,CGG,重复序列有关，正常人低于,50,次，患者超过,200,次,,亨廷顿病；脊髓小脑性共济失调；强直性肌萎缩,线粒体遗传：,16569,个碱基对，,37,个基因,,母系遗传，异常线粒体

24、超过阈值致病,单基因病的非典型遗传方式嵌合体：,Sanger,测序法,基本方法为对某个基因的外显子及其相邻的内含子区域设计引物，以测序引物进行延伸反应，并由带有四色荧光标记产物通过毛细管电泳进行分离和检测,单次可获得,800bp,以上的序列。,该传统的基因测序技术为基因测序工作带来了极大的便利。,目前确认基因突变的金标准。,Sanger测序法基本方法为对某个基因的外显子及其相邻的内含,致病基因的筛选,根据表型,确定致病基因,,候选基因 设计引物,PCR,,测序,连锁分析,—,依靠家系分析,致病基因的筛选根据表型确定致病基因,Sanger,测序法限制,一代测序的高成本和低通量的缺陷限制了

25、其在大规模测序中的应用。,,我们进行胎儿短肢畸形的研究，涉及的基因很多,FGFR3,、,COL1A1,、,COL1A2,、,TRIP11,、,SLC26,、,SOX9,等多个基因，在诊断不明的情况下需要对涉及的,候选基因,一一检测，有些基因很大，要设计数十对甚至上百对引物才能检测完成，费时费力费钱,。,,,卢彦平,,,程静,,,汪龙霞,,,汪淑娟,,,熊莉华,,,高志英,,,袁慧军,,,李亚里,,,胎儿短肢畸形的基因突变位点筛查 。中华围产医学杂志，,2012,年,8,期,,,Sanger测序法限制 一代测序的高成本和低通量的缺陷限制了,新一代测序技术,技术特点,边合成边测序,高通量、低成本、

26、,海量的数据。,生物学信息分析成为分子生物学领域的重要内容,产前诊断中的应用：,,染色体病：,NIPT,,，微缺失重复,,单基因病：致病基因筛查,,新一代测序技术技术特点,外显子组测序,,外显子组测序：,全基因组外显子,区域,DNA,捕捉并富集后进行高通量测序,外显子区域包含着合成蛋白质所需要的信息，涵盖了与个体表型相关的大部分功能性变异,单基因病，不必再依赖于完整的家系。,自于不同家系的样本一起研究，耗时明显缩短,海量的数据分析是一难题。,外显子组测序 外显子组测序：全基因组外显子区域DNA捕捉并富,目标区域测序,,目标区域捕获测序是利用针对感兴趣的基因组区域定制的探针与基因组,DNA,进行

27、芯片杂交或溶液杂交，将目标基因区域,DNA,富集后再利用高通量测序技术进行测序的研究策略。,,目标区域测序大幅缩小了测序区域，在保证获得足量目标基因变异信息的前提下，极大地降低了样品的测序成本,,可订制目标外显子捕获,panel,，用于特定的研究。,目标区域测序,目标外显子测序的临床应用,---,我们的工作,骨骼畸形目标外显子捕获,,初级纤毛相关疾病目标外显子捕获,目标外显子测序的临床应用---我们的工作骨骼畸形目标外显子捕,例,1,：,孕,18,周，双顶径,4.0cm,，股骨长,1.1cm,，颅骨骨化差，胸腔狭窄，腹部膨隆，四肢短小，肱骨粗短,,进行了,FGFR3,全外显子及,SLC26A2

28、,，,Trip11,基因检测,未发现致病基因突变,例1：孕18周，双顶径4.0cm，股骨长1.1cm，颅骨骨化,突变,基因,转录本,编号,外显子编号,核苷酸,变化,氨基酸,变化,突变,位置,测序,深度,Hom/Het,遗传,类型,COL1A1,NM_000088,exon45,c.3307G>A,p.G1103S,chr17-48265299,14/14(0.50),het,AD,二代测序结果,301,医院,突变转录本外显子编号核苷酸氨基酸突变测序Hom/Het遗传C,,,例,2,:,孕,23,+5,，,双顶径,5.6,，股骨长,2.7cm,,股骨弯曲，四肢短小,301,医院,例2:孕23+5

29、，双顶径5.6，股骨长2.7cm,股骨弯曲，,例,5,：,30+3,，胎儿股骨偏短 ，羊水过多 ，双顶径,8.2,，股骨长,5.1,EVC,基因在复合杂合,,,,,例5：30+3，胎儿股骨偏短 ，羊水过多 ，双顶径8.2 ，,,初级纤毛相关遗传病,,分布在脊椎动物的多数细胞表面,,9+0,结构，,细胞天线,感受到多种类型的信号，如光、机械能、渗透压、温度及激素等,,结构和功能改变可引起多种疾病,,,,初级纤毛相关遗传病,罕见的一类遗传病,涉及人体多种器官，如肾脏、脑部、四肢、眼部、耳、肝脏、骨骼等。,包括多囊肾、肝胆疾病、多指,/,趾、胼胝体缺失、认知障碍、视网膜退化、后颅窝缺陷、骨骼异常、肥

30、胖等,,初级纤毛相关遗传病,罕见的一类遗传病初级纤毛相关遗传病,,初级纤毛相关遗传病,初级纤毛相关遗传病,Mechel,综合征胎儿大体所见,,显示枕骨缺损脑组织膨出，颈背部水肿,Mechel 综合征胎儿大体所见 显示枕骨缺损脑组织膨出,,Meckel,综合征胎儿大体解剖,III-3,,III-4,MKS3,基因突变,Meckel综合征胎儿大体解剖III-3 III-4MK,Meckel,综合征,--,TCTN2,基因突变,,,301,医院,,Meckel 综合征--TCTN2基因突变,Joubert,综合征,临床症状包括肌张力减退、共济失调、精神发育迟缓及动眼运动障碍、新生儿呼吸异常等。,

31、脑部核磁标志性特征为“磨牙征”,(,小脑吲部发育不全或缺失，小脑上脚增宽，后颅窝加深的征象,),。,Joubert,综合征相关病症,Joubert,并不同程度的累及其它器官，主要是肾和眼，尚有多指、肝脏纤维化等。,,Joubert 综合征临床症状包括肌张力减退、共济失调、精神,Joubert,综合征,(JBTS),case,：,第一孩儿童医院诊断,Joubert,综合征,二代测序找到突变（,CEP290,),再次怀孕超声提示胎儿小脑蚓部缺失,引产同时基因检测证实与先证者携带相同的基因突变,Joubert综合征 (JBTS) case：,多囊肾,婴儿型多囊肾：,PKHD1,多囊肾可以是其它初级纤

32、毛疾病的表型之一,,case,：,,孕期胎儿双侧多囊肾，羊水少，怀疑婴儿型多囊肾，引产基因检测没有发现,PKHD1,突变，结果发现,AHI1,基因突变，此基因可以引起,Joubert,综合征及,Meckel,综合征,提示发现多囊肾时要仔细检查其他部位，尤其是脑部,,多囊肾婴儿型多囊肾：PKHD1,,全外显子组测序,,,先天性关节挛缩病例,,两个异常孩子死亡，没有留下,DNA,？,1500,个基因，没有发现异常,,,全外显子组？,,全外显子组测序,,Abstract,,Send to:,,,Didn't get the message? Find out why...,See comment i

33、n PubMed Commons below,,Am J Hum Genet.,2013 Jan 10;92(1):150-6. doi: 10.1016/j.ajhg.2012.11.014. Epub 2012 Dec 20.,Mutations in,ECEL1,cause distal arthrogryposis type 5D.,McMillin MJ,1,,,Below JE,,,Shively KM,,,Beck AE,,,Gildersleeve HI,,,Pinner J,,,Gogola GR,,,Hecht JT,,,Grange DK,,,Harris DJ,,,Ea

34、rl DL,,,Jagadeesh S,,,Mehta SG,,,Robertson SP,,,Swanson JM,,,Faustman EM,,,Mefford HC,,,Shendure J,,,Nickerson DA,,,Bamshad MJ,;,University of Washington Center for Mendelian Genomics,,Abstract,,Send to:,,,Didn't get the message? Find out why...,See comment in PubMed Commons below,,Am J Hum Genet.,2

35、013 Jan 10;92(1):150-6. doi: 10.1016/j.ajhg.2012.11.014. Epub 2012 Dec 20.,Mutations in,ECEL1,cause distal arthrogryposis type 5D.,McMillin MJ,1,,,Below JE,,,Shively KM,,,Beck AE,,,Gildersleeve HI,,,Pinner J,,,Gogola GR,,,Hecht JT,,,Grange DK,,,Harris DJ,,,Earl DL,,,Jagadeesh S,,,Mehta SG,,,Robertso

36、n SP,,,Swanson JM,,,Faustman EM,,,Mefford HC,,,Shendure J,,,Nickerson DA,,,Bamshad MJ,;,University of Washington Center for Mendelian Genomics,,Abstract,,Send to:,,,Didn't get the message? Find out why...,See comment in PubMed Commons below,,Am J Hum Genet.,2013 Jan 10;92(1):150-6. doi: 10.1016/j.aj

37、hg.2012.11.014. Epub 2012 Dec 20.,Mutations in,ECEL1,cause distal arthrogryposis type 5D.,McMillin MJ,1,,,Below JE,,,Shively KM,,,Beck AE,,,Gildersleeve HI,,,Pinner J,,,Gogola GR,,,Hecht JT,,,Grange DK,,,Harris DJ,,,Earl DL,,,Jagadeesh S,,,Mehta SG,,,Robertson SP,,,Swanson JM,,,Faustman EM,,,Mefford

38、 HC,,,Shendure J,,,Nickerson DA,,,Bamshad MJ,;,University of Washington Center for Mendelian Genomics,Am J Hum Genet. 2013 Jan 10;92(1):150-6.,Mutations in ECEL1 cause distal arthrogryposis type 5D.,,Distal arthrogryposis (DA) syndromes are the most common of the heritable congenital-contracture dis

39、orders, and ~50% of cases are caused by mutations in genes that encode contractile proteins of skeletal myofibers.,DA type 5D (DA5D),is a rare, autosomal-recessive DA previously defined by us and is characterized by congenital contractures of the hands and feet, along with distinctive facial feature

40、s, including ptosis. We used linkage analysis and whole-genome sequencing of a multiplex consanguineous family to identify in endothelin-converting enzyme-like 1 (ECEL1) mutations that result in DA5D. Evaluation of a total of seven families affected by DA5D revealed in five families ECEL1 mutations

41、that explain ~70% of cases overall,Send to: Didn't get the messag,受试者接收促排卵药物,卵裂球或囊胚期少量细胞进行检测,孕期进行复查,健康婴儿,,PGD,流程图,,单精子胞浆内注射,,受精卵培养,完成遗传学诊断,,,选择无异常的胚胎植入母体,产前诊断,胚胎植入前诊断,（,preimplatation genetic diagnosis PGD,）,受试者接收促排卵药物卵裂球或囊胚期少量细胞进行检测孕期进行复,Inclusion criteria specific to PGD,Genetic diagnosis is certa

42、in or almost certain,High recurrence risk exists at conception for a specific genetic disorder.,As a consequence of this genetic disorder, serious health problems are expected,确定或几乎确定的遗传学的诊断,再发风险高,该类遗传病属于严重影响健康的疾病,Inclusion criteria specific to,,PGD,单细胞二代测序,囊胚期活检，,,PGD,MECKEL,综合征,婴儿型多囊肾,中央性核肌病,遗传性耳聋,马凡综合征,枫糖尿病,Lu Y, Peng H, Jin Z, Cheng J, Wang S, Ma M, Lu Y, Han D, Yao Y, Li Y, Yuan H. Preimplantation Genetic Diagnosis for a Chinese Family with Autosomal Recessive Meckel-Gruber Syndrome Type 3 (MKS3,).PLoS One. 2013 Sep 5;8(9):e73245,.,,PGD单细胞二代测序MECK,