重组技术工具1ppt模版.ppt

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1、1.1 DNA重组技术的基本工具,生长快、肉质好的转基因鱼(中国),乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),过程分析,基因工程的概念:,DNA重组技术的基本工具,准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) 限制性核酸内切酶 DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) DNA连接酶 基因转移工具(“分子运输车”) 基因进入受体细胞的载体,思考 :,原核生物为什么没有在长期的进化过程中由于外源DNA的入侵而灭绝,有什么保护机制?,限制性内切酶从哪里寻找?,1. 限制性核酸内切酶“分子手术刀”,限制性核酸内切酶的作用特点: 能识别DNA双链特定核苷酸序列; 从特定部位的两个核苷酸之间切开。,黏性末端和平末

2、端,连接酶种类:,黏性末端,平末端,DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点?,阅读思考:,3.基因进入受体细胞的载体“分子运输车”,(2) 运载体的作用:,质粒、 噬菌体的衍生物 动植物病毒等,将外源目的基因导入受体细胞,(1)常用的运载体:,(3)作为载体的必要条件,1、能够在受体细胞中能稳定地保存并能复制 2、对受体细胞无毒害作用 3、具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接; 4、具有某些标记基因,便于进行筛选。(如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等 ),常用的受体细胞:,大肠杆菌 谷草杆菌 酵母菌 动植物细胞,达标练习,在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使

3、用( ) 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 基因工程常用的受体细胞有( ) (1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌 (3)支原体 (4)动植物细胞 A. (3)(4) B. (1)(2)(4) C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3),A、 BamHI和EcoRI;末端互补序列AATT B、 BamHI和Hind;末端互补序列GATC C、 EcoRI和Hind;末端互补序列AATT D、 BamHI和BglII;末端互补序列GATC,限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上 特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI, EcoRI,Hind以及Bgl

4、的辨识序列。箭头表示 每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶 所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确 的末端互补序列为何?( ),不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 ( ) B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA,D,补救练习,基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( ) A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达,C,一、基因工程的概念. 二、DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶-”分子手术刀” 2. DNA连接酶-”分子缝合针” 3 基因的运载工具运载体:具备条件,本课小结:,分类 作用,来源 作用 特点 结果,作业: 重组DNA分子的模拟制作。,效果分析:,谢谢各位!,

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